Study of SREBP1 and SERBP2 in peripheral blood mononuclear cells fron hypercholesterolemic rabbits

Peripheral blood mononuclear cells are a possible biomarker that could reveal molecular alterations before the development of the disease. Therefore, the objective of the present investigation is to study molecular and genetic changes that indicate metabolic modifications even with normal biochemical values. SERBP1 and SERBP2 are proteins involved in lipid metabolic. These molecules can be expressed in peripheral blood mononuclear cells. This allows study tissue changes without resorting to biopsies. In this study, one control group of New Zealand rabbits was fed with a balanced feed (C) and another group received the same balanced feed supplemented with 17% fat (F). These animals did not receive fructose overload, maintaining constant concentrations of carbohydrates and protein in both groups. In biochemical tests from both groups were observed similar levels of glucose (C group: 140.7 + 28.4 mg/dl / F group: 118.3 +12.0 mg/dl) and triglyceride (C group: 144.1 +15.5 mg/dl / F group: 135.6 +8.3 mg/dl), while F group showed increased levels of cholesterol (42.8 +21.6mg/dl) compared with C group (27.1 +4.5 mg/dl). However, there is variability in the cholesterol values because some animals of the F group do not experience significant increment despite the intake of fat. This interesting finding leads to the hypothesis that changes in lipid metabolism can be examined by the expression of different genes early. As preliminary results, we observed by immunohistochemistry the presence nuclear of SREBP1 and SREBP2 in lymphocytes of the F group, while in C group was not observed immunoreaction or cytoplasmic signal. This result is indicating an activation of the lipid metabolism before being able to observe changes at a biochemical level.Fil: Saez, Aldana. Universidad "Juan Agustín Maza"; ArgentinaFil: Mussi, Jesica. Universidad "Juan Agustín Maza"; ArgentinaFil: Funes, Abi Karenina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Colombo, Regina Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Fornes, Miguel Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Saez Lancellotti, Tania Emilce Estefania. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Boarelli, P. Universidad "Juan Agustín Maza"; ArgentinaXXXVI Reunión Científica Anual de la Sociedad de Biología de CuyoMendozaArgentinaSociedad Argentina de Biologí

Respuesta aguda vs crónica de la vía srebp-2 en testículo de conejos hipercolesterolémicos

Se ha demostrado que la fertilidad masculina depende de la homeostasis del colesterol (col). El col es esencial para la síntesis de la testosterona y la espermatogénesis. Para el correcto funcionamiento de los testículos, el col debe mantenerse en un rango óptimo. Previamente, hemos demostrado que los conejos bajo una dieta alta en grasas (HFD) presentan una baja calidad seminal relacionada con una sobrecarga de colesterol en las células del túbulo seminífero. El objetivo de este trabajo fue estudiar la vía molecular que regula el col intracelular, controlado por las proteínas SREBP (Sterol regulatory element-binding proteins), en testículo de animales bajo HFD. Para investigar esto, utilizamos nuestro modelo, previamente puesto a punto, de conejos neozelandeses hipercolesterolémicos que presentan una baja calidad seminal. La expresión de SREBP-2 se estudió por RT-PCR, western blot e inmunofluorescencia en muestras obtenidas de testículo de animales alimentados con HFD (14% de grasa bovina p/p) por un período menor a 6 meses (HCR ≤ 6M) o mayor a 12 meses (HCR ≥ 12M). Nuestros resultados muestran que el consumo de grasa promovió una disminución significativa en la expresión tanto del ARNm como de la proteína de SREBP-2 en el testículo a los 6 meses (42 % y 48 % respectivamente), pero un aumento significativo a los 12 meses (160 % y 30 % respectivamente). Esto se correlacionó con la acumulación de colesterol testicular, evaluada mediante tinción con Filipina III. Sin embargo, las alteraciones de los lípidos en sangre y los cambios deletéreos seminales fueron evidentes ya a los 6 meses de ingesta grasa. Además, mediante inmunofluorescencia indirecta, se obtuvo la localización sub-celular de la proteína SREBP-2 en el testículo. En conclusión, la vía que regula los niveles de col en el testículo es sensible a la grasa alimentaria, y se comporta de manera diferente según el período de tiempo que los conejos consumen grasa: se puede observar un efecto protector a corto plazo, pero se desregula a largo plazo. Esto conduce en última instancia a una situación perjudicial, relacionada con la mala calidad seminal.Fil: Funes, Abi Karenina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Colombo, Regina Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Universidad "Juan Agustín Maza"; ArgentinaFil: Avena, María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Universidad "Juan Agustín Maza"; ArgentinaFil: Crescitelli, Julieta. Universidad del Aconcagua; ArgentinaFil: Roldan, Adrián. Universidad del Aconcagua; ArgentinaFil: Boarelli, Paola Vanina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Monclus, María Angeles. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Universidad del Aconcagua; ArgentinaFil: Fornes, Miguel Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Saez Lancellotti, Tania Emilce Estefania. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Universidad del Aconcagua; ArgentinaIV Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina: “Nuevas Evidencias y Cambios de Paradigmas en Ciencias Biológicas”MendozaArgentinaSociedad de Biología de CuyoSociedad de Biología de CórdobaSociedad de Biología de RosarioAsociación de Biología de TucumánUniversidad Nacional de CuyoGobierno de la Provincia de MendozaSociedad Argentina de Biologí

