Concentração inibitória mínima (CIM) de oito antimicrobianos frente isolados de Streptococcus suis

Avaliou-se a concentração inibitória mínima (CIM) de 75 isolados de Streptococcus suis frente a oito antimicrobianos freqüentemente utilizados no controle da infecção por esse microrganismo. A CIM foi realizada em placas previamente preparadas com ágar sangue, contendo concentrações variando de 0,25 a 256 µg/ml dos seguintes antimicrobianos: amoxicilina, ampicilina, penicilina, ceftiofur sódico, florfenicol, lincomicina, penicilina, sulfametoxazol-trimetoprim e tetraciclina. A amoxicilina nas concentrações de 1 e 2 µg/ml, o florfenicol a 1 µg/ml e o sulfametoxazol-trimetoprim nas concentrações de 2 e 8 µg/ml, foram os antimicrobianos frente aos quais os microrganismos apresentaram menor resistência. Em contraste, a ampicilina, tetraciclina, ceftiofur sódico e lincomicina, foram menos efetivos, apresentando CIM de (64 e 128 µg/ml), (64 e 128 µg/ml), (128 e 256 µg/ml) e (>;256 µg/ml), respectivamente. Os resultados deste estudo demonstram que a amoxicilina e o florfenicol são os antibióticos de escolha para o tratamento de infecções pelo S. suis em suínos.The minimun inhibitory concentration (MIC) was determined toward amoxicilin, ampicilin, penicillin, ceftiofur, florfenicol, lincomycin, trimethoprim-sulfadiazine and tetracycline for 75 strains of Streptococcus suis. The MIC was performed on sheep blood agar plates containing concentrations varying from 0,25 to 256 µg/ml of the antibiotic described above. The amoxicilin in the concentrations of 1 and 2 µg/ml, florfenicol in the concentration of 1 µg/ml and trimethoprim-sulfadiazine in the concentrations of 2 e 8 µg/ml, were the antibiotics that presented minor resistance. In contrast, the ampicilin, tetracycline, ceftiofur and lincomycin, presented MIC of 64 and 128 µg/ml, 64 and 128 µg/ml, 128 and 256 µg/ml and >;256 µg/ml, respectively. The results of this study show that the amoxicilin and florfenicol are the antibiotics of choice for the treatment of diseases by S. suis in swine

Mionecroses: estudos epidemiológicos e moleculares

Exportado OPUSMade available in DSpace on 2019-08-14T06:44:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_de_doutorado_de_ronnie_antunes_de_assis.pdf: 14740077 bytes, checksum: 35b28c2663b0e04a02288de341873002 (MD5) Previous issue date: 30Realizaram-se estudos de casos de mionecroses causados por Clostridium chauvoei, Clostridium septicum e Clostridium sordelli, utilizando diferentes métodos laboratoriais. Fez-se estudo retrospectivo, empregando o complexo imunoenzimático estreptavidina-biotina peroxidase, em amostras clínicas parafinizadas de 33 casos de bovinos e suinos com suspeita clínica de mionecroses. padronizou-se uma técnica de PCR multiplex para detecção de C. chauvoei e C.septicum e, realizaram-se sequenciamento e análise filogenética de cinco isolados de campo e quatro sementes vacinais de C. septicum. No estudo retrospectivo, detectaram-se: C. Chauvoei, C. septicum, C.chauvoei mais Clostridium novyi tipo A e C. chauvoei mais C. sordellii em 21. oito, doi, um e um casos, respectivamente. A técnica de PCR multiplex amplificou eficientemente sequencias gênicas de C. chauvoei e C. septicum, apresentando sensibilidade de 45pg/uL e 30pg/uL, respectivamente. Não foram observadas reações cruzadas com outras espécies de clostridios, outras espécies bacterianas e, entre ambos os agentes. Pelo sequenciamento e análise filogenética, observou-se a existência de dois diferentes grupos de C. septicum.A study of natural cases of myonecroses by Clostridium chauvoei, Clostridium septicum and Clostridium sordellii was performed. In addition, a retrospective study employing the streptavidin-biotin peroxidase technique was made on formalin-fixed, paraffin-embedded tissues of 33 field cases from cattle and swine suspected of myonecrosis. A multiplex PCR tecnique for detection of C. chauvoei and C. septicum was standardized, and sequencing and phylogenetic analyses of five isolates and four vaccine strains of C. septicum was made. The results of the retrospective study revealed the presence of C. chauvoei, C. septicum, C. chauvoei plus C. septicum, C. chauvoei plus Clostridium novyi type A and C. chauvoei plus C. sordelli in 21, eight, two one and one cases, respectively. The multiplex PCR technique showed to be efficient for amplifyng genomic sequences of C. chauvoei and C. septicum isolates presenting a sensitivity of 45pg/uL, respectively. No cross reactions were observed toi other Clostridia, other bacterial species or between both agents. By the sequencing and phylogenetic analyses, the existence of two different genotypic groups of C. septicum was determined

