Efecto del consumo de fructosa sobre los niveles plasmáticos de ácido úrico, colesterol y triacilglicéridos en ratas

El consumo de fructosa se ha venido incrementando en los últimos años y se ha recomendado en diabéticos. Sin embargo, también se ha sugerido investigar más a fondo el efecto metabólico de la ingestión aumentada de este monosacárido en la dieta. Así mismo, se ha indicado que suplementos alimenticios como la lecitina podrían tener efectos beneficiosos en el perfil metabólico del individuo. El objetivo de esta investigación consistió en evaluar el efecto que tiene el consumo de fructosa sobre los niveles de colesterol, triacilglicéridos y ácido úrico plasmáticos en ratas de laboratorio en un período de diez semanas, y el cambio que sobre este efecto produce el consumo adicional de lecitina. Se evaluaron dos concentraciones de fructosa adicionadas al agua de beber: 1,78 y 2,05 mg/dL, con o sin la suplementación adicional de 0,0424 mg/dL de lecitina, a diferentes grupos de cinco ratas macho cada uno. Al inicio del experimento, a las cinco y a las diez semanas se realizaron mediciones sanguíneas de los parámetros de interés. Los únicos cambios estadísticamente significativos observados fueron una reducción del colesterol y un aumento del ácido úrico en los animales que consumieron fructosa, así como una reducción en el ácido úrico en los que consumieron fructosa con lecitina

Production of monovalent anti-Bothrops asper antivenom: development oí immune response in horses and neutralizing ability

En el Instituto Clodomiro Picado se produjo un suero monovalente contra el veneno de la serpiente Bothrops asper (terciopelo). Durante las primeras etapas del proceso los caballos inmunizados mostraron un título similar en lo que respecta a la neutralización del veneno; sin embargo, uno de ellos mostró un título muy superior en la última fase de la inmunización. El suero monovalente fue más efectivo que el suero polivalente comercial para neutralizar el veneno de B. asper. Por otra parte, el suero monovalente fue menos efectivo que el polivalente para neutralizar las actividades letal y hemorrágica de los venenos de Lachesis muta (cascabel muda) y Crotalus durissus (cascabel). Más aún, el monovalente no neutralizó la actividad desfibrinante de estos dos venenos. Se propone que el suero monovalente anti-B. asper es altamente efectivo en la neutralización del veneno homólogo, en tanto que su empleo en el tratamiento de envenenamientos por L. muta y C. durissus se justifica sólo cuando el suero polivalente no esté disponible.A monovalent antivenom was produced by immunizing two horses with venom of the pit viper Bothrops asper (Ophidia: VipeIidae). Although development of the immune response against four toxic and enzymatic activities of the venom was similar in both horses during the the two thirds of the immunization schedule, antibody response in one of the horses reached much higher levels in the last part of the immunization. Immunoelectrophoretic analysis indicates that there were precipitating antibodies in the sera of these horses during all the stages of immunization. However, immunoprecipitation did not correlate with the ability of sera to neutralize toxic activities of B. asper venom. Monovalent antivenom was more effective than the commercially available polyvalent antivenom in the neutralization of Bothrops asper venom. On the other hand, despite the fact that it neutralizes lethal and hemorrhagic activities of the venoms of Lachesia muta and Crotalus durissus durissus, it was less effective than polyvalent antivenom in these neutralizations. Moreover, it does not neutralize defibrinating activity induced by these two venoms, whereas it neutralizes this effect in the case of B. asper venom. It is proposed that monovalent antivenom may be highly effective in the case of envenomations induced by Bothrops asper venom; its use in treating accidents by L. muta and C. durissus would be indicated only if polyvalent antivenom is not available. Results also demonstrate that it is important to monitor antibody response individually in horses being immunized for antivenom production, due to the conspicuous variability in the response of different animals

El suero antiofídico polivalente producido en Costa Rica: Estabilidad y capacidad neutralizante

