First isolation of Histoplasma capsulatum from the urban bat Eumops bonariensis

Fil: Canteros, C. E. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Iachini, R. H. Instituto Municipal de Zoonosis Luis Pasteur; Argentina.Fil: Rivas, M. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Vaccaro, O. Museo Argentino de Ciencias Naturales Bernardino Rivadavia; Argentina.Fil: Madariaga, J. Instituto Municipal de Zoonosis Luis Pasteur; Argentina.Fil: Galarza, R. Instituto Municipal de Zoonosis Luis Pasteur; Argentina.Fil: Snaiderman, L. Instituto Municipal de Zoonosis Luis Pasteur; Argentina.Fil: Martínez, M. Instituto Municipal de Zoonosis Luis Pasteur; Argentina.Fil: Paladino, M. Instituto Municipal de Zoonosis Luis Pasteur; Argentina.Fil: Cicuttin, G. Instituto Municipal de Zoonosis Luis Pasteur; Argentina.Fil: Varela, E. Museo Argentino de Ciencias Naturales Bernardino Rivadavia; Argentina.Fil: Alcoba, E. Hospital Municipal de Oncología Marie Curie; Argentina.Fil: Zuiani, F. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Sahaza, J. H. UNAM. Departamento de Microbiología y Parasitología; México.Fil: Taylor, M. L. UNAM. Departamento de Microbiología y Parasitología; México.Fil: Davel, Graciela Odelsia. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Se comunica el primer aislamiento de Histoplasma capsulatum var. capsulatum de un murciélago macho de la especie Eumops bonariensis, capturado en la ciudad de Buenos Aires en 2003. Los aislamientos fueron recuperados de bazo e hígado e identificados fenotípicamente. Se los comparó por PCR, con 17 aislamientos clínicos, 12 de pacientes residentes en la ciudad de Buenos Aires y cinco de otros países de América, usando los iniciadores 1283, (GTG)5, (GACA)4 y M13. Con los cuatro iniciadores, los perfiles de los aislamientos de murciélago resultaron idénticos entre sí y más relacionados a los de pacientes de Buenos Aires que a los de otros países (porcentaje de similitud: 91-100% y 55- 87%, respectivamente). La alta relación genética entre los aislamientos obtenidos del murciélago y de los humanos residentes en Buenos Aires sugiere una fuente común de infección. Este es el primer registro de E. bonariensis infectado con H. capsulatum en el mundo, y el primer aislamiento del hongo en la población de quirópteros de la Argentina. Así como estos mamíferos actúan como reservorio y dispersan el hongo en la naturaleza, la infección en murciélagos urbanos podría asociarse al elevado número de casos de histoplasmosis entre pacientes inmunodeprimidos en la ciudad de Buenos Aires

Papel de las moléculas de adhesión ICAM-1 Y LFA-1 en la patogénesis de la Paracoccidioidomicosis pulmonar experimental

