Propriedades funcionais de hemoglobinas de serpentes com diferentes graus de adaptação morfologica ao ambiente aquatico

Orientador: Aldo Focesi JuniorDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: Algumas propriedades estruturais e funcionais em duas espécies de serpentes de hábitos semo-aquáticos, H. modestus e L. miliaris que apresentam diferentes graus de adaptação a esse ambiente foram examinados. Os hemolisados totais de ambos os ofícios apresentaram três componentes tanto por eletroforese com por cromatografia. O estudo das propriedades funcionais de suas hemoglobinas revelou diferenças fundamentais: a afinidade pelo oxigênio foi maior na H. modestus enquanto que o efeito Bohr da L. miliaris exibiu valores mais elevados entre pH 7,0 e 8,0. O coeficiente de Hill, n. que reflete a interação heme-heme não se modificou em grande proporção, em função do pH em ambas as espécies e seus valores foram relativamente pequenos quando comparados com os de outras serpentes (SULLIVAN, 1974). Os fosfatos orgânicos interagiram com as hemoglobinas de ambas as serpentes diminuindo sua afinidade pelo oxigênio, aumentando o efeito Bohr e alteranto a interação heme-heme. A concentração saturante da ATP/heme foi aproximadamente 2,2 (mol/mol) em ambas as espécies embora o efeito do ATP na concentração maior que a saturante sobre a afinidade pelo oxigênio fosse mais acentuado em L. miliaris. Os dois ofídios recorreram a anaerobiose quando estimulados, e nessas condições, o nível de lactato no sangue circulante foi maior em L. miliaris. Finalmente foram discutidos os diferentes graus de adaptação funcional das hemoglobinas correlacionados ao habitat e atividade das espécies em estudoAbstract: Some structural and funcitional properties of two kind of water snakes H. modestus and L. miliaris, which show different degree of adaptation to the environment were analysed. The hemolysate of both kind of snake showed three components when analysed by either electrophoresis or chromatography. Important points came out from the study functional properties of their hemoglobin: thus, the oxygen affinity of H.modestus, the aquatic specie presented higher values than that of L. miliaris, although concerning the Bohr effect this specie showed low value close to zero between pH 7,0 and 8,0. The Hill coefitient did not show considerable variations with the pH in the snakes and their values were small compared with other species of snakes. Organic phosphates interacted with hemoglobin of both kind of snakes decreasing their oxygen affinity, increasing the Bohr effect and changing the Hill coefficient values. The ATP/ species of snake thought the effect of excess ATP on the oxygen affinity was more pronounced in L. miliaris. Upon stumulation both snakes increased their anaerobic metabolism according to the high blood lactate level found which was more pronounced in L. miliaris. Finally the different degree of functional adaptation of hemoglobin related to the habitat and the activity of both kind of snakes were discussed.MestradoMestre em Ciências Biológica

Estrutura e função em hemoglobinas de serpentes H. modestus e L. miliaris

Tese (livre-docencia) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: As serpentes aquáticas Helicops modestus e Liophis miliaris apresentaram nos hemolisados totais 3 e 5 componentes respectivamente que pareceram ser formas diferentes da mesma hemoglobina. As curvas de equilíbrio com oxigênio da hemoglobina "stripped" de ambas as serpentes mostraram alta afinidade pelo oxigênio, de cerca de 1,0 mm Hg em pH 7,0, pequeno efeito Bohr alcalino, cerca de -0,7 em H. modestus e -0,30 em L. miliaris bem como baixa cooperatividade (nH cerca de 1,0) e pronunciado efeito de fosfatos orgânicos sobre ambos, afinidade pelo oxigênio e efeito Bohr. Assim, os valores de P50 encontrados em presença de efetor alostérico como ATP foram 17,8 mm Hg e 8,93 mm Hg, os valores do efeito Bohr foram cerca de-0,90 e -0,55 em Hb de L limiaris e H. modestus, respectivamente. Os valores dos coeficientes de Hill em pHs menores que 7,5 foram cerca de 2,0, enquanto que em pHs maiores foram de cerca de 1,0 mostrando ausência de cooperatividade entre as sub-unidades nestas condições...Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digitalAbstract: The complete abstract is avaiable with the full eletronic digital theses or dissertationsLivre DocênciaBioquímicaLivre-Docente em Ciencias Biologica

Polycythemia and Hb Coimbra [beta 99 (G1) Asp -> Glu] in Brazil

We report the clinical and laboratory findings concerning three unrelated Brazilian patients investigated for polycythemia, whose definitive diagnosis could only be established after the presence of Hb Coimbra (b99 Asp ® Glu) was demonstrated. This illustrates the importance of properly investigating hereditary hemoglobinopathies in cases of erythrocytosis because in some populations variants with high oxygen affinity may be more frequent than expected but go undetected when conventional electrophoresis is used as the sole detection procedure