Immunohistochemical approach to study Cylindrospermopsin distribution in tilapia (Oreochromis niloticus) under different exposure conditions

Cylindrospermopsin (CYN) is a cytotoxic cyanotoxin produced by several species of freshwater cyanobacteria (i.e., Aphanizomenon ovalisporum). CYN is a tricyclic alkaloid combined with a guanidine moiety. It is well known that CYN inhibits both protein and glutathione synthesis, and also induces genotoxicity and the alteration of different oxidative stress biomarkers. Although the liver and kidney appear to be the main target organs for this toxin based on previous studies, CYN also affects other organs. In the present study, we studied the distribution of CYN in fish (Oreochromis niloticus) under two different exposure scenarios using immunohistochemical (IHC) techniques. In the first method, fish were exposed acutely by intraperitoneal injection or by gavage to 200 μg pure CYN/Kg body weight (bw), and euthanized after 24 h or five days of exposure. In the second method, fish were exposed by immersion to lyophilized A. ovalisporum CYN-producing cells using two concentration levels (10 or 100 μg/L) for two different exposure times (7 or 14 days). The IHC was carried out in liver, kidney, intestine, and gills of fish. Results demonstrated a similar pattern of CYN distribution in both experimental methods. The organ that presented the most immunopositive results was the liver, followed by the kidney, intestine, and gills. Moreover, the immunolabeling signal intensified with increasing time in both assays, confirming the delayed toxicity of CYN, and also with the increment of the dose, as it is shown in the sub-chronic assay. Thus, IHC is shown to be a valuable technique to study CYN distribution in these organism

Inmunohistoquímica de órganos de peces expuestos a cilindrospermosipina: influencia de la vía y el tiempo de exposición

Ministerio de Educación y Ciencias AGL2009-10026Junta de Andalucía AGR-0467

El virus de la lengua azul como modelo para el estudio de los orbivirus

Al género Orbivirus pertenecen tres virus transmitidos a través de vector, que afectan al ganado domestico y a animales de vida libre (Lengua Azul, Peste Equina Africana y Enfermedad Hemorrágica Epizoótica de los Ciervos), y que han causado en las dos últimas décadas, especialmente el virus de la Lengua Azul (vLA), pérdidas económicas cuantiosas en prácticamente toda Europa y en los países del sur y el este del Mediterráneo. Es importante, por tanto, profundizar en el conocimiento sobre los mecanismos de actuación de estos virus, tomando como base al vLA considerado como el virus modelo para el estudio de este género, y en los mecanismos que modulan la respuesta inmunológica del hospedador para poder mejorar el control de la enfermedad mediante vacunas más eficaces. Hasta el momento se desconocen aspectos tan importantes como la duración de la viremia en animales infectados, el papel de la inmunidad celular desencadenada en el hospedador o los mecanismos de �hibernación� que permitan al vLA �reaparecer� tras un periodo de ausencia del vector. Además, el hecho de que los tres compartan los mismos vectores, hace necesario analizar el riesgo de entrada de los virus de la Peste Equina Africana y de la Enfermedad Hemorrágica Epizoótica de los Ciervos en España, -que actualmente se detectan en los países del África Subsahariana y en el sur y este del Mediterráneo, respectivamente-. Por último, se considera también imprescindible mejorar las técnicas de diagnóstico para el virus de la Enfermedad Hemorrágica Epizoótica de los Ciervos y el virus de la Peste Equina Africana y desarrollar nuevos ensayos basados en las cepas circulantes por el área mediterránea