Análise de timol em cera de abelha por micro-extracção em fase sólida (SPME)

A aplicação contínua de acaricídas lipofílicos sintéticos no tratamento das abelhas conduz a uma acumulação que depende da frequência, lipofilicidade e quantidade de princípio activo utilizada. Este efeito é mais acentuado na cera de abelha que no mel, no entanto, e porque a persistência destes resíduos é elevada, provoca o aparecimento de resistências e a perda do seu efeito acaricida.[1] Esta razão levou à pesquisa de outros compostos alternativos não tóxicos e não persistentes, com efeito sobre o ácaro das abelhas, Varroa Jacobsoni. Entre estes compostos encontra-se o timol, um composto fenólico, volátil, presente no tomilho. Dos diversos componentes dos óleos essenciais este é sem dúvida o que demonstrou maior efeito acaricida, utilizando-se no tratamento das abelhas directamente ou como componente de diversas formulações.[2] Em Portugal, foi introduzido muito recentemente sob a forma comercial de APIGUARD: um gel, à base de timol, que controla termicamente a libertação do princípio activo. O controlo dos resíduos de timol na cera de abelha e no mel é assim um desafio actual quer do ponto de vista sanitário quer de qualidade alimentar. A micro-extracção em fase sólida (SPME) é uma técnica de preparação de amostras que se baseia na sorção de analítos no revestimento de uma fibra de sílica fundida e posterior desorção térmica no injector de um cromatógrafo em fase gasosa (GC). Para além de combinar num único processo etapas de extracção, purificação e concentração dos analitos, a técnica de SPME apresenta uma série de vantagens relativamente às técnicas de extracção convencionais, como a extracção líquido-líquido e extracção em fase sólida, nomeadamente a sua relativa simplicidade e rapidez, reduzido custo e não utilização de solventes para a extracção de analitos, para além de permitir a extracção por imersão directa na amostra gasosa ou líquida e extracção por amostragem do espaço-de-cabeça da amostra líquida ou sólida.[3] Ao contrário das técnicas tradicionais, que permitem uma extracção quantitativa dos analitos, a técnica de SPME baseia-se num equilíbrio de partição do analito. Esta particularidade torna a técnica de SPME bastante sensível a parâmetros experimentais que possam afectar os coeficientes de partição dos analitos e, consequentemente, a sensibilidade e reprodutibilidade dos resultados.[4] O objectivo deste trabalho é o desenvolvimento de uma metodologia para a análise de timol em ceras contaminadas, utilizando como padrão interno a benzofenona. Em primeiro lugar, procedeu-se à optimização da técnica através da determinação da quantidade de cera, temperatura de análise e período de contacto da fibra com o espaço-de-cabeça da amostra mais adequados para o caso em estudo. Numa segunda fase, procedeu-se à análise de diversas lâminas de cera contaminadas propositadamente com timol e sujeitas a diferentes condições de armazenamento: em frio, ao ar e em estufa. Finalmente, procedeu-se à construção da curva de calibração e quantificação do timol presente nas diversas amostras de cera analisadas. Considerando-se os resultados, para os níveis de contaminação avaliados, as condições analíticas mais adequadas ocorrem com a utilização de 1 g de cera, mantendo-se a fibra em contacto com o espaço-de-cabeça durante 40 minutos a uma temperatura de 60 ºC. Nestas condições experimentais foi possível obter uma boa correlação linear (r2=0,990) no intervalo de concentrações [3,5-14 mg/g]. A quantidade de timol encontrada nas amostras é significativamente inferior à colocada durante o processo de fabrico das lâminas, pelo que o processo de conservação não é o mais adequado, sendo evidente uma menor quantidade de timol quando a lâmina de cera é colocada na estufa

Disease burden and risk profile in referred patients with moderate chronic kidney disease: composition of the German Chronic Kidney Disease (GCKD) cohort

Background A main challenge for targeting chronic kidney disease (CKD) is the heterogeneity of its causes, co-morbidities and outcomes. Patients under nephrological care represent an important reference population, but knowledge about their characteristics is limited. Methods We enrolled 5217 carefully phenotyped patients with moderate CKD [estimated glomerular filtration rate (eGFR) 30–60 mL/min per 1.73 m2 or overt proteinuria at higher eGFR] under routine care of nephrologists into the German Chronic Kidney Disease (GCKD) study, thereby establishing the currently worldwide largest CKD cohort. Results The cohort has 60% men, a mean age (±SD) of 60 ± 12 years, a mean eGFR of 47 ± 17 mL/min per 1.73 m2 and a median (IQR) urinary albumin/creatinine ratio of 51 (9–392) mg/g. Assessment of causes of CKD revealed a high degree of uncertainty, with the leading cause unknown in 20% and frequent suspicion of multifactorial pathogenesis. Thirty-five per cent of patients had diabetes, but only 15% were considered to have diabetic nephropathy. Cardiovascular disease prevalence was high (32%, excluding hypertension); prevalent risk factors included smoking (59% current or former smokers) and obesity (43% with BMI >30). Despite widespread use of anti-hypertensive medication, only 52% of the cohort had an office blood pressure <140/90 mmHg. Family histories for cardiovascular events (39%) and renal disease (28%) suggest familial aggregation. Conclusions Patients with moderate CKD under specialist care have a high disease burden. Improved diagnostic accuracy, rigorous management of risk factors and unravelling of the genetic predisposition may represent strategies for improving prognosis