Plasminogen/plasmin influence on platelet aggregation

Aim. Determination of the influence of Glu- and Lys-plasminogen/ plasmin on the platelet aggregation induced by different agonists. Methods. Platelet aggregometry. Spectrophotometry. Results. We have shown the inhibitory effect of Lys-plasminogen on human platelet aggregation. The pro-enzyme action is related to the second wave of aggregation. The inhibitory effect of Lys-plasminogen possesses dosedependent manner in case of thrombin-induced aggregation. The inhibitory effect of pro-enzyme with ristocetin as an inductor has not been observed. Glu-plasminogen and plasmin do not influence on platelet aggregation under studied conditions. A serine protease inhibitor aprotinin does not change the inhibitory effect of Lys-plasminogen. Conclusions. The results proved the inhibitory effect of Lys-plasminogen on thrombin- and collagen-induced platelet aggregation. The absence of inhibitory effect of Lys-plasminogen in the case of ristocetin-induced aggregation leads us to conclusion, that GP Ib/IX is not involved into the inhibited aggregation pathway. The unchanged inhibitory effect of Lys-plasminogen in the presence of aprotinin excludes plasmin participation in the inhibitory phenomenon. Keywords: platelet aggregation, plasminogen, plasmin.Мета. Визначити вплив Глу- і Ліз-форм плазміногену та плазміну на агрегацію тромбоцитів, індуковану різними агоністами. Методи. Агрегатометрія. Спектрофотометрія. Результати. Отримано дані щодо інгібувального впливу Ліз-плазміногену на агрегацію відмитих тромбоцитів людини. Дію проферменту спостерігали на другій хвилі агрегації тромбоцитів. Показано дозозалежний характер його інгібувального ефекту на агрегацію тромбоцитів, стимульованих тромбіном. Ристоміцин-індукована агрегація не пригнічується Ліз-плазміногеном. Глу-плазміноген і плазмін не впливають на функціональні властивості клітин за умов експерименту. Інгібітор серинових протеїназ апротинін не впливає на ефект інгібування агрегації Ліз-плазміногеном. Висновки. Вперше встановлено інгібувальний вплив Ліз-плазміногену на агрегацію тромбоцитів, стимульованих тромбіном і колагеном. Відсутність дії проферменту на агрегацію, індуковану ристоміцином, вказує на те, що Ліз-плазміноген не впливає на ланку агрегації, яка реалізується за участі ГП Іb/IX. Інгібування Ліз-плазміногеном агрегації тромбоцитів за присутності апротиніну робить неможливою участь плазміну в реалізації інгібувального ефекту зимогену. Ключові слова: агрегація відмитих тромбоцитів, плазміноген, плазмін.Цель. Изучить влияние Глу-, Лиз-форм плазминогена и плазмина на агрегацию тромбоцитов, индуцируемую различными агонистами. Методы. Агрегатометрия. Спектрофотометрия. Результаты. Получены данные об ингибирующем влиянии Лиз-плазминогена на агрегацию отмытых тромбоцитов человека. Действие профермента проявлялось во время второй волны агрегации. Показан дозозависимый характер его ингибирования агрегации тромбоцитов, стимулированных тромбином. Ристомицин-индуцированная агрегация не подавляется Лиз-плазминогеном. Глу- плазминоген и плазмин не влияют на функциональные свойства клеток в условиях эксперимента. Ингибитор сериновых протеиназ апротинин не изменяет характера ингибирования агрегации Лиз-плазминогеном. Выводы. Впервые установлен ингибирующий эффект Лиз-плазминогена на агрегацию тромбоцитов, стимулированных тромбином и коллагеном. Отсутствие влияния профермента на ристомицинндуцированную агрегацию указывает на то, что Лиз-плазминоген не действует на путь агрегации, реализуемый при участии ГПІb/IX. Ингибирование Лиз-плазминогеном агрегации тромбоцитов в присутствии апротинина исключает участие плазмина в реализации ингибирующего эффекта. Ключевые слова: агрегация отмытых тромбоцитов, плазминоген, плазмин

Novel aspects of platelet aggregation

The platelet aggregation is an important process, which is critical for the hemostatic plug formation and thrombosis. Recent studies have shown that the platelet aggregation is more complex and dynamic than it was previously thought. There are several mechanisms that can initiate the platelet aggregation and each of them operates under specific conditions in vivo. At the same time, the influence of certain plasma proteins on this process should be considered. This review intends to summarize the recent data concerning the adhesive molecules and their receptors, which provide the platelet aggregation under different conditions

Study of the sites of plasminogen molecule which are responsible for inhibitory effect of Lys-plasminogen on platelet aggregation