Study of the metabolic impact of hyperlipemic diets in monomorfonuclear cells of peripheral blood: preliminary results

Las alteraciones metabólicas asociadas a la dieta son de gran impacto en la salud, ya que se encuentran relacionadas con enfermedades crónicas no transmisibles, tales como obesidad, enfermedades cardiovasculares, diabetes, entre otras. Las células monomorfonucleares sanguíneas (PBMC) constituyen un rol importante como biomarcadores tempranos en el estudio del impacto de dietas enriquecidas en grasas sobre el metabolismo lipídico. Estas permiten profundizar el conocimiento de la patogenia por métodos no invasivos de manera precoz. Por lo que el objetivo planteado es estudiar las PBMC como una herramienta de investigación de la expresión génica en alteraciones del metabolismo lipídico

A chronic high-fat diet causes sperm head alterations in C57BL/6J mice

A chronic-positive energetic balance has been directly correlated with infertility in men, but the involved mechanisms remain unknown. Herein we investigated weather in a mouse model a chronic feeding with a diet supplemented with chicken fat affects sperm head morphology. To accomplish this, we fed mice for 16 weeks with either control food (low-fat diet, LFD) or control food supplemented with 22% chicken fat (high-fat diet, HFD). At the end of the feeding regimen, we measured: redox and inflammatory changes, cholesterol accumulation in testis and analyzed testicular morphological structure and ultra-structure and liver morphology. We found that the mice fed HFD resembled some features of the human metabolic syndrome, including systemic oxidative stress and inflammation, this group showed an increment in the following parameters; central adiposity (adiposity index: 1.07 0.10 vs 2.26 0.17), dyslipidemia (total cholesterol: 153.3 2.6 vs 175.1 8.08 mg/dL), insulin resistance (indirect Insulin resistance index, TG/HDL-c: 2.94 0.33 vs 3.68 0.15) and fatty liver. Increased cholesterol content measured by filipin was found in the testicles from HFD (fluorescence intensity increase to 50%), as well as an alteration of spermiogenesis. Most remarkably, a disorganized manchette-perinuclear ring complex and an altered morphology of the sperm head were observed in the spermatozoa of HFD-fed mice. These results add new information to our understanding about the mechanisms by which systemic oxidative stress and inflammation may influence sperm-head morphology and indirectly male fertility.Fil: Funes, Abi Karenina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Saez Lancellotti, Tania Emilce Estefania. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Santillán, Lucas Damián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto Multidisciplinario de Investigaciones Biológicas de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Ciencias Físico Matemáticas y Naturales. Instituto Multidisciplinario de Investigaciones Biológicas de San Luis; ArgentinaFil: Della Vedova, Maria Cecilia. Universidad Nacional de San Luis; ArgentinaFil: Monclus, Maria de Los Angeles. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Cabrillana, María Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Gomez-Mejiba, Sandra Esther. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Ramirez, D. C.. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Fornes, Miguel Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin

Semen Quality and Sperm Function Loss by Hypercholesterolemic Diet Was Recovered by Addition of Olive Oil to Diet in Rabbit