En este trabajo se revisan y discuten una serie de aspectos relativos a la producción, estabilidad y capacidad neutralizante del suero antiofídico polivalente producido por el Instituto Clodomiro Picado. Este suero hiperinmune, en su forma líquida, es estable por 3 años en refrigeración, en tanto que la forma liofilizada es estable por 5 años, sin requerir refrigeración. Los diferentes lotes de suero son uniformes en lo que respecta a su capacidad neutralizante contra las actividades tóxicas de los venenos. La capacidad neutralizante de este suero ha sido investigada mediante dos tipos de experimentos: (a) Aquellos en los que el suero se incuba con el veneno previo a su inoculación en animales de experimentación; y (b) aquellos en los que el suero se administra por la vía intravenosa a diferentes intervalos de tiempo después de la inoculación del veneno. Los resultados obtenidos señalan que el suero es eficiente en la neutralización de los efectos tóxicos y enzimáticos inducidos por las serpientes costarricenses de la familia Viperidae, cuando suero y veneno se incuban previo a su inoculación. Esta neutralización también se ha demostrado contra venenos de serpientes de otros países de Centro y Sudamérica. Por otra parte, cuando e! suero se administra después de inoculado el veneno, los efectos locales (mionecrosis, hemorragia local y edema) son neutralizados sólo parcialmente, en tanto que los efectos letal y desfibrinante se neutralizan con mayor eficacia. Estas observaciones se explican por el hecho de que los efectos locales se desencadenan con una rapidez tal que, cuando se administra el suero, ya se ha iniciado el desarrollo de estas alteraciones locales. Se concluye que el suero polivalente contiene anticuerpos eficaces en la neutralización de las actividades tóxicas y enzimáticas de estos venenos; sin embargo, la neutralización de los efectos locales, en la práctica, se hace difícil, siendo necesaria una rápida administración de un volumen suficiente de suero antiofídico.Universidad de Costa Rica/[741-84-82]/UCR/Costa RicaInternational Foundation for Science/[F/883-1]/IFS/SueciaInternational Foundation for Science/[F/883-2]/IFS/SueciaConsejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas//CONICIT/Costa RicaUCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias de la Salud::Instituto Clodomiro Picado (ICP

Pharmacokinetics of whole IgG equine antivenom: comparison between normal and envenomed rabbits

Pharmacokinetics of antivenoms has been mainly studied in normal animals, whereas very little is known on pharmacokinetics in envenomed animals. The aim of this study was to compare pharmacokinetic parameters of whole IgG equine antivenom in normal rabbits and in rabbits suffering a moderate envenoming by intramuscular injection of the venom of the viperid snake Bothriechis lateralis, which induces drastic microvascular alterations. Anti-Micrurus nigrocinctus antivenom was used, instead of polyvalent (Crotalinae) antivenom, to avoid the formation of toxin–antibody complexes which may alter antivenom pharmacokinetics. It was thus possible to study the effect of vascular alterations, i.e., edema and hemorrhage, induced by the venom on IgG antivenom distribution and elimination. An ELISA was utilized to quantify equine IgG antivenom concentration in rabbit serum. In addition, the amount of IgG antivenom extravasated in injected muscles was also determined. Results indicate that there were no significant differences, between control and envenomed rabbits, in any of the pharmacokinetic parameters investigated, thus suggesting that a moderate envenoming by this viperid species does not alter the pharmacokinetics of IgG antivenom. A significantly higher amount of antivenom IgG was observed in muscle from envenomed rabbits than in muscle from control animals. However, this corresponds to a low percentage of the administered antivenom and, therefore, this increased local extravasation does not have a significant impact in the overall antivenom pharmacokinetics./[02-N-2003]/NeTropica/Estados UnidosUniversidad de Costa Rica/[741-A4-503]/UCR/Costa RicaUCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias de la Salud::Instituto Clodomiro Picado (ICP

Neutralization of four Peruvian Bothrops sp. snake venoms by polyvalent antivenoms produced in Perú and Costa Rica: preclinical assessment