Plasminogen/plasmin system is involved in such important processes as thrombosis, inflammation and cancer. plasmin and plasminogen mediate their action through plasminogen-binding proteins on the cell surface. Lys-plasminogen, but not Glu-plasminogen, shows inhibitory effect on platelet aggregation induced by aDp, collagen and thrombin in preparations of both: platelet-rich plasma and washed platelets. We have shown that the kringle domains of Lys-plasminogen mediate interaction of this proenzyme with platelet-surface proteins. the aim of the work is to study the role of certain kringle domains in the inhibitory effect of Lys-plasminogen and to determine possible plasminogen-binding proteins on the platelet surface. all studied plasminogen fragments (k1-3, k4 and k5) abolished the inhibitory effect of Lys-plasminogen on platelet aggregation. We observed that k5 was more effective than k1-3 and k4. Biotin-labeled Lys-plasminogen, Glu-plasminogen and plasminogen fragment K1-3 possessed the highest affinity for actin, whereas the binding of biotin-labeled mini-plasminogen and k4 to actin was negligible. We have suggested that inhibitory effect of Lys-plasminogen is due to the interaction of kringle domains of this proenzyme with membrane-bound proteins which are exposed on the platelet surface during activation and are involved in thrombus formation

Novel aspects of platelet aggregation

The platelet aggregation is an important process, which is critical for the hemostatic plug formation and thrombosis. Recent studies have shown that the platelet aggregation is more complex and dynamic than it was previously thought. There are several mechanisms that can initiate the platelet aggregation and each of them operates under specific conditions in vivo. At the same time, the influence of certain plasma proteins on this process should be considered. This review intends to summarize the recent data concerning the adhesive molecules and their receptors, which provide the platelet aggregation under different conditions.Відомо, що агрегація тромбоцитів – це важливий процес, який лежить в основі утворення гемостатичної пробки та формування тромба. Однак останні дослідження показали, що тромбоцитарна агрегація є значно складнішим і динамічнішим процесом, ніж вважали раніше. Існує декілька механізмів, які ініціюють агрегацію тромбоцитів, і кожен із них реалізується за певних умов in vivo. У той же час необхідно враховувати вплив на цей процес окремих білків плазми крові. Мета даного огляду – узагальнити сучасні дані, присвячені адгезивним молекулам та їхнім рецепторам, які забезпечують тромбоцитарну агрегацію за різних умов.Известно, что агрегация тромбоцитов является важным процессом, лежащим в основе образования гемостатической пробки и формирования тромба. Однако недавние исследования показали, что тромбоцитарная агрегация – это более сложный и динамичный процесс, чем считали ранее. Существует несколько механизмов, инициирующих агрегацию тромбоцитов, и каждый из них реализуется при определенных условиях in vivo. В то же время необходимо учитывать влияние на этот процесс отдельных белков плазмы крови. Цель настоящего обзора – обобщить современные данные, посвященные адгезивным молекулам и их рецепторам, обеспечивающим тромбоцитарную агрегацию в различных условиях

Development and validation of the method for measuring plasminogen activator inhibitor-1 activity in blood plasma

The level of plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) is one of the indicators which reflect the fibrinolytic potential of blood. The increased PAI-1 level during pathological processes such as cardiovascular diseases, tumor, diabetes mellitus and postsurgical complications gives evidence of the hemostatic disbalance and is a prognostic marker of thrombogenesis risk. We have developed the amidolytic method for measuring PAI-1 activity based on the inhibition of plasminogen activation by tissue plasminogen activator with the usage of polymeric bovine desAB-fibrin as a stimulator. The results of carried validation have shown that the proposed method is characterized by high precision, reproducibility and specificity. The method can be used for determination of functionally active form of PAI-1 in human blood plasma.Уровень ингибитора активатора плазминогена 1 типа (РАІ-1) является одним из показателей, которые отражают фибринолитический потенциал крови. Повышение концентрации РАІ-1 при таких патологических состояниях, как сердечнососудистые заболевания, канцерогенез, сахарный диабет, послеоперационные осложнения, свидетельствует о нарушении гемостатического баланса и является прогностическим маркером риска тромбогенеза. Нами разработан амидолитический метод определения активности РАІ-1, основанный на ингибировании реакции активации плазминогена тканевым активатором, с использованием полимерного desАВ-фибрина быка в качестве стимулятора. Результаты валидации свидетельствуют о том, что предложенный метод характеризуется высокой точностью, воспроизводимостью, специфичностью и позволяет определять функционально активную форму РАІ-1 в плазме крови человека