PD-L1 expression is induced on cytokine-stimulated human NK cells and contributes to IFN-γ production

Natural Killer (NK) cells are critical effectors against tumor and virus-infected cells, and their activity is modulated by multiple inhibitory and activating receptors and cytokines. Tumor-experienced NK cells express high levels of PD-L1, and PD-L1+ NK cells inhibit T cell priming. PD-L1 cell-intrinsic signaling pathways were described in tumor cells. The objective of this work was to study PD-L1 expression on cytokine-stimulated human NK cells and to evaluate PD-L1-mediated regulation of NK cell effector functions.Fil: Sierra, Jessica Mariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Secchiari, Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Nuñez, Sol Yanel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Regge, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Friedrich, Adrián David. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Santilli, Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Domaica, Carolina Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Zwirner, Norberto Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Fuertes, Mercedes Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaLVII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de InmunologíaTucumánArgentinaSociedad Argentina de Inmunologí

Circulating and tumor-infiltrating NK cells from clear cell renal cell carcinoma patients exhibit a predominantly inhibitory phenotype characterized by overexpression of CD85j, CD45, CD48 and PD-1

Although natural killer (NK) cells infiltrate clear cell renal cell carcinomas (ccRCC), the most frequent malignancy of the kidney, tumor progression suggests that they become dysfunctional. As ccRCC-driven subversion of NK cell effector functions is usually accompanied by phenotypic changes, analysis of such alterations might lead to the identification of novel biomarkers and/or targets in immuno-oncology. Consequently, we performed a phenotypic analysis of peripheral blood NK cells (PBNK) and tumor-infiltrating NK cells (TINK) from ccRCC patients. Compared to HD, PBNK from ccRCC patients exhibited features of activated cells as shown by CD25, CD69 and CD62L expression. They also displayed increased expression of DNAM-1, CD48, CD45, MHC-I, reduced expression of NKG2D, and higher frequencies of CD85j+ and PD-1+ cells. In addition, compared to PBNK from ccRCC patients, TINK exhibited higher expression of activation markers, tissue residency features and decreased expression of the activating receptors DNAM-1, NKp30, NKp46, NKp80 and CD16, suggesting a more inhibitory phenotype. Analysis of The Cancer Genome Atlas (TCGA) revealed that CD48, CD45, CD85j and PD-1 are significantly overexpressed in ccRCC and that their expression is associated with an NK cell infiltration signature. Calculation of z-scores revealed that their expression on PBNK, alone or combined, distinguished ccRCC patients from HD. Therefore, these molecules emerge as novel potential biomarkers and our results suggest that they might constitute possible targets for immunotherapy in ccRCC patients.Fil: Ziblat, Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Raffo Iraolagoitia, Ximena Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Nuñez, Sol Yanel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Torres, Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Secchiari, Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Sierra, Jessica Mariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Spallanzani, Raúl Germán. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Rovegno, Agustín. Centro de Educación Médica e Investigaciones Clínicas "Norberto Quirno"; ArgentinaFil: Secin, Fernando Pablo. Centro de Educación Médica e Investigaciones Clínicas "Norberto Quirno"; ArgentinaFil: Fuertes, Mercedes Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Domaica, Carolina Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Zwirner, Norberto Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentin

Regulatory NK cells in antitumor immune response

Las células Natural Killer (NK) cumplen un papel clave en la inmunovigilancia tumoral. Sin embargo, las células NK de pacientes con cáncer muestran un fenotipo alterado y una disminución en sus funciones efectoras. Además, está surgiendo evidencia de un rol regulatorio de las células NK en diversos modelos de infección viral, trasplante y autoinmunidad. En este trabajo, realizamos un análisis bioinformático de datos genómicos y clínicos disponibles en The Cancer Genome Atlas(TCGA) de pacientes con carcinoma renal de células claras (ccRCC) y observamos que una mayor expresión de genes característicos de células NK se asocia con menor sobrevida, lo que sugiere que las células NK podrían estar teniendo un rol regulatorio. El análisis de muestras tumorales frescas obtenidas de pacientes con ccRCC reveló la presencia de una alta frecuencia de células NK infiltrantes del tumor que expresan la molécula inhibitoria PD-L1. In vitro, la expresión de PD-L1 fue inducida en células NK de donantes sanos luego del reconocimiento de células tumorales a través de NKG2D. Esta expresión se vio aumentada por la acción de IL-18, producida por monocitos como consecuencia del reconocimiento directo de las células tumorales y su posterior fagocitosis. Además, las células NK PD-L1+ generadas in vitro mostraron un fenotipo activado y mayor capacidad efectora comparadas con las células NK PD-L1-, pero simultáneamente, inhibieron en forma directa la proliferación de los linfocitos T CD8+ de manera dependiente de PD-L1. Nuestros resultados sugieren que los tumores podrían conducir al desarrollo de células NK que expresan PD-L1 y adquieren funciones inmunoregulatorias en humanos. Por lo tanto, la manipulación racional de estas células surge como una posibilidad que puede conducir a mejorar la respuesta inmune antitumoral en pacientes con cáncer.Natural Killer (NK) cells play a key role in cancer immunosurveillance. However, NK cells from cancer patients display an altered phenotype and impaired effector functions. In addition, evidence of a regulatory role for NK cells is emerging in diverse models of viral infection, transplantation, and autoimmunity. Here, we performed a bioinformatic analysis of genomic and clinic clear cell renal cell carcinoma (ccRCC) datasets from The Cancer Genome Atlas (TCGA) and observed that a higher expression of NK cell signature genes is associated with reduced survival, suggesting that NK cells might exhibit immunoregulatory functions. Analysis of fresh tumor samples from ccRCC patients unraveled the presence of a high frequency of tumor-infiltrating NK cells expressing the inhibitory molecule PD-L1. In vitro, PD-L1 expression was induced on NK cells from healthy donors upon direct tumor cell recognition through NKG2D. This expression was further up-regulated by monocyte-derived IL-18, as a consequence of direct recognition and following phagocytosis of tumor cells. Moreover, in vitro generated PD-L1+ NK cells displayed an activated phenotype and enhanced effector functions compared to PD-L1- NK cells, but simultaneously, they directly inhibited CD8+ T cell proliferation in a PD-L1-dependent manner. Our results suggest that tumors might drive the development of PD-L1-expressing NK cells that acquire immunoregulatory functions in humans. Hence, rational manipulation of these regulatory cells emerges as a possibility that may lead to improved anti-tumor immunity in cancer patients.Fil: Sierra, Jessica Mariel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina

Phenotype and functional alterations of human NK cells by organophosphate pesticides

Chlorpyrifos (CPF) and Glyphosate (GLY) are organophosphate pesticides widely used in agriculture. Several evidences suggest that CPF- and GLY-based pesticides are genotoxic and their use has been linked to the increased frequency of malignancies observed in highly fumigated rural areas. However, their effect on the immune system, including cells involved in immunosurveillance of tumor cells, has been poorly explored. Here, we investigated the effects of two commercial formulations containing CPF (Clorpi48) and GLY (Roundup Plus) as well as their isolated active principles on the phenotype and function of human NK cells. First, we identified sub-apoptotic doses of these substances by flow cytometry performing a dose-response curve with human peripheral blood mononuclear cells (PMBC). Next, using such sub-apoptotic doses, we analyzed the phenotype of pesticide-treated NK cells. We observed a pesticide dose-dependent reduction in the expression of CD16 and CD62L on NK cells after a 24 h of culture with CPF, GLY, Roundup and Clorpi48. Moreover, a diminished frequency of IFN--producing NK cells was observed upon exposure of cytokine-stimulated NK cells to 5 mM GLY, 0.05 mM Roundup, 0.01 mM Clorpi48 but not to 0.02 mM CPF (p<0.05). Moreover, NK cell-mediated cytotoxicity against K562 cells was also affected by pesticide treatment. After 0.05 mM Roundup and 0.01 mM Clorpi48 treatment, cytotoxicity was reduced by 27% (p<0.01) and 29% (p<0.001), respectively. In accordance with previous scientific evidence, final formulations of pesticides (which include additional compounds such as polyethoxylated alkylamines surfactants that facilitate their absorption by cells and tissues) showed a more potent effect on phenotype and function of NK cells than the isolated compounds. Therefore, we conclude that GLY- and CPF-based pesticides affect NK phenotype and function, which might impact on their ability to detect and eliminate nascent tumor cells.Fil: Friedrich, Adrián David. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Bioquímica y Farmacia. Cátedra de Inmunología; ArgentinaFil: Sierra, Jessica Mariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Regge, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Santilli, Maria Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Trotta, Aldana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Secchiari, Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Domaica, Carolina Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Fuertes, Mercedes Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Zwirner, Norberto Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaAnnual Meeting of Bioscience Societies 2021: LXVI Annual Meeting of Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC), LXIX Annual Meeting of Sociedad Argentina de Inmunología(SAI), LIII Annual Meeting of Asociación Argentina de Farmacología Experimental (AAFE), XI Annual Meeting of Asociación Argentina de Nanomedicinas (NANOMED-Ar)Buenos AiresArgentinaSociedad Argentina de Investigación ClinicaSociedad Argentina de InmunologíaAsociación Argentina de Farmacología ExperimentalAsociación Argentina de Nanomedicin

