Criopreservação e desenvolvimento in vitro de embriões bovinos

O objetivo deste trabalho foi estudar a remoção do crioprotetor, em duas ou três etapas, em embriões bovinos produzidos in vitro após a congelação em vapor de Nirtogênio. Blastocistos expandidos (1329) foram mantidos em co-cultivo (controle) ou criopreservados em 3 protocolos de congelação em vapor de nitrogênio. Os embriões foram equilibrados na solução de 10% de EG por 10 minutos e em 17%, 22% ou 28% de EG por 30 segundos. Após o envase, as palhetas foram mantidas em vapor de nitrogênio por 2 minutos e armazenadas em nitrogênio líquido. Após a descongelação, os crioprotetores foram diluídos em duas etapas, usando 0,3M de sacarose e solução isotônica ou em três etapas usando 0,3M de sacarose + 10% de EG; 0,3M de sacarose e solução isotônica. Os embriões foram co-cultivados com células da granulosa, avaliando as taxas de re-expansão após 24 horas e de eclosão após 24, 48, 72 e 96 horas. Para os grupos congelados no vapor e diluição do crioprotetor em duas etapas, as taxas de eclosão foram de 1,94; 11,88 e 6,06% para EG17, EG22 e EG28, respectivamente. Já para os grupos com diluição do crioprotetor em três etapas, as taxas de eclosão foram de 4,67; 9,90 e 10,78% para EG17, EG22 e EG28, respectivamente.The aim of this study was to evaluate the dilution of cryoprotectant in 2 or steps of bovine in vitro-produced embryos after quick-freezing. A total of 1329 expanded blastocyst were kept in co-culture as control group or cryopreserved by 3 quick-freezing protocols. The embryos were exposed to 10% EG for 10 minutes then to 17%, 22% or 28% for 30 seconds. After loading, the straws were held in nitrogen vapor for 2 minutes and then plunged and stored in liquid nitrogen. After warming, cryoprotectants were diluted in two steps using 0.3 M sucrose and isotonic solution, or three steps using 0.3 M sucrose + 10% EG then 0.3 M sucrose and isotonic solution. Embryos were co-cultured on a granulosa cell monolayer and evaluated after 24 hours for re-expansion and at 24, 48, 72 and 96 hours of co-culture for hatching rates. The in vitro survival rates of embryos cryopreserved by the quick-freezing method and two-step cryoprotectant dilution were 1.94; 11.88 and 6.06%, for EG 17, EG22 and EG28 groups, respectively. At the three step dilution, the in vitro survival rates were 4.67; 9.90 and 10.78% for EG 17, EG22 and EG28 groups, respectively

METASTATIC ESOPHAGOGASTRIC JUNCTION CANCER: CASE REPORT OF A COMPLETE LONG-TERM RESPONSE AFTER COMBINED CHEMORADIOTHERAPY.

This paper presents our experience in the treatment of a patient affected by metastatic esophagogastric junction cancer with a high tumor burden and an incipient visceral crisis. The patient was treated with a combination of induction taxane-based chemotherapy, local radiotherapy and microwave ablation of residual liver metastases. The patient experienced a complete and durable response with long-term survival of more than 3 years, without any relevant acute or late side effects

The Utilization of Imaging Features in the Management of Intraductal Papillary Mucinous Neoplasms

Intraductal papillary mucinous neoplasms (IPMNs) represent a group of cystic pancreatic neoplasms with large range of clinical behaviours, ranging from low-grade dysplasia or borderline lesions to invasive carcinomas. They can be grouped into lesions originating from the main pancreatic duct, main duct IPMNs (MD-IPMNs), and lesions which arise from secondary branches of parenchyma, denominated branch-duct IPMNs (BD-IPMNs). Management of these cystic lesions is essentially based on clinical and radiological features. The latter have been very well described in the last fifteen years, with many studies published in literature showing the main radiological features of IPMNs. Currently, the goal of imaging modalities is to identify “high-risk stigmata” or “worrisome feature” in the evaluation of pancreatic cysts. Marked dilatation of the main duct (>1 cm), large size (3–5 cm), and intramural nodules have been associated with increased risk of degeneration. BD-IPMNs could be observed as microcystic or macrocystic in appearance, with or without communication with main duct. Their imaging features are frequently overlapped with cystic neoplasms. The risk of progression for secondary IPMNs is lower, and subsequently an imaging based follow-up is very often proposed for these lesions

Nascimento de bezzerros clonados produzidos com fibroblastos adultos e fetais

Este trabalho examinou a viabilidade de embriões bovinos obtidos por transferência nuclear. Oócitos foram maturados in vitro por 17 horas e enucleados após a aspiração do primeiro corpúsculo polar e da placa metafásica. Fibroblastos de uma vaca Nelore de 10 anos de idade e de um feto macho de 45 dias coletado em abatedouro foram utilizados como doadores de núcleos. Os oócitos enucleados foram fusionados com fibroblastos de origem adulta e fetal após estímulo elétrico. Após fusão elétrica, as estruturas reconstruídas foram incubadas em TCM199 acrescido de 10%de SFB e suplementado com cicloheximida e citocalasina D por 1 hora e depois mais 4 horas apenas em cicloheximida. Os embriões reconstruídos e ativados foram co-cultivados em TCM199 com células da granulosa por 7-9 dias. Um total de 569 embriões foram reconstruídos com fibroblasto adulto e 668 com fibroblasto fetal. Após a eletrofusão, 181 e 212 embriões oriundos de células adultas e fetais, respectivamente, fundiram e desses 16,6% e 15,1% chegaram ao estágio de blastocisto. Após transferir 21 e 18 blastocistos oriundos de células adultas e fetais, respectivamenet, as taxas de prenhez aos 90 dias foram 19% e 16, 7%. Não houve diferença estatística (p<0,05) entre as taxas de prenhez. Duas gestações originadas de células adultas abortaram ao 4º e 5º mês de gestação. Uma receptora que recebeu embrião de fibroblasto adulto pariu uma bezerra Nelore saudável, pesando 40kg. A outra receptora que recebeu embrião de fibroblasto adulto teve hidroalantóide e acabou parindo uma bezerra morta aos 290 dias. A primeira gestação de células fetais resultou num bezerro macho saudável, pesando 34kg (MELLO et al. 2003). Esses resultados indicaram que fibroblastos adultos e fetais de Nelore podem ser usados como doadores de núcleo, com taxas semelhantes de desenvolvimento in vitro e in vivo

Integrated Intensified Chemoradiation in the Setting of Total Neoadjuvant Therapy (TNT) in Patients with Locally Advanced Rectal Cancer: A Retrospective Single-Arm Study on Feasibility and Efficacy

While surgery is considered the main treatment for early-stage rectal cancer, locally advanced rectal cancer needs to be handled with a multidisciplinary approach. Based on literature data suggesting promising advantages of total neoadjuvant therapy (TNT), we performed a retrospective, single-arm, single-center study on 45 patients affected by histologically and radiologically proven locally advanced rectal cancer, with the aim of analyzing the feasibility and short-term efficacy of an integrated intensified treatment in the setting of TNT. Each analyzed patient performed three cycles of FOLFOX4 or De Gramont induction chemotherapy (iCT), followed by concurrent chemoradiotherapy (CRT) with long course radiotherapy (LCRT) plus concomitant boost and continuous 5-FU infusion, followed by three cycles of FOLFOX4 or De Gramont consolidation chemotherapy (conCT) and then surgery with total mesorectal excision. At a median follow-up of 30 months, this strategy has shown to be feasible and effective in terms of pathological complete response (pCR) and short-term disease-free survival (DFS)