Fat increment (0.05% cholesterol, chol) in standard diet promoted a significant increase in serum and sperm membrane chol, which ultimately altered membrane-coupled sperm specific functions: osmotic resistance, acrosomal reaction, and sperm capacitation in White New Zealand rabbits. These changes were also associated with a reduction in motility percentage and appearance of abnormal sperm morphology. The present study was carried out to evaluate the effect of dietary olive oil (OO, 7% v/w) administration to several male hypercholesterolemic rabbits (hypercholesterolemic rabbits, HCR) with altered fertility parameters. These HCR males were achieved by feeding normal rabbits with a high-fat diet (0.05% chol). HCR were associated with a modest non-significant increase in body weight (standard diet, 4.08±0.17 Kg, versus high-fat diet, 4.37±0.24 Kg). Hypercholesterolemic rabbits presented a marked decrease in semen volume, sperm cell count, and percentage of sperm motility, associated with a significant increase in sperm cell abnormalities. Moreover, sperm capacitation measured by the characteristic phosphorylated protein pattern in and induced acrosomal reaction were also altered suggesting sperm dysfunction. However, the administration of OO (for 16 weeks) to rabbits that were fed with 50% of the high-fat diet normalized serum chol. Curiously, OO supply succeeded to attenuate the seminal and sperm alterations observed in HCR group. Administration of OO alone did not cause any significant changes in above mentioned parameters. These data suggest that OO administration to HCR male rabbits recovers the loss of semen quality and sperm functionality.Fil: Saez Lancellotti, Tania Emilce Estefania. Universidad del Aconcagua. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Mendoza. Instituto Histología y Embriología de Mendoza; Argentina;Fil: Boarelli, Paola Vanina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Mendoza. Instituto Histología y Embriología de Mendoza; Argentina; Universidad del Aconcagua. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina;Fil: Romero, Aida Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Mendoza. Instituto Histología y Embriología de Mendoza; Argentina;Fil: Funes, Abi Karenina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Mendoza. Instituto Histología y Embriología de Mendoza; Argentina;Fil: Cid Barria, Macarena. Universidad del Aconcagua. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina;Fil: Cabrillana, María Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Mendoza. Instituto Histología y Embriología de Mendoza; Argentina; Universidad del Aconcagua. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina;Fil: Monclus, Maria de Los Angeles. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Mendoza. Instituto Histología y Embriología de Mendoza; Argentina; Universidad del Aconcagua. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina;Fil: Simón, Layla Yamila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Mendoza. Instituto Histología y Embriología de Mendoza; Argentina;Fil: Vincenti, Amanda Edith. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Mendoza. Instituto Histología y Embriología de Mendoza; Argentina;Fil: Fornes, Miguel Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Mendoza. Instituto Histología y Embriología de Mendoza; Argentina; Universidad del Aconcagua. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina

Estudio del impacto de las dietas hiperlipémicas en células mononucleares en sangre periférica: resultados preliminares

Los trastornos metabólicos asociados con la dieta tienen un gran impacto en la salud, debido a su relación con enfermedades crónicas no transmisibles. Las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) tienen un papel importante como biomarcadores tempranos en el estudio del impacto de las dietas ricas en grasas en el metabolismo de los lípidos. Estos permiten profundizar el conocimiento de la patogénesis por métodos no invasivos. Por lo tanto, el objetivo es estudiar PBMC como una herramienta de investigación para la expresión génica en las alteraciones del metabolismo de los lípidos. Se obtuvieron muestras de diez conejos neozelandeses, divididos en el grupo control (n=5) alimentado con alimento balanceado (C), y el grupo de casos (n=5) alimentado con el mismo alimento suplementado con un 17% de grasa bovina (G). Los grupos de grasa no reciben sobrecarga de fructosa, manteniendo constante la concentración de carbohidratos y proteínas, típica de los alimentos básicos equilibrados. Se realizaron pruebas bioquímicas para determinar los niveles de glucosa en sangre (Gl), triglicéridos (TG), colesterol total (CT) y lipoproteínas de alta densidad (HDL). En PBMC, se realizaron pruebas inmunohistoquímicas para SREBP1c y SERBP2 (unión de proteínas a elementos reguladores estériles). Valores similares de Gl (C: 140 ± 28.4 mg / dL vs G: 118.3 ± 12.0 mg / dL) y TG (C: 144.1 ± 15.5 mg / dL vs.G: 135.6 ± 8.3 mg / dL) pueden observarse en estudios bioquímicos preliminares de ambos grupos, mientras que el grupo G muestra un aumento en CT (42.8 ± 21.6 mg / dL) en comparación con el grupo C (27.1 ± 4.5 mg / dl). Los valores de HDL fueron menor en el grupo C (9,3 ±4,76 vs 11,8 ± 3,45 mg/dl), y se calculó el índice aterogénico, con un valor mayor en grupo G (3,64 vs 2,91). Sin embargo, algunos animales del grupo G tienen valores similares al grupo C para CT (21.7 ± 2.4 mg / dl), HDL (9,9 ± 3,8) e IA (2,2), grupo de normocolesterolemia (NC). Por lo tanto, estos animales no muestran cambios bioquímicos a pesar de la ingesta de grasas como ocurre con otros. Los estudios de tejido hepático mostraron esteatosis (tinción con aceite rojo O), así como la presencia de SREBP1c (relación perinuclear / nuclear: C: 2.0, F: 0.71, NG: 1.81) y SERBP2 (relación perinuclear / nuclear: C: 3.29, F: 0.85, NG: 0.57) en PBMC. En conclusión, estos resultados indicarían una activación de la regulación génica sin cambios a nivel bioquímico en grupo NC. Estos resultados indican que es posible estudiar la expresión génica en PBMC, porque se puede observar la presencia de moléculas específicas relacionadas con el metabolismo de los lípidos.Fil: Avena, M. V.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Universidad "Juan Agustín Maza"; ArgentinaFil: Elias, María. Universidad "Juan Agustín Maza"; ArgentinaFil: Heredia, Rocío. Universidad "Juan Agustín Maza"; ArgentinaFil: Mussi Stoizik, Jessica Anabella. Universidad "Juan Agustín Maza"; ArgentinaFil: Colombo, Regina Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Funes, Abi Karenina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Fornes, Miguel Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Saez Lancellotti, Tania Emilce Estefania. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Boarelli, Paola Vanina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Universidad "Juan Agustín Maza"; ArgentinaIV Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina: “Nuevas Evidencias y Cambios de Paradigmas en Ciencias Biológicas”MendozaArgentinaSociedad de Biología de CuyoSociedad de Biología de CórdobaAsociación de Biología de Tucumá

