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    Caracterização parcial de amido em cultivares brasileiros de cevada (Hordeum vulgare L.)

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    Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciência dos AlimentosNeste trabalho foram analisados dois cultivares brasileiros de cevada com o objetivo de se determinar a composição físico-química da farinha, realizar o isolamento do amido, determinar a composição química do mesmo e avaliar o poder de inchamento e solubilidade relacionando estas propriedades com a composição química do amido isolado. Na segunda parte deste trabalho foram estudadas as propriedades térmicas, microscópicas e reológicas do amido isolado. Os cultivares selecionados foram: o cervejeiro, BR-2 e um nu, ainda em caráter experimental no país. As análises físico-químicas foram conduzidas seguindo as normas da American Association of Cereal Chemists (AACC) e todas foram realizadas em triplicata, considerando-se significativo valores de p £ 0,05. Os resultados da composição físico-química da farinha, mostraram valores significativamente diferentes entre os dois cultivares (p £ 0,05). Não foram observadas diferenças significativas para os valores de b-glucanas. O amido isolado apresentou diferença significativa para os teores de amido, proteínas, lipídios, amilose e cinzas (p £ 0,05). O conteúdo de amilose parece ter influenciado diretamente nas características de inchamento e solubilidade. Para as propriedades térmicas foram observadas diferenças (p £ 0.05) quanto à temperatura de gelatinização. O estudo de retrogradação (8 dias de estocagem/ 4 ºC) revelou que os dois cultivares apresentaram índices elevados da mesma ( > 70%). A microscopia óptica aliada à técnica de DSC, pôde ilustrar e confirmar a perda de birrefringência durante o processo de gelatinização. As propriedades de pasta revelaram maior pico de viscosidade para o cultivar nu. As curvas de fluxo realizadas caracterizaram o amido isolado como dilatante e os experimentos oscilatórios demonstraram que G' e G" comportaram-se de maneira semelhante durante o aquecimento e resfriamento da suspensão de amido. Os valores de tan d diminuíram a medida que G' e G" aumentavam comprovando a formação de gel. As diferenças observadas entre os dois cultivares com relação às demais análises realizadas podem ter sido resultantes das técnicas de escolha para o isolamento e/ou ainda devido às características genéticas e ambientais de cada cultivar

    Caracterização físcico-química, morfológica e influência da reticulação em suspensões precursoras e biofilmes de gliadina

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    Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-Graduação em Quimica.No presente trabalho foram estudadas suspensões de gliadina não modificada (ou nativa) e reticuladas na ausência e presença de glicerol como plastificante. Para a reticulação foram utilizados hidrocloreto de 1-(3-dimetilaminopropil-3-etil-carbodiimida) [EDC/NHS] e L-cisteína. A caracterização e comparação dos diferentes sistemas foram realizadas através da técnica de espalhamento de raios X a baixos ângulos (SAXS) a qual possibilitou a obtenção dos raios de giro (Rg) e raio da secção transversal (Rc) através da análise de Guinier. De maneira complementar, a análise de Kratky também foi empregada para a investigação das mudanças conformacionais da proteína. A fim de prosseguir a análise do comportamento em suspensão foram estudadas as propriedades viscoelásticas de suspensões de gliadina reticuladas e não reticuladas em presença e ausência de glicerol. Nos experimentos em domínio linear, foram obtidas curvas de viscosidade para os sistemas nativos e reticulados em função da concentração de glicerol como plastificante. Os experimentos oscilatórios permitiram a obtenção dos parâmetros G' (módulo de estocagem ou módulo elástico), G" (módulo de perda) e tan (G"/G'). A variação de concentração tanto de L-cisteína quanto EDC/NHS , perante ausência e presença de glicerol, permitiu considerar a influência do plastificante na velocidade de reticulação e a dependência do tempo para que a mesma ocorra. Para os filmes formados foram realizadas análises de caracterização por calorimetria diferencial exploratória (DSC), análise termogravimétrica (TG ou TGA) e espectroscopia na região do infravermelho (FTIR). Numa segunda etapa foram realizados ensaios mecânicos a diferentes umidades relativas para obtenção dos parâmetros: tensão máxima, deformação na ruptura e módulo elástico ou de Young serão analisados. Com o intuito de se observar mais criteriosamente como a água é absorvida nos filmes, isotermas de adsorção de umidade foram obtidas e, parâmetros matemáticos de ajuste tais como Oswin e BET foram empregados para comparação e adaptação aos dados experimentais obtidos. O presente estudo permitiu considerar as mudanças promovidas pelos agentes de reticulação, EDC/NHS, cisteína e ainda considerar a adição do plastificante no processo de aceleração de reticulação, o qual proporcionou mudanças não somente em suspensão, como também nos biofilmes de gliadina formados. A análise de espalhamento de raio X possibilitou o entendimento das prováveis conformações da gliadina mediante a adição de diferentes agentes de reticulação enquanto que experimentos reológicos viabilizaram o entendimento da proteína em suspensão e de que forma as estruturas previamente discutidas por SAXS puderam contribuir para o comportamento mais ou menos elástico e/ou viscoso. Os biofilmes formados e caracterizados apresentaram diferenças em suas propriedades no que se refere aos diferentes reticulantes, e ainda, quanto a presença e ausência de glicerol como plastificante

    Producción de lipasas a partir de hongos endofíticos de Aniba canelilla, caracterización y aplicación del extracto enzimático

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    Endophytic fungi (EF) have a notable capacity to produce active molecules of industrial importance, such as hydrolytic enzymes. In this study we investigated the production of lipase by EFs isolated from the Amazonian species Aniba canelilla (Lauraceae), characterized the enzymatic extract obtained from the most promising fungus, and applied the lipolytic extract as a biocatalyst in the transesterification reaction for biodiesel production. The fungi were submitted to enzymatic screening in solid medium and in submerged fermentation to assess their lipase production. A total of 292 fungi were tested in solid media. Lipolytic activity was detected in 74% of the fungi cultivated in liquid media, 18 of which showing promising enzymatic production. The best lipase producer, Endomelanconiopsis endophytica QAT_7AC, was identified by sequencing of the ITS region. After adjusting the bioprocess conditions, E. endophytica QAT_7AC produced 2,415.5 U/mL of lipase after 72 h. The enzymatic extract showed higher lipolytic activity under pH 8.0 and 40 oC. The extract was applied as a biocatalyst in a transesterification reaction performed at 40 oC, with ethanol and waste cooking oil (3:1). The biodiesel yield was found to be 87% after 2 h rection when the fungal enzyme was used and 89% with the commercial biocatalyst. The endophytic fungi isolated from A. canelilla proved themselves to be biotechnologically relevant, as they can be explored as potential producers of lipases. The lipolytic extract can be applied in the synthesis of biodiesel using waste cooking oil.Os fungos endofíticos (FE) possuem notável capacidade de produzir moléculas ativas de importância industrial, como as enzimas hidrolíticas. Neste estudo foi investigada a produção de lipase por FEs isolados da espécie amazônica Aniba canelilla (Lauraceae), sendo caracterizado o extrato enzimático obtido a partir do fungo mais promissor e avaliada a aplicação do extrato lipolítico como biocatalisador na reação de transesterificação para a produção de biodiesel. Os fungos foram submetidos à triagem enzimática em meio sólido e por fermentação submersa, para verificar a produção de lipase. Um total de 292 fungos foram testados em meio sólido. A atividade lipolítica detectada em 74% dos fungos cultivados em meio líquido, onde 18 apresentaram atividade enzimática promissora. O melhor produtor de lipase, Endomelanconiopsis endophytica QAT_7AC, foi identificado pelo sequenciamento da região ITS. Após o ajuste das condições do bioprocesso, o E. endophytica QAT_7AC produziu 2.415,5 U/mL de lipase em 72 h. O extrato enzimático apresentou maior atividade lipolítica em pH 8,0 e 40 °C. O extrato foi aplicado como biocatalisador em uma reação de transesterificação realizada a 40 °C, com etanol e óleo de cozinha residual (3:1). O rendimento de biodiesel foi de 87% após 2 h de reação quando a enzima fúngica foi utilizada e de 89% com o biocatalisador comercial. Os fungos endofíticos isolados de A. canelilla mostraram-se biotecnologicamente relevantes e podem ser explorados como potenciais produtores de lipases. O extrato lipolítico pode ser aplicado na síntese de biodiesel a partir do óleo de cozinha residual.Los hongos endofíticos (EF) tienen una notable capacidad de producir moléculas activas de importancia industrial, como las enzimas hidrolíticas. En este estudio investigamos la producción de lipasa por hongos aislados de la especie Amazónica Aniba canelilla (Lauraceae), caracterizamos el extracto enzimático obtenido de lo hongo más promisor y aplicamos el extracto lipolítico como biocatalizador en la reacción de transesterificación para la producción de biodiésel. Los hongos aislados fueron sometidos a un cribado enzimático en medio sólido y fermentación sumergida para avaluar la producción de lipasa. Un total de 292 hongos fueron testados. La actividad lipolítica fue detectada en el 74% de los hongos cultivados en medio líquido, 18 de los cuales presentaron producción enzimática promisoria. El mejor productor de lipasa, Endomelanconiopsis endophytica QAT_7AC, fue identificado por el secuenciamento de la región ITS. Después del ajuste de las condiciones del bioproceso, E. endophytica QAT_7AC produjo 2,415.5 U/mL de lipasa en 72 h. El extracto enzimático presento mayor actividad lipolítica a pH 8.0 y 40 oC. El extracto enzimático fue aplicado como biocatalizador en una reacción de transesterificación realizada a 40 oC con etanol y aceite de cocina usado (3:1). El rendimiento del biodiesel fue de 87% después de 2 h de reacción cuando la enzima fúngica fue utilizada y 89% con el biocatalizador comercial. Los hongos endofíticos aislados de A. canelilla fueron biotecnológicamente relevantes, y pueden ser explorados como potenciales productores de lipasas. El extracto enzimático lipolítico puede ser aplicado en la síntesis de biodiesel utilizando aceite de cocina usado
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