Atmospheric Pressure Cold Plasma and Ozone Technologies: Unconventional Treatments in the Dairy Field. Study of effects on milk proteins as model systems and relevant case studies

Among non-thermal technologies, atmospheric pressure cold plasma (ACP) and ozone treatments have gained enormous pace especially for their safety assurance and sustainability. Many studies and data regarding ACP inactivation of food-borne pathogens are already available in the literature. Most of them concern the decontamination by microorganisms in buffer or food matrices. However, ACP provides opportunities in several other applications including the modifications of food properties for improved functionality and healthy products. The interaction between ACP and whey protein isolate (WPI) and alkaline phosphatase (ALP) enzyme model solutions were investigated in two different experiments. The aims were to study the effects on structure and functionality of the whey protein solutions and structure and residual enzymatic activity of the enzyme solution. In both cases, the findings covered a gap in the dairy field where the general information and research were insufficient. In the first experiment, the results showed an increase in yellow colour and a minor reduction in the pH value in the whey protein solutions (2% w/v). These results were attributed to the reactions of reactive oxygen and nitrogen species of the plasma diffusing into the liquid. The carbonyl groups and the surface hydrophobicity increased, in addition to the reduction of free sulfhydryl (SH) groups, probably due to mild oxidation, which occurred in the proteins following the ACP treatments for 15 min. The protein structure modifications revealed a certain degree of unfolding, which improve foaming and emulsifying capacity. Upon extended treatment for 30 and 60 min, the changes were quite pronounced: the carbonyl and sulfhydryl groups reached equilibrium, the surface hydrophobicity remarkably increased and small aggregates were formed. Overall, the foaming and emulsifying capacity dramatically decreased against an increase of foam stability. In the second experiment, the ALP subjected to the ACP was inactivated in a few seconds and the Weibull model was found to best describe the observed variance in residual activity for all the voltages applied. The results from the circular dichroism spectroscopy revealed a predominance of the \u3b1-helix structure, with a tendency to decrease with increasing treatment time and voltage. The ACP treatment did not affect the temperature and pH of the enzyme solution. Since it is well known that protein functionality and protein structure are strictly connected, in the third experiment possible modifications in the secondary structure of WPI in powder treated with ACP at different voltages and times were studies, throughout the Fourier Transform-Infrared (FTIR) spectroscopy. The second derivate of the amide I region of the spectra is obtained and the results show that the \u3b2-structures are relatively more stable compared to the \u3b1-helix. Changes in the \u3b1-helical structure are evident, and significantly affected by treatment time, at the lower voltage applied than the higher, for which no definite trend is recorded. The study on model systems of whey proteins is also extended using solely the gaseous ozone at a high concentration in order to evaluate the changes in protein structure and their consequences on selected functional properties (fourth experiment). The results show a reduction of free SH groups and an increase in surface hydrophobicity, indicating a self-rearrangement in the protein structure following ozonation. Thus, ozonation allows for the creation of a more flexible structure without forming a strong network of disulphide bonds or aggregations (confirmed by the turbidity analysis and SDS-PAGE). Moreover, ozone processing induces modifications that improve foaming capacity and foam stability, however, a slight reduction in the solubility is encountered. It is a well-known fact that ozone has a strong oxidant potential and the main applicability is related to the decontamination of foods, so the fifth and sixth experiments were focused on relevant case studies in the dairy field. The fourth one aimed to evaluate ozone effectiveness in reducing viable spoilage bacteria load throughout the high moisture (HM) Mozzarella cheese-making process. Many approaches in different phases of processing were tested but the ozone (gaseous and also solubilised in water) was not effective in surface microbiological decontamination of cheeses. However, it can be successfully applied in Mozzarella cheese processing only to decontaminate water contaminated by potential spoilage bacteria before coming into contact with the product. Finally, the last experiment aimed to reduce the microbial load of cheese brines contaminated by the reuse. The different ozone concentrations tested obtained a sufficient Log reduction. Moreover, considering the intermediate concentration tested (0.40 \ub1 0.2 ppm), the treatment time was extended up to 240 min to obtain a 4-Log reduction of the total microbial count (TMC) and other microorganisms considered. The longer the treatment time, the better the sanitisation effect. When the cheese brine samples with different protein contents (from 0.20 to 1.30 g/100 g) were treated, different levels of microbial inactivation were obtained: the higher the protein content, the lower the microbial reduction

Avaliação em língua estrangeira no ENEM : um estudo das questões de língua espanhola