Virgin olive oil improves semen quality altered by hypercholesterolemic diets in rabbits

The relationship between obesity/hypercholesterolemia and reduced male fertility has been reported clinically and in experimental models. The effect of high cholesterol intake and its impact in different tissue/organs has also been described in several models. The deleterious impact on reproductive tissues has been studied in rabbits and other species. Changes in lipid content in testis cells and epididymal cells were reported in normal or genetically reprogrammed animals. Recent work using the hypercholesterolemic rabbit (HCR) (breed: New Zealand) model previously developed to study atherosclerosis has demonstrated that increased fat in a nutritionally complete diet alters the cholesterol content and distribution in the rabbit sperm membrane. The high dietary fat level has serious consequences on sperm-specific functions that depend on membrane integrity/dynamics. At least two of the proposed pathways involved in regulating sperm capacitation and acrosomal reaction (AR) via cholesterol were compromised in the results; daily virgin olive oil supplementation together with a fat diet provided to male rabbits can restore the hypercholesterolemic (HC) response to basal level with a significant improvement of semen and sperm quality. We also concluded that the cellular events implicated must be further investigated to make greater progress not only in diagnosis and treatment but also in prevention. In these previous works, the sperm morphology of ejaculated sperm was altered. The final appearance of the sperm cell is due to complex mechanisms that take place in the seminiferous tubules. Recent work in the lab was aimed to study the Golgi apparatus / acrosome ? acroplaxome development, structures involved in the acquisition of the sperm head shape. Under HC the Golgi / acrosome development during spermiogenesis was altered promoting several sperm head and flagella implantation malformations. Interestingly, olive oil addition to normal diet avoids semen/sperm and testicular alterations in adult male rabbits.Fil: Fornes, Miguel Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Saez Lancellotti, Tania Emilce Estefania. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Simón, Layla Yamila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Funes, Abi Karenina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin

Olive oil addition to the high-fat diet reduces methylglyoxal (MG-H1) levels increased in hypercholesterolemic rabbits

Methylglyoxal (MG) is a highly reactive compound derived from sugar metabolism, precursor of cytotoxic products named Advanced Glycation End products (AGEs). Increased MG levels and MG-related AGEs have been long associated with diabetes and its complications. The association between MG and hypercholesterolemia -induced by high-fat diets- has not been studied previously, neither the effect of olive oil addition to this diets. OBJECTIVE: To analyze the variations of MG and cholesterol levels under the effect of high-fat and olive oil-enriched diets. METHODS: Sixteen healthy male adult (New Zealand White, 6 months old) rabbits were fed with commercial pellets (control, four rabbits), or with 14% of bovine grease added to the pellets (high-fat diet, twelve rabbits). After six months, bovine grease was reduced to 7% (half fat diet, eight rabbits). Then, 7% of olive oil was added to the pellets (protective diet, four rabbits). Glycaemia, cholesterolemia, HDL-cholesterolemia, triglyceridemia, fructosamine and MG-H1 levels were assessed in all experimental conditions (n = 4). RESULTS: The high-fat diet promoted a hypercholesterolemia associated with increased MG-H1 levels (p > 0.05) in nondiabetic and non-obese rabbits. Replacement of the high-fat diet with olive oil decreased significantly the cholesterolemia and MG-H1 levels (p > 0.05). CONCLUSIONS:Our data indicates that the replacement of a high-fat diet with olive oil can recover normal blood cholesterol values and can decrease MG-H1 levels.Fil: Simon, Layla. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Saez Lancellotti, Tania Emilce Estefania. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Cortese, Leandro. Universidad Nacional de Cuyo; ArgentinaFil: Veisaga, María Luisa. Fairchild Tropical Botanic Garden; . Florida International University; Estados UnidosFil: Chantarasinlapin, Preaw. Florida International University; Estados Unidos. Robert Stempel College Of Public Health And Social Work; . International University;Fil: Barbieri, Alejandro. Florida International University; Estados UnidosFil: Fornes Miguel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin

SPINK3 modulates mouse sperm physiology through the reduction of nitric oxide level independently of its trypsin inhibitory activity

Serine protease inhibitor Kazal-type (SPINK3)/P12/PSTI-II is a small secretory protein from mouse seminal vesicle which contains a KAZAL domain and shows calcium (Ca 2+)-transport inhibitory (caltrin) activity. This molecule was obtained as a recombinant protein and its effect on capacitated sperm cells was examined. SPINK3 inhibited trypsin activity in vitro while the fusion protein GST-SPINK3 had no effect on this enzyme activity. The inactive GST-SPINK3 significantly reduced the percentage of spermatozoa positively stained for nitric oxide (NO) with the specific probe DAF-FM DA and NO concentration measured by Griess method in capacitated mouse sperm; the same effect was observed when sperm were capacitated under low Ca 2+ concentration, using either intracellular (BAPTA-AM) or extracellular Ca 2+ (EDTA) chelators. The percentage of sperm showing spontaneous and progesterone-induced acrosomal reaction was significantly lower in the presence of GST-SPINK3 compared to untreated capacitated spermatozoa. Interestingly, this decrease was overcome by the exogenous addition of the NO donors, sodium nitroprusside (SNP), and S-nitrosoglutathione (GSNO). Phosphorylation of sperm proteins in tyrosine residues was partially affected by GST-SPINK3, however, only GSNO was able to reverse this effect. Sperm progressive motility was not significantly diminished by GST-SPINK3 or BAPTA-AM but enhanced by the addition of SNP. This is the first report that demonstrates that SPINK3 modulates sperm physiology through a downstream reduction of endogenous NO concentration and independently of SPINK3 trypsin inhibitory activity.Fil: Zalazar, Lucia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas; ArgentinaFil: Saez Lancellotti, Tania Emilce Estefania. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Clementi, Marisa Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Lombardo, Maria Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas; ArgentinaFil: Lamattina, Lorenzo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas; ArgentinaFil: de Castro, Rosana Esther. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas; ArgentinaFil: Fornes, Miguel Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Cesari, Andreina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas; Argentin

ODF1, sperm flagelar protein is expressed in kidney collecting ducts of rats

ODF1 has been described as an exclusively expressed testicular protein and is located in the outer dense fibersalong the sperm tail. ODF1 has been involved in the sperm motility and in the development of the flagellum, butthe function of ODF1 is not already clear. Other ODF proteins, such as ODF2 have been characterized in othertissues like the basal body of the kidney primary cilium, but so far only the mRNA of ODF1 has been described inother tissues. These observations let us to hypothesize that the expression of the protein ODF1 could not belimited to the testis. Therefore, in the present work we proposed to evaluate if the ODF1 protein could also bepresent in tissues other than the testis. Here we demonstrated through western blot, immunofluorescence, and RTPCR techniques that the protein and mRNA of ODF1 have been identified in the rat kidney. Finally, the presenceof ODF1 in kidney has also been confirmed through proteomic analysis using mass spectrometry. The resultsderived from these different complementary approaches indicate that, to our knowledge and for the first time,ODF1 is demonstrated to be present in an additional organ different to testis. This results raise new questionsabout potential other functions and locations of the ODF1 protein.Fil: Cabrillana, María Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Bocanegra, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; ArgentinaFil: Monclus, Maria de Los Angeles. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Saez Lancellotti, Tania Emilce Estefania. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Simón, Layla Yamila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Funes, Abi Karenina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Colombo, Regina Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Ruiz Estrabón, Martín Andres. Universidad del Aconcagua; ArgentinaFil: Vincenti, Amanda Edith. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Oliva Virgili, Rafael. Universidad de Barcelona; EspañaFil: Fornes, Miguel Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin