The broad range di- and trinucleotide exchanger SLC35B1 displays asymmetrical affinities for ATP transport across the ER membrane

In eukaryotic cells, uptake of cytosolic ATP into the endoplasmic reticulum (ER) lumen is critical for the proper functioning of chaperone proteins. The human transport protein SLC35B1 was recently postulated to mediate ATP/ADP exchange in the ER; however, the underlying molecular mechanisms mediating ATP uptake are not completely understood. Here, we extensively characterized the transport kinetics of human SLC35B1 expressed in yeast that was purified and reconstituted into liposomes. Using [α32P]ATP uptake assays, we tested the nucleotide concentration dependence of ATP/ADP exchange activity on both sides of the membrane. We found that the apparent affinities of SLC35B1 for ATP/ADP on the internal face were approximately 13 times higher than those on the external side. Because SLC35B1-containing liposomes were preferentially inside-out oriented, these results suggest a low-affinity external site and a high-affinity internal site in the ER. Three different experimental approaches indicated that ATP/ADP exchange by SLC35B1 was not strict, and that other di- and tri-nucleotides could act as suitable counter-substrates for ATP, although mononucleotides and nucleotide sugars were not transported. Finally, bioinformatic analysis and site-directed mutagenesis identified that conserved residues K117 and K120 from transmembrane helix 4 and K277 from transmembrane helix 9 play critical roles in transport. The fact that SLC35B1 can promote ATP transport in exchange for ADP or UDP suggest a more direct coupling between ATP import requirements and the need for eliminating ADP and UDP, which are generated as side products of reactions taking place in the ER-lumen.Fil: Schwarzbaum, Pablo Julio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; ArgentinaFil: Schachter, Julieta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; ArgentinaFil: Bredeston, Luis María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; Argentin

ATPe dynamics in protozoan parasites. Adapt or Perish

In most animals, transient increases of extracellular ATP (ATPe) are used for physiological signaling or as a danger signal in pathological conditions. ATPe dynamics are controlled by ATP release from viable cells and cell lysis, ATPe degradation and interconversion by ecto-nucleotidases, and interaction of ATPe and byproducts with cell surface purinergic receptors and purine salvage mechanisms. Infection by protozoan parasites may alter at least one of the mechanisms controlling ATPe concentration. Protozoan parasites display their own set of proteins directly altering ATPe dynamics, or control the activity of host proteins. Parasite dependent activation of ATPe conduits of the host may promote infection and systemic responses that are beneficial or detrimental to the parasite. For instance, activation of organic solute permeability at the host membrane can support the elevated metabolism of the parasite. On the other hand ecto-nucleotidases of protozoan parasites, by promoting ATPe degradation and purine/pyrimidine salvage, may be involved in parasite growth, infectivity, and virulence. In this review, we will describe the complex dynamics of ATPe regulation in the context of protozoan parasite–host interactions. Particular focus will be given to features of parasite membrane proteins strongly controlling ATPe dynamics. This includes evolutionary, genetic and cellular mechanisms, as well as structural-functional relationships.Fil: Lauri, Natalia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires; ArgentinaFil: Bazzi, Zaher. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; ArgentinaFil: Alvarez, Cora Lilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; ArgentinaFil: Leal Denis, Maria Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Química Analítica y Fisicoquímica; ArgentinaFil: Schachter, Julieta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires; ArgentinaFil: Herlax, Vanesa Silvana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata "Prof. Dr. Rodolfo R. Brenner". Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata "Prof. Dr. Rodolfo R. Brenner"; ArgentinaFil: Ostuni, Mariano. Inserm; Francia. Universite Paris D. Diderot - Paris 7. French National Institute Of Blood Transfusion.; FranciaFil: Schwarzbaum, Pablo Julio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires; Argentin

Whipworm infection promotes bacterial invasion, intestinal microbiota imbalance, and cellular immunomodulation