Dada a recente revogação da Lei Nº 11.161, a Lei do Espanhol, que era responsável por garantir a obrigatoriedade de oferta da língua em escolas de todo Brasil, e a implementação da nova Base Nacional Comum Curricular (2018), que não prevê o espanhol como componente curricular, este Trabalho de Conclusão de Curso decorre da necessidade de refletir sobre a posição da Língua Espanhola em espaços educacionais brasileiros – neste caso, a prova do ENEM. Este estudo se insere na área da Linguística Aplicada e tem como finalidade analisar as questões da prova de espanhol do ENEM a fim de registrar possíveis regularidades do exame em relação à Língua Estrangeira. Para atingir este objetivo, buscamos explicitar alguns processos, como a alternância de inclusão e de exclusão do espanhol nos currículos da escola básica e a inserção da prova de Língua Estrangeira Moderna no Exame Nacional do Ensino Médio, a fim de contextualizar a pesquisa. À luz dos documentos oficiais da educação brasileira – Parâmetros Curriculares Nacionais (PCN, 1998), Parâmetros Curriculares Nacionais para o Ensino Médio (PCNEM, 2000), Orientações Complementares aos Parâmetros Curriculares Nacionais para o Ensino Médio (PCN+, 2002a), Orientações Curriculares para o Ensino Médio (OCEM, 2006), Base Nacional Comum Curricular (BNCC, 2018) – e da Matriz de Referência do ENEM (2009), este trabalho buscou fazer um paralelo entre as orientações curriculares de ensino de espanhol para o Ensino Médio e o ENEM, analisando um corpus com 45 questões. Esses itens correspondem às 5 questões de LEM em 9 aplicações da prova, do período de 2010 a 2018. Esta pesquisa caracteriza-se como uma pesquisa qualitativa-interpretativista (GODOY, 1995) com processos metodológicos de análise documental (LANKSHEAR e KNOBEL, 2008). Optamos por analisar três pontos referentes a cada item: o eixo temático do texto escolhido para compor a questão, o gênero discursivo desse mesmo texto e as habilidades requeridas do examinando para a resolução da questão. Os pressupostos teóricos que orientam essa categorização e análise são os presentes nos documentos oficiais, principalmente nas OCEM (2006) e na Matriz de Referência (2009), e em referências como Schlatter e Garcez (2009), Silva e Felicetti (2012) e Andrade (2014). A partir da análise realizada constatamos algumas regularidades em relação a eixos temáticos, a gêneros discursivos e a habilidades requeridas mais frequentes. Além disso, foi possível traçar paralelos entre as proposições dos documentos oficiais, as competências e habilidades da Matriz de Referência e as ocorrências do exame, ainda que alguns pontos mereçam atenção e tenham sido problematizados. Também constatamos uma baixa produção científica sobre o tema, tanto por parte das Instituições de Ensino Superior como por parte do Inep. Assim, entendemos que é extremamente fundamental que o ENEM e a sua relação com o ensino/aprendizagem sejam pautas mais recorrentes na produção científica brasileira. Além disso, acreditamos que este trabalho oferece subsídios para uma reflexão sobre as questões de espanhol no ENEM, e, consequentemente, sobre o espaço que o ensino de espanhol ocupa em âmbito nacional.Dada la reciente derogación de la Ley N ° 11.161/2005, la Ley del Español, que fue responsable por garantizar la provisión de idiomas en las escuelas de todo Brasil, y la implementación de la nueva Base de Currículo Nacional Común (2018), que no proporciona el español como componente curricular, esta tesis surgió de la necesidad de reflexionar sobre la posición que la lengua española ocupa en los espacios educativos brasileños, en este caso, en la prueba de ENEM. Este estudio está en el área de Lingüística Aplicada y tiene como objetivo analizar las preguntas de la prueba de español ENEM para registrar las posibles regularidades del examen con relación a la lengua extranjera. Para lograr este objetivo, buscamos explicar algunos procesos, como la inclusión y exclusión del español en el currículo de la escuela primaria y la inserción de la prueba de Lengua Extranjera Moderna en el ENEM, para contextualizar la investigación. A la luz de los documentos oficiales de la educación brasileña – Parâmetros Curriculares Nacionais (PCN, 1998), Parâmetros Curriculares Nacionais para o Ensino Médio (PCNEM, 2000), Orientações Complementares aos Parâmetros Curriculares Nacionais para o Ensino Médio (PCN+, 2002a), Orientações Curriculares para o Ensino Médio (OCEM, 2006), Base Nacional Comum Curricular (BNCC, 2018) – e de la Matriz de Referência do ENEM (2009), esta investigación buscó establecer un paralelismo entre las pautas curriculares de enseñanza de español para la escuela y el ENEM, analizando un corpus con 45 preguntas. Estos ítems corresponden a las 5 preguntas de LEM en 9 aplicaciones de la prueba, de 2010 a 2018. Esta investigación se caracteriza por ser una investigación cualitativa-interpretativa (GODOY, 1995) con procesos metodológicos de análisis de documentos (LANKSHEAR y KNOBEL, 2008). Elegimos analizar tres puntos relacionados con cada elemento: el eje temático del texto elegido para componer la pregunta, el género discursivo de ese mismo texto y las habilidades requeridas por el examen para resolver la pregunta. Los aportes teóricos que guían esta categorización y análisis son los presentes en los documentos oficiales, principalmente en las OCEM (2006) y en la Matriz de Referencia (2009), y en referencias como Schlatter y Garcez (2009), Silva y Felicetti (2012) y Andrade (2014). Del análisis encontramos algunas regularidades en relación con los ejes temáticos, los géneros discursivos y las habilidades requeridas con mayor frecuencia. Además, fue posible establecer paralelismos entre las proposiciones de los documentos oficiales, las competencias y habilidades de la Matriz de Referencia y las ocurrencias del examen, aunque algunos puntos merecen atención y han sido problematizados. También encontramos una baja producción científica sobre el tema, tanto de las instituciones de educación superior como de Inep. Por lo tanto, entendemos que es extremadamente fundamental que el ENEM y su relación con la enseñanza/ aprendizaje sean pautas más recurrentes en la producción científica brasileña. Además, creemos que este trabajo ofrece subsidios para una reflexión sobre los problemas del español en ENEM y, en consecuencia, sobre el espacio que ocupa la enseñanza del español en el ámbito nacional