Envenomations after bites inflicted by snakes of the genus Bothrops constitute a public health hazard in Perú, and the intravenous administration of equine-derived antivenoms represents the only scientifically validated treatment. This study presents a preclinical assessment of the efficacy of two whole IgG antivenoms, prepared in Perú and Costa Rica, to neutralize the most relevant toxic effects induced by the venoms of Bothrops atrox, B. brazili, B. barnetti and B. pictus from Perú. Peruvian antivenom is produced by immunizing horses with Bothrops sp. venoms from this country, whereas the production of Costa Rican antivenom involves immunization with venoms from Central American snakes. The neutralization of lethal, hemorrhagic, edema-forming, myotoxic, coagulant and defibrinating activities was evaluated in assays involving incubation of venom and antivenom prior to testing. Both antivenoms were effective in the neutralization of these effects, with quantitative variations in the values of effective dose 50% depending on the effects being studied. Peruvian antivenom was more effective in the neutralization of lethality induced by B. atrox and B. barnetti venoms. However, Peruvian antivenom failed to neutralize coagulant activity of B. barnetti venom and edema-forming activity of B. brazili venom, whereas neutralization was achieved by Costa Rican antivenom. It is concluded that an extensive immunological cross-reactivity exists between Bothrops sp. venoms from Perú and Costa Rica, and that both antivenoms are effective in the neutralization of these four venoms in a rodent model of envenoming.Universidad de Costa Rica/[741-A1-027]/UCR/Costa RicaUCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias de la Salud::Instituto Clodomiro Picado (ICP

Local effects induced by coral snake venoms: Evidence of myonecrosis after experimental inoculations of venoms from five species

The local effects induced by intramuscular inoculations of venons from six species of coral snakes were studied in mice. Venoms of Micrurus nlgrocinctus nigrocinctus, M. n . moquitensis, M. alleni, M. frontalis, M. aarinkauda and M. surinamensis induced prominent myonecrosis which was observed histologically. From a morphological point of view all these venons induced a similar pattern of myonecrosis, characterized by a conspicuous alteration of the intracellular structure . This myotoxic activity was corroborated by an increase in plasma creatine kinase levels 3 hr after i .m . injection of M. n. nlgrocinctus , M. n . mosquitensis, M. frontalis and M. carinicauda venoms. M. mipartitus venom did not induce myonecrosis. None of the venoms induced edema or hemorrhage at the site of injection.Universidad de Costa Rica//UCR/Costa RicaUCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias de la Salud::Instituto Clodomiro Picado (ICP

Comparison between IgG and F(ab′)2 polyvalent antivenoms: neutralization of systemic effects induced by Bothrops asper venom in mice, extravasation to muscle tissue, and potential for induction of adverse reactions

Whole IgG and F(ab′)2 equine-derived polyvalent (Crotalinae) antivenoms, prepared from the same batch of hyperimmune plasma, were compared in terms of neutralization of the lethal and defibrinating activities induced by Bothrops asper venom, their ability to reach the muscle tissue compartment in envenomated mice, and their potential for the induction of adverse reactions. Both preparations were adjusted to the same potency against the lethal effect of B. asper venom in experiments involving preincubation of venom and antivenom. Then, “rescue” experiments were performed, i.e. antivenom was administered either intravenously or intramuscularly at various times after envenomation. IgG and F(ab′)2 antivenoms were equally effective in the neutralization of lethality, both being more effective when administered i.v. than after i.m. injection. Neutralization decreased as the time lapse between envenomation and treatment increased. No significant differences were observed in the ability of antivenoms to neutralize defibrinating activity of B. asper venom in experiments involving independent injection of venom and antivenoms. There was a much higher accumulation of equine antibodies in muscle tissue that had been injected with B. asper venom than in non-envenomated tissue, indicating that venom-induced microvessel damage probably favors a prominent and similar extravasation of both IgG and F(ab′)2 antibodies. This may explain the similar effectiveness of both types of antivenom in previously reported studies on the neutralization of venom-induced local tissue damage. Both IgG and F(ab′)2 antivenoms activate human complement in vitro and induce an anti-equine immunoglobulin response in mice, indicating that Fc removal per se does not eliminate the potential for inducing adverse reactions. However, IgG antivenom had higher anticomplementary activity and induced a stronger anti-immunoglobulin response than F(ab′)2 antivenom.Universidad de Costa Rica/[741-89-057]/UCR/Costa RicaUCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias de la Salud::Instituto Clodomiro Picado (ICP

