Identification and Quantification of an Adulterant in a Dietary Supplement Marketed for Sexual Enhancement

In recent years, the consumption of dietary supplements (DS) has increased worldwide. In Argentina, approximately 14 million DS units were sold between 2015 and 2017. The adulteration of DS with active pharmaceutical ingredients or their analogues has been reported. This represents an alarming emerging risk to public health. The aim of this work was to detect the possible adulteration of a DS marketed in Argentina for the treatment of erectile dysfunction. Initially, thin layer chromatography analysis of the DS capsules content suggested the presence of a major compound. For the isolation and purification of this compound, an easy method consisted of a liquid-liquid extraction (water/CH2Cl2) followed by re-crystallisation from ethanol, is reported. Spectroscopic techniques such as mono- and bidimensional nuclear magnetic resonance, Fourier transform infrared spectroscopy and mass spectrometry allowed its identification as tadalafil. A rapid and reliable method was developed for the quantification of tadalafil in this DS by high performance liquid chromatography-mass spectrometry (HPLC-MS/MS). The mean content of tadalafil per capsule was 21.2 mg which represents a slightly higher value than that found in approved products in Argentina (5 or 20 mg per tablet). In addition, an undeclared alga was identified in the DS by microscopic techniques.Fil: Redko, Flavia del Carmen. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Farmacología. Cátedra de Farmacognosia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Flor, Sabrina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Lucangioli, Silvia Edith. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Tecnología Farmacéutica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Ulloa, Jerónimo Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Farmacología. Cátedra de Farmacognosia; ArgentinaFil: Ricco, Rafael Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Farmacología. Cátedra de Farmacobótanica; ArgentinaFil: Fernández, Claudio Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Investigaciones para el Descubrimiento de Fármacos de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Instituto de Investigaciones para el Descubrimiento de Fármacos de Rosario; ArgentinaFil: Sambrotta, Luis Jorge. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Investigaciones para el Descubrimiento de Fármacos de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Instituto de Investigaciones para el Descubrimiento de Fármacos de Rosario; ArgentinaFil: Muschietti, Liliana Victoria. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Farmacología. Cátedra de Farmacognosia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentin

Interaction of Cu(i) with the Met-X3-Met motif of alpha-synuclein: binding ligands, affinity and structural features

The identity of the Cu(i) binding ligands at Met-X3-Met site of AcαS and its role into the affinity and structural properties of the interaction were elucidated by NMR spectroscopy. We provide evidence that the source of ligands for Cu(i) binding to the Met-X3-Met site comes from the N-terminal acetyl group and the Met-1, Asp-2 and Met-5 residues. From the study of site-directed mutants and synthetic peptide models of αS we demonstrated the critical role played by Met-1 and Met-5 residues on the binding affinity of the Cu(i) complex, acting as the main metal anchoring residues. While having a more modest impact in the affinity features of Cu(i) binding, as compared to the Met residues, the N-terminal acetyl group and Asp-2 are important in promoting local helical conformations, contributing to the stabilization of these structures by favoring Cu(i) binding.Fil: Gentile, Iñaki. Laboratorio Max Planck de Biología Estructural, Química y Biofísica Molecular de Rosario; ArgentinaFil: Garro, Hugo Alejandro. Laboratorio Max Planck de Biología Estructural, Química y Biofísica Molecular de Rosario; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Investigaciones en Tecnología Química. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Investigaciones en Tecnología Química; ArgentinaFil: Delgado Ocaña, Susana. Laboratorio Max Planck de Biología Estructural, Química y Biofísica Molecular de Rosario; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Investigaciones para el Descubrimiento de Fármacos de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Instituto de Investigaciones para el Descubrimiento de Fármacos de Rosario; ArgentinaFil: González, Nazareno. Laboratorio Max Planck de Biología Estructural, Química y Biofísica Molecular de Rosario; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Investigaciones para el Descubrimiento de Fármacos de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Instituto de Investigaciones para el Descubrimiento de Fármacos de Rosario; ArgentinaFil: Strohäker, Timo. Max Planck Institute For Biophysical Chemistry; AlemaniaFil: Schibich, Daniela. Laboratorio Max Planck de Biología Estructural, Química y Biofísica Molecular de Rosario; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Investigaciones para el Descubrimiento de Fármacos de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Instituto de Investigaciones para el Descubrimiento de Fármacos de Rosario; ArgentinaFil: Quintanar, Liliana. Centro de Investigación y de Estudios; MéxicoFil: Sambrotta, Luis Jorge. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Investigaciones para el Descubrimiento de Fármacos de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Instituto de Investigaciones para el Descubrimiento de Fármacos de Rosario; ArgentinaFil: Zweckstetter, Markus. Max Planck Institute For Biophysical Chemistry; Alemania. Deutsches Zentrum Für Neurodegenerative Erkrankungen; AlemaniaFil: Griesinger, Christian. Max Planck Institute For Biophysical Chemistry; AlemaniaFil: Menacho Márquez, Mauricio Ariel. Laboratorio Max Planck de Biología Estructural, Química y Biofísica Molecular de Rosario; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnol.conicet - Rosario. Unidad de Direccion; ArgentinaFil: Fernandez, Claudio Oscar. Laboratorio Max Planck de Biología Estructural, Química y Biofísica Molecular de Rosario; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Investigaciones para el Descubrimiento de Fármacos de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Instituto de Investigaciones para el Descubrimiento de Fármacos de Rosario; Argentina. Max Planck Institute For Biophysical Chemistry; Alemani

