Etiolation and regeneration in the in vitro multiplication of hybrid PE x SC-52 pineapple

Segmentos nodais estiolados são utilizados para a micropropagação e conservação da identidade genética em várias culturas. O objetivo deste trabalho foi avaliar a multiplicação in vitro de segmentos estiolados para produção de mudas do abacaxi híbrido PE x SC-52. Talos de plântulas produzidos in vitro receberam inóculo em tubos de ensaio contendo o meio de cultura MS e mantidos no escuro por 60 dias, para estiolamento. Foram utilizados três tratamentos, sem reguladores de crescimento, ANA a 1,86 mg/L e AIA a 1,75 mg/L em cinco repetições com dez explantes por repetição. Não houve diferença no número de brotos estiolados por explante entre os tratamentos avaliados. No entanto, aos 35 dias de cultivo, os tratamentos com ANA e AIA apresentavam maior número de nós por broto, sendo o ANA superior aos demais após 60 dias. Brotos estiolados in vitro por 60 dias foram colocados horizontalmente em placas de Petri contendo o meio MS e incubados na presença de luz. Foram usados quatro tratamentos para a regeneração das plântulas, sem reguladores de crescimento; BAP a 2 mg/L; ANA a 1,86 mg/L + BAP a 2 mg/L e CIN a 5 mg/L, em quatro repetições, com sete brotos estiolados, por repetição. O BAP promoveu maior número de plântulas regeneradas por broto e por nó, com uma média de 10,4 plântulas por broto estiolado, aos 30 dias.Etiolated nodal segments are used for micropropagation and conservation of the genetic identity of several crops. The present study evaluated this method for the multiplication of the pineapple hybrid PE x SC-52. Plantlet stems produced in vitro were inoculated in test tubes containing MS nutrient medium and maintained in darkness for 60 days for etiolation. Three treatments were used with growth-regulator free MS medium; NAA at 1.86 mg/L, and IAA at 1.75 mg/L, with five repetitions and ten explants per repetition. There was no difference among the treatments in the number of etiolated shoots, per explant. However, NAA and IAA, after 35 days, produced a greater number of nodes per shoot, and NAA was the most efficient after 60 days. Etiolated shoots were placed horizontally in Petri dishes containing MS medium and incubated in the presence of light. Four treatments were used for the regeneration of plantlet growth-regulator free MS medium; BAP at 2 mg/L; NAA at 1.86 mg/L + BAP at 2 mg/L, and KIN at 5 mg/L with four repetitions and seven etiolated shoots per repetition. BAP promoted the largest number of regenerated plantlets per shoot and per node, with an average of 10.4 plantlets per shoot after 30 days