Human M2 macrophages limit NK cell effector functions through secretion of TGF-b and engagement of CD85j

NK cells play important roles during immunosurveillance against tumors and viruses as they trigger cytotoxicity against susceptible cells and secrete pro-inflammatory cytokines such as IFN-g. In addition, upon activation, macrophages can become pro-inflammatory (M1) or anti inflammatory (M2) cells. Although the consequences of the crosstalk between M1 and NK cells are known, the outcome of the crosstalk between M2 and NK cells remains ill-defined. Therefore, in the current work, we investigated the outcome and the underlying mechanisms of the interaction between resting or stimulated human NK cells with M1 or M2. We observed a lower percentage of activated NK cells that produced less IFN-g upon co-culture with M2. Also, CD56dim NK cells co-cultured with M2 displayed lower degranulation and cytotoxic activity than NK cells co-cultured with M1. Soluble TGF-b and M2-driven up-regulation of CD85j (ILT-2)on NK cells accounted for the diminished IFN-g production by CD56bright NK cells, while M2-driven up-regulation of CD85j on NK cells accounted for the generation of hyporesponsive CD56dim NK cells with limited degranulation and cytotoxic capacity. Accordingly, M2 expressed higher amounts of HLA-G, the main ligand for CD85j, than M1. Hyporesponsiveness to degranulation in NK cells was not restored at least for several hours upon removal of M2. Therefore, alternatively-activated macrophages restrain NK cell activation and effector functions through different mechanisms, leading to NK cells that display diminished IFN-g production and at least a transiently impaired degranulation ability. These results unravel an inhibitory circuit of possible relevance in pathological situations.Fil: Nuñez, Sol Yanel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Ziblat, Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Secchiari, Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Torres, Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Sierra, Jessica Mariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Raffo Iraolagoitia, Ximena Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Araya, Romina Elizabeth. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Domaica, Carolina Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Fuertes, Mercedes Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Zwirner, Norberto Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentin

Membrane hyperpolarization abolishes calcium oscillations that prevent induced acrosomal exocytosis in human sperm

Sperm capacitation is essential to gain fertilizing capacity. During this process, a series of biochemical and physiological modifications occur that allow sperm to undergo acrosomal exocytosis (AE). At the molecular level, hyperpolarization of the sperm membrane potential (Em) takes place during capacitation. This study shows that human sperm incubated under conditions that do not support capacitation (NC) can become ready for an agonist stimulated AE by pharmacologically inducing Em hyperpolarization with Valinomycin or Amiloride. To investigate how Em hyperpolarization promotes human sperm?s ability to undergo AE, live single-cell imaging experiments were performed to simultaneously monitor changes in [Ca2+]i and the occurrence of AE. Em hyperpolarization turned [Ca2+]i dynamics in NC sperm from spontaneously oscillating into a sustained slow [Ca2+]i increase. The addition of progesterone (P4) or K+ to Valinomycin-treated sperm promoted that a significant number of cells displayed a transitory rise in [Ca2+]i which then underwent AE. Altogether, our results demonstrate that Em hyperpolarization is necessary and sufficient to prepare human sperm for the AE. Furthermore, this Em change decreased Ca2+ oscillations that block the occurrence of AE, providing strong experimental evidence of the molecular mechanism that drives the acquisition of acrosomal responsiveness.Fil: Balestrini, Paula Ania. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Sanchez Cardenas, Claudia. Universidad Nacional Autónoma de México. Instituto de Biotecnología. Departamento de Genética del Desarrollo y Fisiología Molecular; MéxicoFil: Luque, Guillermina Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Baró Graf, Carolina. Universidad Nacional Autónoma de México. Instituto de Fisiología Celular; MéxicoFil: Sierra, Jessica Mariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Hernández Cruz, Arturo. Universidad Nacional Autónoma de México. Instituto de Fisiología Celular; MéxicoFil: Visconti, Pablo E.. University of Massachusetts Amherst. Department of Veterinary and Animal Sciences; Estados UnidosFil: Krapf, Dario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Darszon, Alberto. Universidad Nacional Autónoma de México. Instituto de Biotecnología. Departamento de Genética del Desarrollo y Fisiología Molecular; MéxicoFil: Buffone, Mariano Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentin

Characterization of tumor infiltrating NK cells (TINK) and type 1 innate lymphoid cells (ILC1) in breast cancer