Detection of a tadalafil analogue as an adulterant in a dietary supplement for erectile dysfunction

INTRODUCTION: Several cases of adulteration of dietary supplements with tadalafil, sildenafil, and vardenafil, or their unapproved analogues have been reported worldwide. Mainly, the presence of the latter represents a serious health risk to consumers as their efficacy and toxic effects have not been assessed and may result in unpredictable adverse effects. AIM: To investigate the suspected adulteration with synthetic phosphodiesterase type 5 (PDE-5) inhibitors in a dietary supplement marketed in Argentina for the treatment of erectile dysfunction (ED). METHODS: The content of the capsules of the dietary supplement (sample A) was analyzed by thin layer chromatography (TLC) and high-performance liquid chromatography (HPLC) diode-array detection. From the organic extract of sample A, a major compound was purified by column chromatography (CC). The isolated compound was identified by proton nuclear magnetic resonance (1H NMR) and carbon NMR (13C NMR), heteronuclear single quantum coherence, distortionless enhancement by polarization transfer (DEPT 135), electrospray ionization mass spectrometry, and ultraviolet, and infrared (Fourier transform infrared spectroscopy) spectroscopy. MAIN OUTCOME MEASURE: Proof of adulteration of herbal products with synthetic PDE-5 inhibitors. RESULTS: By TLC and HPLC analysis, a major compound was detected in sample A organic extract. The purification of this extract by CC led to the isolation of a pure compound which was identified according to its spectral data as (6R,12aR)-2-amino-6-(1,3-benzodioxol-5-yl)-2,3,6,7,12,12a-hexahydropyrazino [1',2':1,6] pyrido [3,4-b] indole-1,4-dione or aminotadalafil. CONCLUSIONS: An unapproved PDE-5 inhibitor analogue, which was identified as aminotadalafil, has been detected in a dietary supplement. This study represents the first report in Latin America and one of the few independent studies of an adulteration with an unapproved PDE-5 inhibitor of an herbal product for ED treatment.Fil: Ulloa, Jerónimo Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Farmacología. Cátedra de Farmacognosia; ArgentinaFil: Sambrotta, Luis Jorge. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Laboratorio Nacional de Investigaciones y Servicios; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Redko, Flavia del Carmen. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Farmacología. Cátedra de Farmacognosia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Mazza, Osvaldo Néstor. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Garrido, Gustavo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Becher, Edgardo F.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Muschietti, Liliana Victoria. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Farmacología. Cátedra de Farmacognosia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; Argentin