Reação em cadeia da polimerase para detecção de Clostridium chauvoei em tecidos de Cavia porcellus

O objetivo deste trabalho foi padronizar uma técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR), para detecção de Clostridium chauvoei, em tecidos fixados em formol e incluídos em parafina de cobaias (Cavia porcellus) experimentalmente infectadas com esse microrganismo. Os animais foram sacrificados, e amostras do músculo da área de inoculação (MAI), fígado, miocárdio e baço foram disponibilizadas para a técnica de PCR. O clostrídio foi detectado em todas as secções do MAI, fígado e miocárdio, mas não foi observado em secções do baço. Reações cruzadas não foram observadas a partir de secções do MAI dos animais com inoculação de outras espécies de clostrídios, bem como nenhuma amplificação foi observada a partir de secções do MAI dos animais controle. Esses resultados mostram que a técnica de PCR desenvolvida neste estudo, pode ser usada para detecção de Clostridium chauvoei em tecidos fixados em formol e incluídos em parafina

Reação em cadeia da polimerase para detecção de Clostridium chauvoei em tecidos de Cavia porcellus

The objective of this work was the standardization of a polymerase chain reaction (PCR) for detection of Clostridium chauvoei in formalin-fixed, paraffin-embedded tissues of guinea-pigs (Cavia porcellus) infected experimentally with this microorganism. The animals were sacrificed, and samples of muscle from inoculation area (MIA), liver, myocardium and spleen were available for PCR technique. Clostridium chauvoei was detected in all sections of the MIA, liver and myocardium, and no product was observed in sections of the spleen. Cross-reactions were not observed in sections of MIA of the animals inoculated with other clostridia, as well as no amplification was observed in sections of MIA of control animals. These results show that the PCR technique developed in this study may be useful for detection of C. chauvoei in formalin-fixed, paraffin-embedded tissues.O objetivo deste trabalho foi padronizar uma técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR), para detecção de Clostridium chauvoei, em tecidos fixados em formol e incluídos em parafina de cobaias (Cavia porcellus) experimentalmente infectadas com esse microrganismo. Os animais foram sacrificados, e amostras do músculo da área de inoculação (MAI), fígado, miocárdio e baço foram disponibilizadas para a técnica de PCR. O clostrídio foi detectado em todas as secções do MAI, fígado e miocárdio, mas não foi observado em secções do baço. Reações cruzadas não foram observadas a partir de secções do MAI dos animais com inoculação de outras espécies de clostrídios, bem como nenhuma amplificação foi observada a partir de secções do MAI dos animais controle. Esses resultados mostram que a técnica de PCR desenvolvida neste estudo, pode ser usada para detecção de Clostridium chauvoei em tecidos fixados em formol e incluídos em parafina

Genotipicação de Clostridium perfringens isolados de frangos de corte através da PCR múltipla Genotyping Clostridium perfringens broiler chickens isolates by multiplex PCR products analyses