ILC1 and NK cells share several phenotypic and functional characteristics and display plasticity because they can interconvert one into another in a context-dependent manner. Indeed, TGF-β-driven conversion of TINK into intermediate populations of ILC1 (intILC1) and ILC1 has been proposed as a tumor immune escape mechanism.Fil: Santilli, Maria Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Regge, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Gantov, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Friedrich, Adrián David. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Sierra, Jessica Mariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Secchiari, Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Trotta, Aldana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Rubinsztain, Maria Natalia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Lozada Montanari, Belén Candela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Fuertes, Mercedes Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Zwirner, Norberto Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Domaica, Carolina Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaReunión de Sociedades de Biociencia 2021ArgentinaSociedad Argentina de Investigación ClinicaSociedad Argentina de InmunologíaAsociación Argentina de Farmacología ExperimentalAsociación Argentina de Nanomedicin

NK cells restrain spontaneous antitumor CD8+ T cell priming through pd-1/pd-l1 interactions with dendritic cells

Despite the classical function of NK cells in the elimination of tumor and of virus-infected cells, evidence for a regulatory role for NK cells has been emerging in different models of autoimmunity, transplantation, and viral infections. However, this role has not been fully explored in the context of a growing tumor. In this article, we show that NK cells can limit spontaneous cross-priming of tumor Ag-specific CD8+ T cells, leading to reduced memory responses. After challenge with MC57 cells transduced to express the model Ag SIY (MC57.SIY), NK cell–depleted mice exhibited a significantly higher frequency of SIY-specific CD8+ T cells, with enhanced IFN-g production and cytotoxic capability. Depletion of NK cells resulted in a CD8+ T cell population skewed toward an effector memory T phenotype that was associated with enhanced recall responses and delayed tumor growth after a secondary tumor challenge with B16.SIY cells. Dendritic cells (DCs) from NK cell–depleted tumor-bearing mice exhibited a more mature phenotype. Interestingly, tumor-infiltrating and tumor-draining lymph node NK cells displayed an upregulated expression of the inhibitory molecule programmed death ligand 1 that, through interaction with programmed death-1 expressed on DCs, limited DC activation, explaining their reduced ability to induce tumor-specific CD8+ T cell priming. Our results suggest that NK cells can, in certain contexts, have an inhibitory effect on antitumor immunity, a finding with implications for immunotherapy in the clinic.Fil: Raffo Iraolagoitia, Ximena Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Spallanzani, Raúl Germán. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Torres, Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Araya, Romina Elizabeth. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Ziblat, Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Domaica, Carolina Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Sierra, Jessica Mariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Nuñez, Sol Yanel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Secchiari, Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Gajewski, Thomas F.. University of Chicago; Estados UnidosFil: Zwirner, Norberto Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Fuertes, Mercedes Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentin

Restoration of antitumor immunity through anti-MICA antibodies elicited with a chimeric protein

Background Natural killer and cytotoxic CD8+ T cells are major players during antitumor immunity. They express NKG2D, an activating receptor that promotes tumor elimination through recognition of the MHC class I chain-related proteins A and B (MICA and MICB). Both molecules are overexpressed on a great variety of tumors from different tissues, making them attractive targets for immunotherapy. However, tumors shed MICA and MICB, and the soluble forms of both (sMICA and sMICB) mediate tumor-immune escape. Some reports indicate that anti-MICA antibodies (Ab) can promote the restoration of antitumor immunity through the induction of direct antitumor effects (antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC) and scavenging of sMICA. Therefore, we reasoned that an active induction of anti-MICA Ab with an immunogenic protein might represent a novel therapeutic and prophylactic alternative to restore antitumor immunity.Methods We generated a highly immunogenic chimeric protein (BLS-MICA) consisting of human MICA fused to the lumazine synthase from Brucella spp (BLS) and used it to generate anti-MICA polyclonal Ab (pAb) and to investigate if these anti-MICA Ab can reinstate antitumor immunity in mice using two different mouse tumors engineered to express MICA. We also explored the underlying mechanisms of this expected therapeutic effect.Results Immunization with BLS-MICA and administration of anti-MICA pAb elicited by BLS-MICA significantly delayed the growth of MICA-expressing mouse tumors but not of control tumors. The therapeutic effect of immunization with BLS-MICA included scavenging of sMICA and the anti-MICA Ab-mediated ADCC, promoting heightened intratumoral M1/proinflammatory macrophage and antigen-experienced CD8+ T cell recruitment.Conclusions Immunization with the chimeric protein BLS-MICA constitutes a useful way to actively induce therapeutic anti-MICA pAb that resulted in a reprogramming of the antitumor immune response towards an antitumoral/proinflammatory phenotype. Hence, the BLS-MICA chimeric protein constitutes a novel antitumor vaccine of potential application in patients with MICA-expressing tumors