An alternative in vitro method for testing the potency of the polyvalent antivenom produced in Costa Rica

The ability of several batches of polyvalent antivenom to neutralize indirect hemolytic activity of Bothrops asper venom was studied using a sensitive plate test. All samples of antivenom tested effectively neutralized this activity. A highly significant correlation was observed between neutralization of indirect hemolysis and neutralization of lethal activity. This simple and sensitive in vitro test could be used to monitor antibody levels in horses immunized to produce polyvalent antivenom.UCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias de la Salud::Instituto Clodomiro Picado (ICP

Patogénesis y neutralización de los efectos locales inducidos por el veneno de la serpiente "terciopelo" (Bothrops asper).

Se presenta la revisión de varias investigaciones sobre la patogénesis y neutralización de los efectos locales inducidos por el veneno de la serpiente terciopelo. El cuadro local está constituido por mionecrosis, hemorragia y un proceso inflamatorio, además de otras alteraciones vasculares como angionecrosis y trombosis. La necrosis de fibras musculares se desarrolla después de inocular el veneno. La experimentación se realizó en ratones, los que muestran una alta proporción de fibras necróticas tres horas después del envenenamiento. El efecto hemorrágico es de aparición inmediata, así como el cuadro inflamatorio local y las alteraciones vasculares. Los sueros antiofídicos antivalentes producidos en Costa Rica contienen anticuerpos capaces de neutralizar los efectos locales siempre y cuando el suero y el veneno se incuben antes de la inoculación. Sin embargo, cuando el veneno se administra antes que el suero, los efectos locales solo son neutralizados parcialmente. Esto sugiere que el rápido desencadenamiento de dichos efectos al entrar el veneno a los tejidos, dificulta su neutralización por los sueros antiofídicos. El suero sanguíneo de la serpiente "zopilota" es capaz de neutralizar los efectos locales de la serpiente "terciopelo", cuando se incuba con el veneno antes de la inoculación. No obstante, este suero es tóxico para el ratón por lo que su potencial uso en el tratamiento de las mordeduras de serpientes no es posible en este momento.Universidad de Costa RicaUCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias de la Salud::Instituto Clodomiro Picado (ICP

Geographic and ontogenic variability in the venom of the neotropical rattlesnake Crotalus durissus: Pathophysiological and therapeutic implications