Micropropagation of pineapple hybrid PExSC-52 and cultivar Smooth Cayenne

A produção de mudas de abacaxizeiro de qualidade, em curto período, exige a otimização de protocolos de multiplicação in vitro. O objetivo deste trabalho foi testar cinco combinações de fitorreguladores, baseadas em resultados de pesquisa publicados com micropropagação de abacaxizeiro, na multiplicação in vitro do híbrido PExSC-52 e da cultivar Smooth Cayenne. Gemas axilares foram cultivadas em meio MS contendo benzilaminopurina (BAP) 2 mg/L; BAP 2 mg/L + ácido naftaleno acético (ANA) 2 mg/L; cinetina (CIN) 2 mg/L; CIN 2 mg/L + ANA 2 mg/L e CIN 5 mg/L + ácido indolacético (AIA) 5 mg/L. No híbrido, BAP 2 mg/L proporcionou maior proliferação de brotos por explante por subcultura e taxa de multiplicação crescente até a quarta subcultura. BAP 2 mg/L + ANA 2 mg/L multiplicou melhor a cv. Smooth Cayenne. Quando se utilizou CIN praticamente não ocorreu proliferação de brotos. Brotações do híbrido provenientes da quarta subcultura em presença de BAP 2 mg/L e BAP 2 mg/L + ANA 2 mg/L foram enraizados em meio MS contendo: ANA 1 mg/L; ANA 1 mg/L + CIN 2 mg/L; ANA 0,5 mg/L + CIN 2 mg/L; CIN 2 mg/L e sem fitorregulador. Brotos multiplicados em BAP enraizaram melhor que aqueles multiplicados em BAP + ANA.Five hormonal combinations were evaluated on the in vitro multiplication of pineapple hybrid PExSC-52 and cultivar Smooth Cayenne. After sterilization, axillary buds were inoculated in medium MS with benzilaminopurine (BAP) 2 mg/L, BAP 2 mg/L + naphthaleneacetic acid (NAA) 2 mg/L, kinetin (KIN) 2 mg/L, KIN 2 mg/L + NAA 2 mg/L and KIN 5 mg/L + indolebutyric acid (IAA) 5 mg/L. The hybrid BAP 2 mg/L provided the greatest proliferation of shoots per explant per subculture and increasing multiplication rate up to the fourth subculture. BAP 2 mg/L + NAA 2 mg/L multiplied best the 'Smooth Cayenne'. Shoot proliferation practically did not occur up to the fourth subculture when KIN was used as cytokinin. The pineapple hybrid shoots from the fourth subculture in medium with BAP 2 mg/L and BAP 2 mg/L + NAA 2 mg/L were put to root in MS medium with NAA 1 mg/L, NAA 1 mg/L + KIN 2 mg/L, NAA 0,5 mg/L + KIN 2 mg/L, KIN 2 mg/L and growth-regulator-free medium. Shoots which multiplied in BAP had better rooting than those multiplied in NAA + BAP

Micropropagation of pineapple hybrid PExSC-52 and cultivar Smooth Cayenne

A produção de mudas de abacaxizeiro de qualidade, em curto período, exige a otimização de protocolos de multiplicação in vitro. O objetivo deste trabalho foi testar cinco combinações de fitorreguladores, baseadas em resultados de pesquisa publicados com micropropagação de abacaxizeiro, na multiplicação in vitro do híbrido PExSC-52 e da cultivar Smooth Cayenne. Gemas axilares foram cultivadas em meio MS contendo benzilaminopurina (BAP) 2 mg/L; BAP 2 mg/L + ácido naftaleno acético (ANA) 2 mg/L; cinetina (CIN) 2 mg/L; CIN 2 mg/L + ANA 2 mg/L e CIN 5 mg/L + ácido indolacético (AIA) 5 mg/L. No híbrido, BAP 2 mg/L proporcionou maior proliferação de brotos por explante por subcultura e taxa de multiplicação crescente até a quarta subcultura. BAP 2 mg/L + ANA 2 mg/L multiplicou melhor a cv. Smooth Cayenne. Quando se utilizou CIN praticamente não ocorreu proliferação de brotos. Brotações do híbrido provenientes da quarta subcultura em presença de BAP 2 mg/L e BAP 2 mg/L + ANA 2 mg/L foram enraizados em meio MS contendo: ANA 1 mg/L; ANA 1 mg/L + CIN 2 mg/L; ANA 0,5 mg/L + CIN 2 mg/L; CIN 2 mg/L e sem fitorregulador. Brotos multiplicados em BAP enraizaram melhor que aqueles multiplicados em BAP + ANA.Five hormonal combinations were evaluated on the in vitro multiplication of pineapple hybrid PExSC-52 and cultivar Smooth Cayenne. After sterilization, axillary buds were inoculated in medium MS with benzilaminopurine (BAP) 2 mg/L, BAP 2 mg/L + naphthaleneacetic acid (NAA) 2 mg/L, kinetin (KIN) 2 mg/L, KIN 2 mg/L + NAA 2 mg/L and KIN 5 mg/L + indolebutyric acid (IAA) 5 mg/L. The hybrid BAP 2 mg/L provided the greatest proliferation of shoots per explant per subculture and increasing multiplication rate up to the fourth subculture. BAP 2 mg/L + NAA 2 mg/L multiplied best the ‘Smooth Cayenne’. Shoot proliferation practically did not occur up to the fourth subculture when KIN was used as cytokinin. The pineapple hybrid shoots from the fourth subculture in medium with BAP 2 mg/L and BAP 2 mg/L + NAA 2 mg/L were put to root in MS medium with NAA 1 mg/L, NAA 1 mg/L + KIN 2 mg/L, NAA 0,5 mg/L + KIN 2 mg/L, KIN 2 mg/L and growth-regulator-free medium. Shoots which multiplied in BAP had better rooting than those multiplied in NAA + BAP

Leaf anatomy of micropropagated pineapple plants

O objetivo deste trabalho foi indicar caracteres anatômicos em folhas de plantas micropropagadas de abacaxizeiro, visando ao aperfeiçoamento do protocolo de aclimatação. Utilizaram-se plântulas micropropagadas in vitro e aclimatadas por seis e dez meses, apresentando, em média, 3,1, 50,2 e 65 g, respectivamente. A densidade estomática foi determinada na face abaxial da epiderme, nas regiões basal, mediana e apical da folha, usando o delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial de 2x3 (dois ambientes de cultivo e três regiões da folha), em seis repetições. A espessura da hipoderme, parênquimas aqüífero e clorofilado foi determinada na região mediana da folha, usando-se o delineamento inteiramente casualizado com três tratamentos em quatro repetições. A estrutura básica da folha do abacaxizeiro não se modificou, entretanto, ocorreram diferenças na freqüência estomática, no espessamento da cutícula e paredes da epiderme, formato e sinuosidade das paredes das células do tecido aqüífero e presença de células papilosas nos diferentes ambientes de cultivo, indicando plasticidade fenotípica.The objective of this work was to study leaf anatomy of pineapple plants in order to improve acclimatization protocols. In vitro plantlets weighting an average of 3.1 g and greenhouse plantlets derived from in vitro stock material, after six and ten months of culture, weighting an average of 50.2 and 65 g, respectively, were used. Stomatal density was determined on the abaxial epidermis, at the basal, median, and apical portions of the leaf, using a completely randomized design under 2x3 factorial (two culture environments and three leaf regions) with six replicates. Thickness of the hypodermis, aquiferous and photosynthetic parenchyma were determined at the median portion of the leaf using a totally randomized design with three treatments and four replicates. The basic structure of the pineapple leaf under in vitro conditions did not change. However, stomatal frequency, cuticular and epidermal wall thickening, shape and sinuosity of the cell walls of aquiferous parenchyma and the presence of papillary cells were verified as a result of environmental conditions during culture, indicating phenotypic plasticity

Anatomia foliar de plantas micropropagadas de abacaxi

The objective of this work was to study leaf anatomy of pineapple plants in order to improve acclimatization protocols. In vitro plantlets weighting an average of 3.1 g and greenhouse plantlets derived from in vitro stock material, after six and ten months of culture, weighting an average of 50.2 and 65 g, respectively, were used. Stomatal density was determined on the abaxial epidermis, at the basal, median, and apical portions of the leaf, using a completely randomized design under 2x3 factorial (two culture environments and three leaf regions) with six replicates. Thickness of the hypodermis, aquiferous and photosynthetic parenchyma were determined at the median portion of the leaf using a totally randomized design with three treatments and four replicates. The basic structure of the pineapple leaf under in vitro conditions did not change. However, stomatal frequency, cuticular and epidermal wall thickening, shape and sinuosity of the cell walls of aquiferous parenchyma and the presence of papillary cells were verified as a result of environmental conditions during culture, indicating phenotypic plasticity.O objetivo deste trabalho foi indicar caracteres anatômicos em folhas de plantas micropropagadas de abacaxizeiro, visando ao aperfeiçoamento do protocolo de aclimatação. Utilizaram-se plântulas micropropagadas in vitro e aclimatadas por seis e dez meses, apresentando, em média, 3,1, 50,2 e 65 g, respectivamente. A densidade estomática foi determinada na face abaxial da epiderme, nas regiões basal, mediana e apical da folha, usando o delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial de 2x3 (dois ambientes de cultivo e três regiões da folha), em seis repetições. A espessura da hipoderme, parênquimas aqüífero e clorofilado foi determinada na região mediana da folha, usando-se o delineamento inteiramente casualizado com três tratamentos em quatro repetições. A estrutura básica da folha do abacaxizeiro não se modificou, entretanto, ocorreram diferenças na freqüência estomática, no espessamento da cutícula e paredes da epiderme, formato e sinuosidade das paredes das células do tecido aqüífero e presença de células papilosas nos diferentes ambientes de cultivo, indicando plasticidade fenotípica