Avaliação da atividade citotóxica e antitumoral de acetohidroxamatos sintéticos em modelos in vitro e in vivo

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2017.O tratamento do câncer ainda se apresenta como um grande desafio, principalmente devido à resistência das células tumorais aos quimioterápicos e à alta toxicidade dos tratamentos convencionais. Estes fatores têm impulsionado a pesquisa de novas estratégias terapêuticas na área da oncologia, focando principalmente em novas classes de medicamentos anticâncer. Alguns compostos que têm despertado interesse na área oncológica são os derivados de ácidos hidroxâmicos, uma vez que estes compostos têm apresentado efeito citotóxico e antitumoral, principalmente por meio de inibição de histona deacetilases. Neste trabalho foi investigado o efeito citotóxico in vitro de onze acetohidroxamatos, além do perfil farmacocinético e atividade antitumoral in vivo dos compostos mais promissores. Todos os compostos apresentaram atividade citotóxica frente às linhagens tumorais de melanoma (A375) e glioblastoma humano (U-87 MG) no ensaio de MTT, sendo que os compostos AKS 7, AKS 26 e AKS 61 destacaram-se pela alta potência e/ou pelas características físico-químicas promissoras, prosseguindo por esta razão para as próximas etapas. Destes, o composto AKS 61 foi o que apresentou capacidade antiproliferativa em concentrações mais baixas nos ensaios de Sulforrodamina B e de Clonogenicidade, além de apresentar menor citotoxicidade frente à linhagem não-tumoral de cardiomiócitos derivados de células-tronco pluripotentes induzidas (CMCiPS), tendo sido, portanto, selecionado para realizar alguns estudos mecanísticos in vitro. O AKS 61 bloqueou o ciclo celular de células da linhagem A375 de maneira bifásica (inicialmente em G2/M e posteriormente em G1), além de reduzir o potencial de membrana mitocondrial e induzir apoptose das células tratadas. Esse composto foi também eficaz em induzir autofagia após 24 horas de tratamento. A fim de avaliar o potencial antitumoral do AKS 61 in vivo, camundongos nude foram submetidos ao modelo de tumor xenográfico subcutâneo a partir da inoculação de células A375 e, em seguida, foram tratados com o composto AKS 61 pela via intravenosa (i.v.). O tratamento com AKS 61 (2 mg/kg, i.v.) não foi capaz de inibir o crescimento tumoral, provavelmente devido ao seu perfil farmacocinético desfavorável. Este composto apresentou tempo de meia vida plasmática inferior a quarenta minutos, acompanhada de uma alta taxa de eliminação total. Juntamente com a análise farmacocinética do AKS 61, foram também analisados os perfis dos compostos AKS 26 e AKS 7, sendo que este último apresentou o perfil mais favorável, inclusive apresentando biodisponibilidade pela via oral. Os resultados obtidos neste trabalho evidenciam o potencial desta série de compostos derivados do ácido hidroxâmico e guiarão a otimização dessas moléculas, com o objetivo de obter um composto eficaz in vivo que apresente características farmacocinéticas mais favoráveis para a continuidade do desenvolvimento não-clínico.Abstract : Cancer treatment is still challenging, mainly due to tumor resistance to chemotherapy and high toxicity of conventional therapy. These factors have driven the search of new therapy strategies and the discovery of better anticancer drugs. Some compounds that have aroused attention in oncology include the hydroxamic acid derivatives, once they have demonstrated cytotoxic and antitumor effect, mostly because of their histone deacetylases inhibition property. In the present study we have investigated the in vitro cytotoxic effect of eleven synthetic acetohydroxamates, as well as the in vivo pharmacokinetic profile and antitumor activity of most promising compounds. All compounds presented cytotoxic activity against A375 (human melanoma) and U-87 MG (human glioblastoma) cell lines in the MTT assay, and the compounds AKS 7, AKS 26 and AKS 61 stood out for their promising potency and/or physicochemical characteristics, therefore proceeding to the next steps. Of these, the compound AKS 61 was the one that presented the most favorable antiproliferative capacity in the Sulforhodamine B and Clonogenic assays, also presenting smaller cytotoxicity against the non-tumoral lineage CMCiPS (cardiomyocytes derived from human induced pluripotent stem cells), being therefore chosen to perform some mechanistic studies. AKS 61 was able to arrest the cell cycle of A375 cells biphasically (initially in G2/M and later in G1), in addition to inducing a decrease in the mitochondrial membrane potential and increasing apoptosis in treated cells. The compound was also capable of inducing autophagy after 24 hours of treatment. In order to assess the in vivo antitumor effect of AKS 61, nude mice were submitted to the xenographic tumor model (by A375 cells inoculation) and treated with the compound intravenously. AKS 61 treatment (2 mg/kg, i.v.) failed to inhibit tumor growth, probably because of its unfavorable pharmacokinetic profile. This compound presented a half-life time of less than 40 minutes, accompanied by a high clearance rate. Together with the pharmacokinetic analysis of AKS 61, the profiles of the compounds AKS 26 and AKS 7 were also analyzed, the latter having the most favorable profile and presenting oral bioavailability. These data show the potential anticancer effect of these hydroxamic acid derivatives and will guide the optimization of these molecules in order to obtain a more potent and effective in vivo compound associated with favorable pharmacokinetic characteristics to continue the nonclinical development

As crianças populares urbanas vivendo as transições, continuidades e rupturas dos projetos da Modernidade e da Pós-Modernidade

Este texto é parte de meu trabalho de doutorado, que tem como foco investigar os percursos pelos quais passa a vida das crianças de uma vila popular urbana de Porto Alegre, seu modo de ser e de estar no presente, e os intercursos/relações com a instituição de educação infantil criada para esta infância. Neste caso, as instituições educativas destinadas a atender essa infância são as creches comunitárias, instituições privadas que se estabelecem não como uma opção às escolas de educação infantil públicas, mas, sim, como uma alternativa à sua inexistência. Discutir quais elementos podem dar cor, sabor, perfume, ordenar ou desordenar a vida de pequenos seres humanos não é tarefa que se possa cumprir isolada de uma discussão mais ampla. Por esse motivo, o texto que segue apresenta brevemente as principais idéias dos projetos de Modernidade e de Pós-Modernidade, buscando fazer aproximações entre esses e a realidade do contexto e da vida das crianças populares e das instituições escolares destinadas a atendê-las

Evolution of the hepcidin gene in primates

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Hepcidin/LEAP-1 is an iron regulatory hormone originally identified as an antimicrobial peptide. As part of a systematic analysis of the evolution of host defense peptides in primates, we have sequenced the orthologous gene from 14 species of non-human primates.</p> <p>Results</p> <p>The sequence of the mature peptide is highly conserved amongst all the analyzed species, being identical to the human one in great apes and gibbons, with a single residue conservative variation in Old-World monkeys and with few substitutions in New-World monkeys.</p> <p>Conclusion</p> <p>Our analysis indicates that hepcidin's role as a regulatory hormone, which involves interaction with a conserved receptor (ferroportin), may result in conservation over most of its sequence, with the exception of the stretch between residues 15 and 18, which in New-World monkeys (as well as in other mammals) shows a significant variation, possibly indicating that this structural region is involved in other functions.</p

A avaliação de Língua Estrangeira no Enem: um diálogo entre as questões de espanhol e os documentos orientadores da educação brasileira

Este estudo se insere na área da Linguística Aplicada e objetiva analisar as questões da prova de espanhol do ENEM a fim de registrar possíveis regularidades do exame. Para isso, contextualizamos a pesquisa à luz dos processos de inclusão e exclusão do espanhol nos documentos oficiais e no currículo da educação brasileira, traçando um paralelo entre as orientações curriculares para o Ensino Médio e o ENEM, a partir de um corpus de 45 questões, aplicadas entre 2010 e 2018. Este estudo caracteriza-se como uma pesquisa qualitativa-interpretativista, com processos metodológicos de análise documental. A partir da análise, constatamos algumas regularidades em relação a eixos temáticos, a gêneros discursivos e a habilidades requeridas com maior frequência, traçamos paralelos entre as proposições dos documentos oficiais, as competências e habilidades da Matriz de Referência e as ocorrências do exame, e problematizamos alguns pontos que merecem atenção

Isolation and full-length genome characterization of Sarscov-2 from covid-19 cases in northern Italy

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