A comparative study was performed on the venoms of adult specimens of the neotropical rattlesnake, Crotalus durissus, from Guatemala, Costa Rica, Venezuela and Brazil, together with the venom of newborn specimens of C. d. durissus from Costa Rica. Venoms from Brazil (C. d. terrificus) and from newborn specimens of C. d. durissus presented an electrophoretic pattern characterized by the predominance of bands with molecular mass of 36 and 15 kDa, whereas those of adult specimens of C. d. durissus from Guatemala and Costa Rica, and C. d. cumanensis from Venezuela, showed a conspicuous band of 62 kDa, and additional bands of 36, 29 and 15 kDa. Moreover, venoms from C. d. terrificus and C. d. cumanensis showed a prominent band of < 10 kDa that probably corresponds to crotamine, since a ‘crotamine-like’ activity was detected in these venoms upon intraperitoneal injection in mice. Venoms of C. d. terrificus, C. d cumanensis and newborn C. d. durissus induced higher lethal and myotoxic effects than those of adult C. d. durissus. In contrast, adult C. d. durissus and C. d. cumanensis venoms induced hemorrhage, whereas venoms of C. d. terrificus and newborn C. d. durissus lacked this effect. All venoms showed coagulant effect in plasma, the highest activity being observed in the venom of newborn C. d. durissus. An anti-crotalic antivenom produced by Instituto Butantan (Brazil), using C. d. terrificus venom as antigen, was effective in the neutralization of lethal, myotoxic and coagulant effects of all venoms studied, being ineffective in the neutralization of hemorrhagic activity of the venoms of C. d. cumanensis and C. d. durissus. On the other hand, a polyvalent antivenom produced by Instituto Clodomiro Picado (Costa Rica), using the venoms of C. d. durissus, Bothrops asper and Lachesis stenophrys as antigens, was able to neutralize lethal, myotoxic, coagulant and hemorrhagic effects of C. d. durissus venom, but was ineffective in the neutralization of lethality and myotoxicity of C. d. terrificus, C. d. cumanensis and newborn C. d. durissus venom. The high toxicity of South American and newborn C. d. durissus venoms is related to the presence of high concentrations of the neurotoxic phospholipase A2 complex ‘crotoxin’. Accordingly, antivenom from Instituto Butantan has a much higher titer of anti-crotoxin antibodies than antivenom from Instituto Clodomiro Picado. Crotalus durissus represents an example of intraspecies variation in venom composition and pharmacology that has relevant pathophysiologic and therapeutic implications.Se efectuó un estudio comparativo de los venenos de especímenes adultos de la serpiente cascabel neotropical, Crotalus durissus, de Guatemala, Costa Rica, Venezuela y Brasil, junto con el veneno de ejemplares recién nacidos de C. d. durissus de Costa Rica. Se observaron drásticas diferencias intraespecíficas, dado que los venenos de Brasil (C. d. terrificus) y los recién nacidos de C. d. durissus presentaron un patrón electroforético caracterizado por bandas predominantes de 36 y 15 kDa, en tanto los venenos de especímenes adultos de C. d. durissus de Costa Rica y Guatemala, así como el de C. d. cumanensis de Venezuela, presentaron bandas predominantes de 62, 36, 29 y 15 kDa. Además, los venenos de C. d. terrificus y C. d. cumanensis presentaron una banda prominente de < 10 kDa, la cual probablemente corresponde a ‘crotamina’, dado que se observó actividad ‘tipo-crotamina’ cuando estos venenos se inyectaron en ratones por la vía intraperitoneal. Los venenos de C. d. terrificus, C. d. cumanensis y recién nacidos de C. d. durissus presentaron actividades letal y miotóxica más fuertes que los de ejemplares adultos de C. d. durissus. Por otra parte, los de adultos de C. d. durissus y C. d. cumanensis indujeron hemorragia, en tanto que este efecto no se observó con los de C. d. terrificus y recién nacidos de C. d. durissus. Todos los venenos mostraron actividad coagulante sobre plasma. El antiveneno anti-crotálico producido en el Instituto Butantan (Brasil), usando veneno de C. d. terrificus como antígeno, fue eficaz en la neutralización de los efectos letal, miotóxico y coagulante de todos los venenos estudiados, aunque fue ineficaz en la neutralización de la actividad hemorrágica de los venenos de C. d. cumanensis y C. d. durissus. Por otra parte, el antiveneno polivalente producido por el Instituto Clodomiro Picado (Costa Rica), utilizando los venenos de Bothrops asper, C. d. durissus y L. stenophrys como antígeno, fue eficaz en la neutralización de los efectos letal, miotóxico, hemorrágico y coagulante del veneno de C. d. durissus, pero fue ineficaz en la neutralización de la letalidad y la miotoxicidad de los venenos de C. d. terrificus, C. d. cumanensis y recién nacidos de C. d. durissus. La alta toxicidad de los venenos de cascabeles sudamericanas y de ejemplares recién nacidos de C. d. durissus se debe al alto contenido de ‘crotoxina’, un complejo bimolecular con actividad fosfolipasa A2 con potentes acciones neurotóxica y miotóxica. En concordancia, el antiveneno brasileño tiene un título de anticuerpos anti-crotoxina mucho mayor que el antiveneno de Costa Rica