Infections with Trichuris trichiura are among the most common causes of intestinal parasitism in children worldwide, and the diagnosis is based on microscopic egg identification in the chronic phase of the infection. During parasitism, the adult worm of the trichurid nematode maintains its anterior region inserted in the intestinal mucosa, which causes serious damage and which may open access for gut microorganisms through the intestinal tissue. The immune-regulatory processes taking place during the evolution of the chronic infection are still not completely understood. By use of the Swiss Webster outbred mouse model, mice were infected with 200 eggs, and tolerance to the establishment of a chronic Trichuris muris infection was induced by the administration of a short pulse of dexamethasone during nematode early larval development. The infected mice presented weight loss, anemia, an imbalance of the microbiota, and intense immunological cell infiltration in the large intestine. It was found that mice have a mixed Th1/Th2/Th17 response, with differences being found among the different anatomical locations. After 45 days of infection, the parasitism induced changes in the microbiota composition and bacterial invasion of the large intestine epithelium. In addition, we describe that the excretory-secretory products from the nematode have anti-inflammatory effects on mouse macrophages cultured in vitro, suggesting that T. muris may modulate the immune response at the site of insertion of the worm inside mouse tissue. The data presented in this study suggest that the host immune state at 45 days postinfection with T. muris during the chronic phase of infection is the result of factors derived from the worm as well as alterations to the microbiota and bacterial invasion. Taken together, these results provide new information about the parasite-host-microbiota relationship and open new treatment possibilities.Fil: Schachter, Julieta. Universidade Federal do Rio de Janeiro; Brasil. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; ArgentinaFil: De Oliveira, Dayane Alvarinho. Universidade do Estado de Rio do Janeiro; BrasilFil: Da Silva, Camila Marques. Universidade Federal do Rio de Janeiro; BrasilFil: De Barros Alencar, Alba Cristina Miranda. Hospital Universitario Antonio Pedro; BrasilFil: Duarte, Michelle. Universidade Federal do Rio de Janeiro; BrasilFil: Müller Pereira da Silva, Matheus. Universidade Federal do Rio de Janeiro; BrasilFil: De Paula Rosa Ignácio, Ana Claudia. Universidade do Estado de Rio do Janeiro; BrasilFil: Lopes Torres, Eduardo José. Universidade do Estado de Rio do Janeiro; Brasi

Extracellular ATP hydrolysis in Caco-2 human intestinal cell line

Extracellular nucleotides and nucleosides activate signaling pathways that play major roles in the physiology and pathophysiology of the gastrointestinal tract. Ectonucleotidases hydrolyze extracellular nucleotides and thus regulate ligand exposure to purinergic receptors. In this study, we investigated the expression, localization and activities of ectonucleotidases using Caco-2 cells, a model of human intestinal epithelial cells. In addition, by studying ATP release and the rates of extracellular ATP (eATP) hydrolysis, we analyzed the contribution of these processes to the regulation of eATP in these cells. Results show that Caco-2 cells regulate the metabolism of eATP and by-products by ecto-nucleoside triphosphate diphosphohydrolase-1 and -2, a neutral ecto-phosphatase and ecto-5′-nucleotidase. All these ectoenzymes were kinetically characterized using intact cells, and their presence confirmed by denatured and native gels, western blot and cytoimmunofluorescence techniques. In addition, regulation of eATP was studied by monitoring the dynamic balance between intracellular ATP release and ectoATPase activity. Following mechanical and hypotonic stimuli, Caco-2 cells triggered a strong but transient release of intracellular ATP, with almost no energy cost, leading to a steep increase of eATP concentration, which was later reduced by ectoATPase activity. A data-driven algorithm allowed quantifying and predicting the rates of ATP release and ATP consumption contributing to the dynamic accumulation of ATP at the cell surface.Fil: Schachter, Julieta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; ArgentinaFil: Alvarez, Cora Lilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; ArgentinaFil: Bazzi, Zaher. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; ArgentinaFil: Faillace, Maria Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; ArgentinaFil: Corradi, Gerardo Raul. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; ArgentinaFil: Hattab, C.. Universite de Paris. Institut National de la Transfusion Sanguine.; FranciaFil: Rinaldi, Debora Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; ArgentinaFil: Gonzalez-Lebrero, Rodolfo Martin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; ArgentinaFil: Pucci Molineris, Melisa Eliana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata "Prof. Dr. Rodolfo R. Brenner". Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata "Prof. Dr. Rodolfo R. Brenner"; ArgentinaFil: Sévigny, J.. Laval University; CanadáFil: Ostuni, M. A.. Universite de Paris; Francia. Universite Paris D. Diderot - Paris 7. French National Institute Of Blood Transfusion.; FranciaFil: Schwarzbaum, Pablo Julio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; Argentin