In vitro culture of zygotic embryos and acclimatization of green dwarf coconut palm

O objetivo deste trabalho foi ajustar os protocolos de cultivo in vitro de embriões zigóticos e de aclimatação de plântulas de coqueiro-anão-verde do Brasil de Jiqui (Cocos nucifera L.). Os embriões zigóticos maduros, colocados assepticamente em meio de cultura líquido Y3 suplementado com 27,8 mg L-1 de Fe2SO4.7H2O e 60 g L-1 de sacarose, apresentaram maior germinação e formação de plântulas normais. As plântulas transferidas para meio indutor de enraizamento Y3, gelificado e suplementado com 1 mg L-1 de ANA, 0,5 mg L-1 de BAP e 2,5 g L-1 de carvão ativado, apresentaram incremento do desenvolvimento radicular e da parte aérea. Na fase de aclimatação, o substrato composto por areia lavada e pó de casca de coco seco, na proporção de 1:1, proporcionou maior sobrevivência das plântulas (58,33%), maior crescimento da parte aérea (39,08 cm) e maior número de folhas (6,33). Os protocolos estabelecidos para o cultivo in vitro de embriões zigóticos e a aclimatação de coqueiro-anão-verde de Jiqui podem ser utilizados no intercâmbio e conservação de germoplasma.The objective of this work was to improve the protocols for culture and acclimatization of green dwarf coconut palm (Cocos nucifera L.). Mature zygotic embryos, cultivated in vitro aseptically in Y3 liquid medium culture, supplemented with 27.8 mg L-1 of Fe2SO4.7H2O and 60 g L-1 of sucrose, presented higher germination and normal plantlets formation. The plantlets transferred to Y3 semi-solid medium culture supplemented with 1 mg L-1 of ANA, 0.5 mg L-1 of BAP and 2.5 g L-1 of activated charcoal, promoted better root and shoot development. In the acclimatization phase, the 1:1 substrate composed of washed sand and coconut coir dust provided higher survival of plantlets (58.33%), larger growth of the aerial part (39.08 cm) and larger number of leaves (6.33). The established protocols for in vitro culture of zygotic embryos and acclimatization of green dwarf coconut palm plantlets can be applied to germplasm exchange and conservation

Estiolamento e regeneração na multiplicação in vitro do abacaxizeiro híbrido PE x SC-52

Segmentos nodais estiolados são utilizados para a micropropagação e conservação da identidade genética em várias culturas. O objetivo deste trabalho foi avaliar a multiplicação in vitro de segmentos estiolados para produção de mudas do abacaxi híbrido PE x SC-52. Talos de plântulas produzidos in vitro receberam inóculo em tubos de ensaio contendo o meio de cultura MS e mantidos no escuro por 60 dias, para estiolamento. Foram utilizados três tratamentos, sem reguladores de crescimento, ANA a 1,86 mg/L e AIA a 1,75 mg/L em cinco repetições com dez explantes por repetição. Não houve diferença no número de brotos estiolados por explante entre os tratamentos avaliados. No entanto, aos 35 dias de cultivo, os tratamentos com ANA e AIA apresentavam maior número de nós por broto, sendo o ANA superior aos demais após 60 dias. Brotos estiolados in vitro por 60 dias foram colocados horizontalmente em placas de Petri contendo o meio MS e incubados na presença de luz. Foram usados quatro tratamentos para a regeneração das plântulas, sem reguladores de crescimento; BAP a 2 mg/L; ANA a 1,86 mg/L + BAP a 2 mg/L e CIN a 5 mg/L, em quatro repetições, com sete brotos estiolados, por repetição. O BAP promoveu maior número de plântulas regeneradas por broto e por nó, com uma média de 10,4 plântulas por broto estiolado, aos 30 dias