<p class="MsoNormal"><strong><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">Introducción: </span></strong><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">La Paracoccidioidomicosis</span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial"> (PCM), micosis sistémica común en América Latina, es una enfermedad crónica progresiva, causada por la inhalación de las conidias del hongo dimórfico térmico Paracoccidiodes brasiliensis (Pb). La infección pulmonar inicial se caracteriza por una importante respuesta inflamatoria aguda, posteriormente se observa una respuesta inflamatoria crónica y finalmente se desencadena un proceso fibrótico, secuela que se presenta en el 60 - 80 % de los pacientes. El proceso de adhesión de los leucocitos al endotelio se considera un evento temprano y es requisito indispensable para que se produzca la respuesta inflamatoria. Este proceso de adherencia es mediado por moléculas de adhesión como la molécula de adhesión intercelular-1 (ICAM-1) presente en el endotelio que se une a una </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Symbol">b</span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">-2 integrina presente en el leucocito (LFA-1). Dichas moléculas no solo son necesarias para la adhesión de los leucocitos sino también, para su migración y activación. Su importancia ha sido demostrada en otras micosis como la candidiasis, criptococosis, aspergilosis y pneumocistosis. El objetivo del presente estudio es evaluar la expresión a nivel pulmonar de ICAM-1 y LFA-1 en un modelo murino de PCM experimental, establecer su relación con la respuesta inflamatoria observada y determinar el papel que jugarían estas moléculas en la patogénesis de la micosis.</span></p> <p class="MsoNormal"><strong><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">Metodología: </span></strong><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">se utilizan ratones machos isogénicos BALB/c de 6 semanas de edad, los cuales son inoculados intranasalmente (i.n.) con 4 x 10</span><span style="font-size: 4.5pt; font-family: Arial">6 </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">conidias de P. brasiliensis, cepa ATCC 60855 o con PBS (grupo control). Para determinar la respuesta inflamatoria y la expresión de ICAM-1 y LFA-1 a nivel pulmonar los animales son sacrificados a los 0, 1, 2, 3, 4, 7, 14 y 28 días post-infección para estudiar en ellos:</span></p> <p class="MsoNormal"><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">a) La celularidad del lavado broncoalveolar (LBA) (# total de células/animal y % de cada tipo celular) y b) la detección por inmunohistoquímica de la expresión de ICAM-1 y LFA-1 en los pulmones de ambos grupos de animales. Para evaluar el papel in vivo del ICAM-1 y LFA-1 en el control de la infección los animales infectados y no infectados serán tratados con anticuerpos monoclonales anti-ICAM-1 y anti-LFA-1. Se registrará diariamente el numero de muertes de cada grupo, por un periodo de cuatro meses y se determinará la diseminación extrapulmonar del hongo mediante el cultivo de órganos (hígado,</span></p> <p class="MsoNormal"><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">bazo y pulmón).</span></p> <p class="MsoNormal"><strong><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">Resultados: </span></strong><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">se obtuvieron un total de 112 LBA distribuidos en 8 grupos con 14 muestras cada uno (8 infectados y 6 controles). El grupo control presento una baja celularidad (0.13 </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Symbol">± </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">0.032 x 10</span><span style="font-size: 4.5pt; font-family: Arial">6 </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">células) sin existir diferencia significativa entre los diferentes periodos estudiados. Estos LBA presentaron un alto porcentaje de macrófagos ( 97.0 </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Symbol">± </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">5.4 %) con escasos PMN (2.4 </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Symbol">± </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">5.4 %). Por el contrario, los LBA provenientes de animales infectados presentaron un aumento significativo en su celularidad (1.4 </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Symbol">± </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">1.5 x 10</span><span style="font-size: 4.5pt; font-family: Arial">6 </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">cels, p= 0.0019) siendo mayor este incremento en las primeras horas ( de 24hs= 1.12 </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Symbol">± </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">0.19 x 10</span><span style="font-size: 4.5pt; font-family: Arial">6 </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">cels a 96hs= 2.07 </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Symbol">± </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">0.19 x 10</span><span style="font-size: 4.5pt; font-family: Arial">6 </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">cels) con un pico máximo significativo a las 48hs (4.81 </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Symbol">± </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">0.86 x 10</span><span style="font-size: 4.5pt; font-family: Arial">6</span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">, p= 0.0001 ), mostrando un predominio de PMN (92.5 </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Symbol">± </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">2.0% y 90.7 </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Symbol">± </span><span style="font-size: 8pt; font-family: Arial">3.0 %) en las primeras 24 y 48hs respectivamente. Estos resultados confirman que la infección por vía inhalatoria con conidias de Pb induce un respuesta inflamatoria aguda inicial en pulmón con un reclutamiento de leucocitos y con predominio de PMN. Estos datos se correlacionarán posteriormente con la expresión a nivel pulmonar de las moléculas de adhesión ICAM-1 y LFA-1.</span></p&gt

Profile of cytokines in the lungs of BALB/c mice after intra-nasal infection with Histoplasma capsulatum mycelial propagules

Fil: Sahaza, Jorge H. Laboratorio de Inmunología de Hongos, Unidad de Micología, Departamento de Microbiología y Parasitología, Facultad de Medicina, Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM); México.Fil: Suárez-Alvarez, Roberto. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Estrada-Bárcenas, Daniel Alfonso. Laboratorio de Inmunología de Hongos, Unidad de Micología, Departamento de Microbiología y Parasitología, Facultad de Medicina, Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM); México.Fil: Pérez-Torres, Armando. Laboratorio de Filogenia del Sistema Inmune de Piel y Mucosas, Departamento de Biología Celular y Tisular, Facultad de Medicina, UNAM; México.Fil: Taylor, Maria Lucia. Laboratorio de Inmunología de Hongos, Unidad de Micología, Departamento de Microbiología y Parasitología, Facultad de Medicina, Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM); México.The host pulmonary response to the fungus Histoplasma capsulatum was evaluated, through the profile of cytokines detected by the MagPix magnetic beads platform in lung homogenates and by lung-granulomas formation, from mice intra-nasally infected with mycelial propagules (M-phase) of two virulent H. capsulatum strains, EH-46 and G-217B. Results highlight that mice lung inflammatory response depends on the H. capsulatum strain used, during the first step of the fungal infection. IL-1β and TNF-α increased their concentrations in mice infected with both strains. The highest levels of IL-6, IL-17, and IL-23 were found in EH-46-infected mice, whereas levels of IL-22 were variable at all post-infection times for both strains. Significant increases of IL-12, IFN-γ, IL-4, and IL-10 were associated to EH-46-infected mice. Histological lung findings from EH-46-infected mice revealed incipient and numerous well-developed granulomas, distributed in lung-lobes at the 14th and the 21st days after infection, according to cytokine profiles