ATPe Dynamics in Protozoan Parasites: Adapt or Perish

In most animals, transient increases of extracellular ATP (ATPe) are used for physiological signaling or as a danger signal in pathological conditions. ATPe dynamics are controlled by ATP release from viable cells and cell lysis, ATPe degradation and interconversion by ecto-nucleotidases, and interaction of ATPe and byproducts with cell surface purinergic receptors and purine salvage mechanisms. Infection by protozoan parasites may alter at least one of the mechanisms controlling ATPe concentration. Protozoan parasites display their own set of proteins directly altering ATPe dynamics, or control the activity of host proteins. Parasite dependent activation of ATPe conduits of the host may promote infection and systemic responses that are beneficial or detrimental to the parasite. For instance, activation of organic solute permeability at the host membrane can support the elevated metabolism of the parasite. On the other hand ecto-nucleotidases of protozoan parasites, by promoting ATPe degradation and purine/pyrimidine salvage, may be involved in parasite growth, infectivity, and virulence. In this review, we will describe the complex dynamics of ATPe regulation in the context of protozoan parasite–host interactions. Particular focus will be given to features of parasite membrane proteins strongly controlling ATPe dynamics. This includes evolutionary, genetic and cellular mechanisms, as well as structural-functional relationships.Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plat

Inhibitors of the 5-lipoxygenase arachidonic acid pathway induce ATP release and ATP-dependent organic cation transport in macrophages

AbstractWe have previously described that arachidonic acid (AA)-5-lipoxygenase (5-LO) metabolism inhibitors such as NDGA and MK886, inhibit cell death by apoptosis, but not by necrosis, induced by extracellular ATP (ATPe) binding to P2X7 receptors in macrophages. ATPe binding to P2X7 also induces large cationic and anionic organic molecules uptake in these cells, a process that involves at least two distinct transport mechanisms: one for cations and another for anions. Here we show that inhibitors of the AA-5-LO pathway do not inhibit P2X7 receptors, as judged by the maintenance of the ATPe-induced uptake of fluorescent anionic dyes. In addition, we describe two new transport phenomena induced by these inhibitors in macrophages: a cation-selective uptake of fluorescent dyes and the release of ATP. The cation uptake requires secreted ATPe, but, differently from the P2X7/ATPe-induced phenomena, it is also present in macrophages derived from mice deficient in the P2X7 gene. Inhibitors of phospholipase A2 and of the AA-cyclooxygenase pathway did not induce the cation uptake. The uptake of non-organic cations was investigated by measuring the free intracellular Ca2+ concentration ([Ca2+]i) by Fura-2 fluorescence. NDGA, but not MK886, induced an increase in [Ca2+]i. Chelating Ca2+ ions in the extracellular medium suppressed the intracellular Ca2+ signal without interfering in the uptake of cationic dyes. We conclude that inhibitors of the AA-5-LO pathway do not block P2X7 receptors, trigger the release of ATP, and induce an ATP-dependent uptake of organic cations by a Ca2+- and P2X7-independent transport mechanism in macrophages

Constitutive activity of N-β-alanyl-catecholamine ligase in insect brain

N-Beta-Alanyldopamine (NBAD) is the primary catechol tanning agent precursor in typical brown or yellow insect cuticle. The insect integument enzyme responsible for the synthesis of NBAD was reported to be expressed solely in the epidermis, and only at the time of cuticle sclerotization. However, in this study we demonstrate directly that the enzyme also is expressed in a constitutive manner in the neural system of insects. The requirements and kinetic parameters of the brain-associated enzyme appear similar to those of the epidermis-associated enzyme in Ceratitis capitata. The brain-associated enzyme also was able to catalyze the in vitro synthesis of N-beta-alanylnorepinephrine (NBANE) and beta-alanyl derivatives of other biogenic amines. A melanic mutant of C. capitata, niger, was unable to conjugate beta-alanine with dopamine or other amines in either the epidermis or the brain. This result strongly supports the idea that these enzymes actually are expressed from a single gene and that differences in regulation must exist that account for the constitutive expression in the neural system. Similar results were obtained in Drosophila melanogaster and other insects. From these data, a number of questions arise about the role of beta-alanyl derivatives of biogenic amines and other compounds in insect brain and similarly, in the mammalian CNS.Fil: Pérez, Martín Mariano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Schachter, Julieta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Quesada Allue, Luis Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentin

The role of N-β-alanyldopamine synthase in the innate immune response of two insects

Insects trigger a multifaceted innate immune response to fight microbial infections. We show that in the yellow mealworm, Tenebrio molitor, septic injuries induce the synthesis of N-b-alanyldopamine (NBAD), which is known as the main sclerotization precursor of insect brown cuticles. We demonstrate that NBAD synthase is induced in the epidermis of the mealworm and of the Medfly, Ceratitis capitata, by infection with Escherichia coli. Our results indicate that synthesis of NBAD seems to be a novel component of the overall innate immune response in insects.Fil: Schachter, Julieta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Pérez, Martín Mariano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Quesada Allue, Luis Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentin

CONSTRUÇÃO MULTIDISCIPLINAR E COLETIVA DE CONHECIMENTO CIENTÍFICO NA ESCOLA

O projeto visa colaborar com a construção da ponte teórico-prática entre a escola e a universidade no contexto do ensino de ciências, utilizando-se do método científico como ferramenta que auxilia na compreensão do mundo e na transformação da sociedade. As atividades são desenvolvidas em conjunto com professores do C.E. Santo Antônio (Xerém, Duque de Caxias), e os alunos do oitavo ano. Utilizamos o tema-problema “o que é saúde?” para desenvolver a construção do pensamento científico e reflexivo. Os objetivos específicos são, a partir do tema-problema proposto: 1) entender e analisar os conhecimentos prévios dos alunos em relação ao tema; 2) auxilar o estabelecimento de relações entre diferentes áreas que possibilitem abordar o tema de forma holística; 3) praticar a construção do conhecimento de forma participativa e democrática; 4) praticar a socialização do conhecimento produzido com toda a comunidade do C.E. Santo Antônio e a UFRJ Polo Xerém. O projeto é dividido em sete etapas ao longo do ano. Etapa 0: discussão e apresentação do projeto com os professores da escola. Após apresentação do projeto aos professores participantes realizamos atividades de teatro de improviso e grupos de discussão sobre os conceitos de ciência e saúde. No geral, os discentes da escola mostraram não entender ciência como uma atividade geradora de conhecimento. Em relação ao tema saúde, os professores mostraram entender o tema de uma maneira abrangente, incluindo outras esferas além da biológica, como social e psicológica. Etapa 1: Observação da realidade. Utilizamos fotografias como disparador de discussão para compreender a visão dos estudantes do tema saúde. As questões levantadas por eles foram: racismo, desigualdade social e degradação do meio ambiente. Questões biológicas relacionadas a saúde individual foram pouco abordadas. Pedimos aos alunos que tirassem fotos de elementos que para eles estariam relacionados com saúde, no cotidiano. Das fotos trazidas por eles, 49% estavam relacionadas com aspectos positivos de saúde e 56% com aspectos negativos. O tema destaque foi acumulo de lixo e falta de água. Etapa 2: Contextualização dos problemas. Realizamos uma dinâmica de teatro de improviso, utilizando três cenas contendo situações-problemas relacionadas ao problema do lixo. Observamos que, uma vez mais, os estudantes apresentam maior interesse pelas questões sociais do que biológicas, levantando o debate sobre situações de discriminação racial e conflitos de classe. Atualmente, nos encontramos na etapa 3, de teorização das questões levantadas. Foi organizada uma palestra sobre assuntos relacionados aos direitos das minorias, racismo, preconceito e discriminação

Cuticle sclerotization in pharate adult and imago of Drosophila melanogaster, Ceratitis capitata, and Haematobia irritans

N- β -alanyldopamine synthase is the enzyme conjugating dopamine with β -alanine to generate N- β -alanyldopamine (NBAD) in the integument of insects (Pérez et al. , 2002). NBAD is the main cross-linking precursor of the brown insect cuticles (Hopki ns and Kramer, 1992). NBAD is synthesized in the epidermis and ap ically exported to the cuticle to give rise to the corresponding quinone, which will crosslink proteins and eventu ally chitin (Hopkins and Kramer, 1992).Fil: Pérez, Martín Mariano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Rabossi, Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Schachter, Julieta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Pujol Lereis, Luciana Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Filiberti, Adrian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; ArgentinaFil: Argaraña, Carlos Enrique. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Quesada Allue, Luis Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentin