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Implicaci贸n funcional de la mutaci贸n BMPR2-p.Ser987Phe en la etiolog铆a de la insuficiencia ov谩rica primaria no sindr贸mica
No full textLa insuficiencia ov谩rica primaria (IOP) es una enfermedad frecuente que se caracteriza por amenorrea antes de los 40 a帽os y niveles elevados de gonadotropinas. En un estudio previo, efectuado mediante secuenciaci贸n de siguiente generaci贸n (NGS) en 70 genes candidatos, se identific贸 la mutaci贸n c.2960C>T (p.Ser987Phe) en el gen BMPR2. La mutaci贸n estaba localizada en el dominio C-terminal, lo que podr铆a modificar su plegamiento y su interacci贸n con otras prote铆nas. Por lo tanto, se evalu贸 el potencial efecto patog茅nico de la mutaci贸n BMPR2-p.Ser987Phe a nivel de la localizaci贸n subcelular. Las formas silvestre y mutante de BMPR2, clonadas en fase con GFP en un pl谩smido de expresi贸n, fueron transfectadas en las c茅lulas CHO. Las c茅lulas fueron tratadas con un marcador de localizaci贸n del ret铆culo endopl谩smico (RE) y visualizadas en un microscopio de fluorescencia para su caracterizaci贸n y conteo. El conteo celular permiti贸 observar en las c茅lulas transfectadas con la versi贸n mutante, un aumento estad铆sticamente significativo de agregados localizados en el RE. La falta de biodisponibilidad potencial de BMPR2 en la membrana celular, debido a la retenci贸n proteica producida por la mutaci贸n p.Ser987Phe, podr铆a perturbar las v铆as de se帽alizaci贸n intracelular. Por lo tanto, se propuso una relaci贸n funcional entre la mutaci贸n c.2960C>T y la etiolog铆a de la IOP. Adem谩s, se realiz贸 un tamizaje de las potenciales prote铆nas de interacci贸n con BMPR2, mediante el ensayo de doble h铆brido en levaduras (Y2H), utilizando una librer铆a de ovario de rat贸n. Se identificaron cuatro prote铆nas con una muy alta probabilidad de interacci贸n: Limk1, Ctnnd1, Fasn y Fn1
Implicaci贸n funcional de la mutaci贸n BMPR2-p.Ser987Phe en la etiolog铆a de la insuficiencia ov谩rica primaria no sindr贸mica
No full textLa insuficiencia ov谩rica primaria (IOP) es una enfermedad frecuente que se caracteriza por amenorrea antes de los 40 a帽os y niveles elevados de gonadotropinas. En un estudio previo, efectuado mediante secuenciaci贸n de siguiente generaci贸n (NGS) en 70 genes candidatos, se identific贸 la mutaci贸n c.2960C>T (p.Ser987Phe) en el gen BMPR2. La mutaci贸n estaba localizada en el dominio C-terminal, lo que podr铆a modificar su plegamiento y su interacci贸n con otras prote铆nas. Por lo tanto, se evalu贸 el potencial efecto patog茅nico de la mutaci贸n BMPR2-p.Ser987Phe a nivel de la localizaci贸n subcelular. Las formas silvestre y mutante de BMPR2, clonadas en fase con GFP en un pl谩smido de expresi贸n, fueron transfectadas en las c茅lulas CHO. Las c茅lulas fueron tratadas con un marcador de localizaci贸n del ret铆culo endopl谩smico (RE) y visualizadas en un microscopio de fluorescencia para su caracterizaci贸n y conteo. El conteo celular permiti贸 observar en las c茅lulas transfectadas con la versi贸n mutante, un aumento estad铆sticamente significativo de agregados localizados en el RE. La falta de biodisponibilidad potencial de BMPR2 en la membrana celular, debido a la retenci贸n proteica producida por la mutaci贸n p.Ser987Phe, podr铆a perturbar las v铆as de se帽alizaci贸n intracelular. Por lo tanto, se propuso una relaci贸n funcional entre la mutaci贸n c.2960C>T y la etiolog铆a de la IOP. Adem谩s, se realiz贸 un tamizaje de las potenciales prote铆nas de interacci贸n con BMPR2, mediante el ensayo de doble h铆brido en levaduras (Y2H), utilizando una librer铆a de ovario de rat贸n. Se identificaron cuatro prote铆nas con una muy alta probabilidad de interacci贸n: Limk1, Ctnnd1, Fasn y Fn1