Expresion of th1-th2 cytokines and their relation with the inducide nitricoxide synthaer (nos) in the lungs of balb

IP 2213-04-153-97Incluye anexos.en la paracoccidioidomicosis pulmonar experimental: Ensayos Invivo / LuzElena Cano ... [et al.]. -- En:;Infectio. -- Vol. 4, no. 1 (jun. 15-17 2000). -- Participaciondel factorde nerosis tumoral alfa (TNF- ) enla;respuesta inmune contra el paracoccidioides brasiliens / Luz Elena Cano ... [et al.]. -- En: Infectio. -- Vol.;5, no. 2 (jun. 2001).;Papel protector del oxido nitrico en la paracoccidioimicosis pulkmonar experimental y su relacion con algunas;citoquinas: ensayos in vivo / Luz Elena Cano ... [et al.].--En: PrimerasJornadas Interuniversitarias de;Investigacion biomedica ( 1 : 2001 oct. 31, nov. 1-2 : Medellin,Colombia). -- Medellin : Corporacion para;Investigaciones Biomedicas, 2001. -- p. -- 28 cm. -- ARTICULO(S)EN REVISTA: Papel protector del oxido nitrico;PONENCIA(S) EN CONGRESO: Papel protector del oxido nitricoenlaparacoccidioidomicosis pulmonar;experimental: ensayos In vivo / Luz Elena Cano ... [et al.].-'- en: Congreso CIB (5 :1999 dic. : 9-10 :;Medellin, Colombia). -- Medellin : Corporacion para Investigaciones Biologicas, 1999. -- p. -- 28 cm. --;Protective role of nitric oxide on experimental pulmonaryparacoccidioidomycosis in vivo assays / Luz Elena;Cano ... [et al.]. -- En: Congress of the International Societyfor Humanand Animal Mycology. -- (14 : 2000;May. 8-12 : Buenos Aires ; Argentina). -- Buenos Aires : Sheraton Buenos Aires Hotel, 2000. -- p. -- 28 cm. -

Mecanismo fungicida de macrófagos murinos activados mediado por el óxido nítrico contra conidias de Paracoccidioides brasiliensis :papel del TNF-a

IP 2213-04-1021-98Incluye anexos.contra el Paracoccidioides brasiliensis / Angel Gonzalez,MartaE. Uran, Beatriz H. Aristizabal, Erika Caro,;PONENCIA(S) EN CONGRESO: Participacion del factor de necrosistumoral alfa(TNF-a) en la respuesta inmune;Jorge H. Sahaza, Angela Restrepo y Luz E. Cano. -- En: 5 Congreso de enfermedades infecciosas.;infecciosas

Dimorphism and Dissemination of Histoplasma capsulatum in the Upper Respiratory Tract after Intranasal Infection of Bats and Mice with Mycelial Propagules

This article describes, for the first time, the role of the nasal mucosa (NM) as the initial site for the Histoplasma capsulatum mycelial-to-yeast transition. The results highlight that yeasts may arrive to the cervical lymph nodes (CLN) via phagocytes. Bats and mice were intranasally infected with H. capsulatum mycelial propagules and they were killed 10, 20, and 40 minutes and 1, 2, and 3 hours after infection. The NM and the CLN were monitored for fungal presence. Yeasts compatible with H. capsulatum were detected within the NM and the CLN dendritic cells (DCs) 2-3 hours postinfection, using immunohistochemistry. Histoplasma capsulatum was re-isolated by culturing at 28°C from the CLN of both mammalian hosts 2-3 hours postinfection. Reverse transcription-polymerase chain reaction assays were designed to identify fungal dimorphism, using mycelial-specific (MS8) and yeast-specific (YPS3) gene expression. This strategy supported fast fungal dimorphism in vivo, which began in the NM 1 hour postinfection (a time point when MS8 and YPS3 genes were expressed) and it was completed at 3 hours (a time point when only the YPS3 transcripts were detected) in both bats and mice. The presence of intracellular yeasts in the nasal-associated lymphoid tissue (NALT), in the NM nonassociated with the NALT, and within the interdigitating DCs of the CLN suggests early fungal dissemination via the lymph vessels

First isolation of Histoplasma capsulatum from the urban bat Eumops bonariensis

Fil: Canteros, C. E. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Iachini, R. H. Instituto Municipal de Zoonosis Luis Pasteur; Argentina.Fil: Rivas, M. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Vaccaro, O. Museo Argentino de Ciencias Naturales Bernardino Rivadavia; Argentina.Fil: Madariaga, J. Instituto Municipal de Zoonosis Luis Pasteur; Argentina.Fil: Galarza, R. Instituto Municipal de Zoonosis Luis Pasteur; Argentina.Fil: Snaiderman, L. Instituto Municipal de Zoonosis Luis Pasteur; Argentina.Fil: Martínez, M. Instituto Municipal de Zoonosis Luis Pasteur; Argentina.Fil: Paladino, M. Instituto Municipal de Zoonosis Luis Pasteur; Argentina.Fil: Cicuttin, G. Instituto Municipal de Zoonosis Luis Pasteur; Argentina.Fil: Varela, E. Museo Argentino de Ciencias Naturales Bernardino Rivadavia; Argentina.Fil: Alcoba, E. Hospital Municipal de Oncología Marie Curie; Argentina.Fil: Zuiani, F. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Sahaza, J. H. UNAM. Departamento de Microbiología y Parasitología; México.Fil: Taylor, M. L. UNAM. Departamento de Microbiología y Parasitología; México.Fil: Davel, Graciela Odelsia. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Se comunica el primer aislamiento de Histoplasma capsulatum var. capsulatum de un murciélago macho de la especie Eumops bonariensis, capturado en la ciudad de Buenos Aires en 2003. Los aislamientos fueron recuperados de bazo e hígado e identificados fenotípicamente. Se los comparó por PCR, con 17 aislamientos clínicos, 12 de pacientes residentes en la ciudad de Buenos Aires y cinco de otros países de América, usando los iniciadores 1283, (GTG)5, (GACA)4 y M13. Con los cuatro iniciadores, los perfiles de los aislamientos de murciélago resultaron idénticos entre sí y más relacionados a los de pacientes de Buenos Aires que a los de otros países (porcentaje de similitud: 91-100% y 55- 87%, respectivamente). La alta relación genética entre los aislamientos obtenidos del murciélago y de los humanos residentes en Buenos Aires sugiere una fuente común de infección. Este es el primer registro de E. bonariensis infectado con H. capsulatum en el mundo, y el primer aislamiento del hongo en la población de quirópteros de la Argentina. Así como estos mamíferos actúan como reservorio y dispersan el hongo en la naturaleza, la infección en murciélagos urbanos podría asociarse al elevado número de casos de histoplasmosis entre pacientes inmunodeprimidos en la ciudad de Buenos Aires

Histoplasma capsulatum Isolated from Tadarida brasiliensis Bats Captured in Mexico Form a Sister Group to North American Class 2 Clade.

Histoplasma capsulatum is a dimorphic fungus associated with respiratory and systemic infections in mammalian hosts that have inhaled infective mycelial propagules. A phylogenetic reconstruction of this pathogen, using partial sequences of arf, H-anti, ole1, and tub1 protein-coding genes, proposed that H. capsulatum has at least 11 phylogenetic species, highlighting a clade (BAC1) comprising three H. capsulatum isolates from infected bats captured in Mexico. Here, relationships for each individual locus and the concatenated coding regions of these genes were inferred using parsimony, maximum likelihood, and Bayesian inference methods. Coalescent-based analyses, a concatenated sequence-types (CSTs) network, and nucleotide diversities were also evaluated. The results suggest that six H. capsulatum isolates from the migratory bat Tadarida brasiliensis together with one isolate from a Mormoops megalophylla bat support a NAm 3 clade, replacing the formerly reported BAC1 clade. In addition, three H. capsulatum isolates from T. brasiliensis were classified as lineages. The concatenated sequence analyses and the CSTs network validate these findings, suggesting that NAm 3 is related to the North American class 2 clade and that both clades could share a recent common ancestor. Our results provide original information on the geographic distribution, genetic diversity, and host specificity of H. capsulatum

Treatment of an Aedes aegypti colony with the Cry11Aa toxin for 54 generations results in the development of resistance

To study the potential for the emergence of resistance in Aedes aegypti populations, a wild colony was subjected to selective pressure with Cry11Aa, one of four endotoxins that compose the Bacillus thuringiensis serovar israelensis toxin. This bacterium is the base component of the most important biopesticide used in the control of mosquitoes worldwide. After 54 generations of selection, significant resistance levels were observed. At the beginning of the selection experiment, the half lethal concentration was 26.3 ng/mL and had risen to 345.6 ng/mL by generation 54. The highest rate of resistance, 13.1, was detected in the 54th generation. Because digestive proteases play a key role in the processing and activation of B. thuringiensis toxin, we analysed the involvement of insect gut proteases in resistance to the Cry11Aa B. thuringiensis serovar israelensis toxin. The protease activity from larval gut extracts from the Cry11Aa resistant population was lower than that of the B. thuringiensisserovar israelensis susceptible colony. We suggest that differences in protoxin proteolysis could contribute to the resistance of this Ae. aegypti colony