Clostridium perfringens (Cp) é uma bactéria aneróbica gram positiva que, além de provocar gangrena gasosa e enterotoxemia em humanos e animais, constitui-se na principal causa de enterite necrótica em aves de criações intensificadas. A identificação dos isolados foi realizada pela reação de lecitinase em ágar TSC-gema de ovo, colônias com dupla hemólise em ágar sangue desfibrinado de eqüino, coloração de Gram e provas bioquímicas. Das amostras analisadas, 171Cp foram isolados em jejuno e íleo de frangos de corte provenientes de um frigorífico da região de Pará de Minas-MG. Cp foi isolado em 62 (49,6%) de 125 amostras de conteúdo lumenal de jejunos e em 109 (87,2%) de igual número de íleos dos frangos de corte. Utilizando-se a técnica da PCR múltipla para genotipicacão das estirpes de Cp, de acordo com os genes para as toxinas principais e letais (cpa, cpb, etx e iA), da toxina cpb2 (cpb2) e enterotoxina (cpe), as estirpes de Cp isoladas foram classificadas em cinco tipos toxigênicos (A-E). Das 62 estirpes de Cp isoladas do jejuno, foram obtidos 42/62 (67,7%) tipo A, 1/62 (1,6%) tipo A com produto de amplificação para o gene da toxina beta2, 0/62 (0%) tipo B, 17/62 (27,4%) tipo C, 1/62 (1,6%) tipo D. Das 109 amostras de Cp isolados do íleo das aves foram obtidos 62/109 (56,9%) tipo A, 3/109 (2,7%) tipo A com produto de amplificação para o gene da toxina beta2, 1/62 (0,9%) tipo B, 38/109 (34,9%) tipo C, 1/109 (0,9%) tipo D. Cp A (60,8%) e Cp C (32,2%) foram os tipos toxigênicos predominantes em conteúdo intestinal de frango de corte. Cinco (2,9%) das 171 amostras de Cp isolados não foram tipificadas. Não foram detectados os genes codificadores das toxinas iota (iA) e enterotoxina (cpe) em nenhuma das 171 estirpes de Cp caracterizados.Clostridium perfringens (Cp) is an anaerobic gram-positive bacterium which causes gaseous gangrene and enterotoxaemias in humans and domestic animals, besides being the primary cause of necrotic enteritis in poultry. Cp isolates were preliminary identified according to the lecithinase test on agar TSC-egg yolk, colony with double haemolysis in desfibrinated horse blood agar, Gram staining and biochemical tests. Cp isolates (171) were obtained from the intestinal content of broiler chickens sampled in a slaughterhouse in Pará de Minas city, MG, Brazil. Cp was isolated in 62/125 (49.6%) strains from jejunum content and in 109/125 (87.2%) of ileum. Cp strains were classified into five toxigenic types (A-E), using multiplex PCR assay for genotyping of the principal and lethal toxins in the detection of genes coding for toxins alfa, beta, epsilon e iota, nomely genes cpa, cpb, etx e iA genes, beta2 toxin (cpb2) and enterotoxin (cpe). From a total of 62 Cp jejunum isolates obtained 42/62 (67.7%) were type A, 1/62 (1.6%) type A with the amplification of products for beta2 toxin gene (A/B2), 0/62 (0%) type B, 17/62 (27.4%) type C and 1/62 (1.6%) type D. A total of 109 ileum Cp isolates were obtained being 62/109 (56.9%) type A, 3/109 (2.7%) type A/B2 toxin gene, 1/62 (0.9%) type B, 38/109 (34.9%) type C, 1/109 (0.9%) type D. Cp A (60.8%) and Cp C (32.2%) toxigenic types were the most prevalent types in the analyzed intestinal contents of broiler chickens Cp A 104/171 (60.8%) and 55/171 (32.2%) toxigenic types which were the most prevalent types analyzed into two partes of the intestinal content of broiler chickens. Five (2.9%) out of 171 Cp isolates were not typified. The iota toxin (iA) and enterotoxin gene (cpe) codifying genes were not identified

Surto de carbúnculo sintomático em bezerros

Este relato descreve um surto de carbúnculo sintomático em Nova União, Minas Gerais, Brasil, com ênfase no uso de diferentes técnicas laboratoriais. Clostridium chauvoei foi isolado em cultura pura, bem como detectado por uma técnica de imunofluorescência direta (IFD) e por uma técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) a partir de cultura pura obtida do tecido muscular esquelético lesado de um animal necropsiado

Eficácia de vacinas comerciais contra clostridioses frente ao desafio com Clostridium sordellii

Determinou-se a eficácia de doze vacinas contra clostridioses comercializadas no Brasil que contêm em sua composição Clostridium sordellii, pelo método de desafio em cobaias imunizadas. Como referência dos testes, empregou-se uma bacterina monovalente padrão. Duas vacinas (16,6%), codificadas como T6 e T8, apresentaram resultado igual à bacterina padrão, protegendo todos os animais desafiados. Uma vacina (8,3%), codificada como T10, não atendeu aos requisitos mínimos exigidos no primeiro teste, mas após o reteste foi considerada eficiente. As demais vacinas (75%), codificadas como T1, T2, T3, T4, T5, T7, T9, T11 e T12, não foram eficientes