Biological and physiological characterization of Sclerotinia sclerotiorum populations and evaluation of genetic resistance in soybean cultivars

Made available in DSpace on 2014-07-29T14:52:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Sclerotinia_Riccely - pre textual.pdf: 83822 bytes, checksum: 7f0c226c4852681fb38e300f649a6c93 (MD5) Previous issue date: 2012-06-29The soybean (Glycine max L. Merril) is the main cultivated species on the country, having an average productivity of 3,106 kg.ha-1 in an area of 24.2 million hectares, giving to Brazil the second place in world production. Among the factors that limit the yield, the profitability and the successful production of this legume, diseases are a highlight. Among them, the white mold, caused by Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) of Bary, is gaining importance in the soybean fields on the Brazilian Cerrado . The control of this disease is being considered difficult due to the absence of resistant cultivars, fungus survival in soil during long periods, range of hosts, large number of ascospores produced by apothecium and their fast dissemination on relatively long distances from the source and survival in seeds on mycelial dormant form or sclerotia, contaminating the batches. This work had the aim to study the genetic variability of S. sclerotiorum populations; evaluate the aggressiveness of isolates in soybean culture; evaluate the sensitivity of isolates to fungicides, temperatures and light regime; select an inoculation method of S. sclerotiorum in soybean plants, efficient and practical and; characterize soybean cultivars for reaction to S. sclerotiorum. The experiments were conducted on the Escola de Agronomia e Engenharia de Alimentos da Universidade Federal de Goiás . The collection of isolates was obtained by collecting sclerotia in soybean plants in eight municipalities of the Brazilian Central Region, Silvânia GO, Anápolis GO, São Miguel do Passa Quatro GO, Água Fria GO, Montividiu GO, Chapadão do Sul MS, Uberlândia MG and Patrocínio MG. The tests of mycelial compatibility were performed in MPM (Modified Patterson s Medium) and in PDA (Potato Dextrose Agar) medium, having the mycelial reactions of compatibility and incompatibility evaluated seven days after incubation. Analyzes of mycelial compatibility were performed in each sampled municipality, with a number of 25 isolates, as well as among groups of mycelial compatibility of each municipality, totaling 31 isolates. To evaluation of aggressiveness, 21 isolates representing each group of mycelial compatibility, found in each studied locality, were inoculated by the tip method on the petiole in the cultivars M-SOY 7908 RR and BRSGO 7760 RR. The evaluations of lesion length on stem were made three and seven days after inoculation. The same 21 isolates used on aggressiveness experiments were evaluated for sensibility to fungicides fluopyram, boscalid, thiophanate methyl, carbedanzim, dimoxystrobin + boscalid, procymidone and fluazinam. Those isolates were also evaluated for sensibility on temperatures 10oC, 15oC, 20oC, 25oC and 30oC, in light regime conditions of 12 hours and continuous darkness. For selection of a inoculation method both efficient and practical, four inoculation methods were used in soybean cultivars M-SOY 7908 RR and BRS 7760 RR using only one isolate. The characterization of soybean cultivars regarding reaction to S. sclerotiorum was made by means of an aggressive isolate, selected on aggressiveness experiments, and by the tip method. In this experiment forty cultivars were evaluated in totally randomized design with 3 repetitions. In intrapopulation analysis, was verified that the genetic variability in S. sclerotiorum was low, while in interpopulation analysis, eight compatibility groups were found, one of the groups more aggressive than the other ones. There was significant difference among isolates for the aggressiveness in the two cultivars, being the M-SOY 7908 RR cultivar the most susceptible. The isolates were highly sensible to fungicides boscalid, carbendazim, dimoxystrobin + boscalid, procymidone, fluopyram and fluazinam, only the isolate SSUB 18 was moderately sensible to the fungicide fluopyram. Most of isolates had insensibility to the fungicide thiophanate methyl. The best temperature for mycelial growth of isolates was 25oC, regardless the light regime. The tip method of inoculation in petiole was efficient and practical for characterization of soybean cultivars for their reaction to S. sclerotiorum. There is varietal difference among soybean cultivars for resistance to white mold, being cultivars BRSGO 8460RR, BRSGO Ipameri and P98Y11 the most resistant ones, on the present study conditions.A soja (Glycine max L. Merril) é a principal espécie cultivada no país, tendo produtividade média de 3.106 kg.ha-1 em uma área de 24,2 milhões de hectares, conferindo ao Brasil o segundo lugar na produção mundial. Dentre os fatores que limitam o rendimento, a lucratividade e o sucesso de produção desta leguminosa destacam-se as doenças. Dentre elas, o mofo branco, causado por Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary, tem assumido importância nos campos de cultivo de soja no Cerrado brasileiro. O controle dessa doença tem sido considerado difícil em função da ausência de cultivares resistentes, sobrevivência do fungo no solo por longos períodos, ampla gama de hospedeiros, grande número de ascósporos produzidos por apotécio e sua rápida disseminação a distâncias relativamente longas a partir da fonte produtora e sobrevivência em sementes na forma de micélio dormente ou escleródios contaminando os lotes. Este trabalho teve como objetivo estudar a variabilidade genética de populações de S. sclerotiorum; avaliar a agressividade de isolados em plantas de soja; avaliar a sensibilidade de isolados à fungicidas, temperaturas e regime de luz; selecionar um método de inoculação de S. sclerotiorum em plantas de soja, eficiente e prático e; caracterizar cultivares de soja quanto à reação à S. sclerotiorum. Os experimentos foram conduzidos na Escola de Agronomia e Engenharia de Alimentos da Universidade Federal de Goiás. A coleção de isolados foi obtida por meio de coleta de escleródios em plantas de soja de oito municípios da região Central do Brasil, Silvânia GO, Anápolis GO, São Miguel do Passa Quatro GO, Água Fria GO, Montividiu GO, Chapadão do Sul MS, Uberlândia MG e Patrocínio MG. Os testes de compatibilidade micelial foram realizados em meio de cultura MPM (meio modificado de Patterson s) e meio de cultura BDA (Batata Dextrose Ágar), sendo as reações miceliais de compatibilidade e incompatibilidade avaliadas aos sete dias após a incubação. As análises de compatibilidade micelial foram realizadas dentro de cada município amostrado, com um número de 25 isolados, bem como entre os grupos de compatibilidade micelial de cada município, totalizando 31 isolados. Para avaliação de agressividade, 21 isolados representando cada grupo de compatibilidade micelial, encontrado em cada localidade estudada, foram inoculados pelo método da ponteira no pecíolo nas cultivares M-SOY 7908 RR e BRSGO 7760 RR. As avaliações do comprimento de lesão na haste foram realizadas aos três e sete dias após a inoculação. Os mesmos 21 isolados utilizados nos experimentos de agressividade foram avaliados quanto à sensibilidade aos fungicidas fluopyram, boscalid, tiofanato metílico, carbedazim, dimoxystrobina+boscalid, procimidone e fluazinam. Estes isolados também foram avaliados quanto à sensibilidade as temperaturas de 10oC, 15oC, 20oC, 25oC e 30oC, em condições de fotoperíodo por 12 horas e escuro contínuo. Para seleção de um método de inoculação eficiente e prático, quatro métodos de inoculação foram utilizados nas cultivares de soja M-SOY 7908 RR e BRS 7760 RR, utilizando-se apenas um isolado. A caracterização de cultivares de soja quanto à reação a S. sclerotiorum foi realizada por meio de um isolado agressivo, selecionado nos experimentos de agressividade, e pelo método de inoculação da ponteira. Neste experimento foram avaliadas quarenta cultivares em delineamento inteiramente casualizado com 3 repetições. Em análise intrapopulacional, verificou-se que a variabilidade genética em S. sclerotiorum foi baixa, enquanto que em análise interpopulacional, oito grupos de compatibilidade foram encontrados, sendo um grupo mais predominante do que os demais. Houve diferença significativa entre os isolados quanto à agressividade nas duas cultivares, sendo a cultivar M-SOY 7908 RR a mais suscetível. Os isolados foram altamente sensíveis aos fungicidas boscalid, carbendazim, dimoxystrobina+boscalid, procimidone, fluopyram e fluazinam, somente o isolado SSUB 18 que foi moderamente sensível ao fungicida fluopyram. A maioria dos isolados apresentou insensibilidade ao fungicida tiofanato metílico. A melhor temperatura para o crescimento micelial dos isolados foi 25oC, independentemente do regime de luz. O método de inoculação da ponteira no pecíolo foi eficiente e prático para caracterização de cultivares de soja quanto à reação a S. sclerotiorum. Existe diferença varietal entre as cultivares de soja quanto à resistência ao mofo branco, sendo que as cultivares BRSGO 8460RR, BRSGO Ipameri e P98Y11 foram as mais resistentes, nas condições do presente estudo

Inoculum production, the effect of vegetable extracts and fungicides and soybean genotypes reaction to Sclerotinia sclerotiorum

Stem white rot, caused by S. sclerotiorum, has increased in fields cultivated with soybean due to the cropping of highly susceptible species during winter and the use of seeds contaminated with S. sclerotiorum. Studies involving inoculum production, alternative and chemical control, inoculation methodology and soybean genotypes resistance to Sclerotinia sclerotiorum consisted on the objectives of this work. The experiments were done in the Laboratório de Micologia e Proteção de Plantas LAMIP at the Universidade Federal de Uberlândia. The isolates used were obtained form soybean plants from Jataí-GO and Indianópolis-MG. Culture media amended with cornmeal were the most promising for sclerotium production both for yield and for the number of sclerotia. Culture media containing common beans and sunflower were the best ones. The number of sclerotia and yield decreased as the doses of cornmeal, bulgur wheat and cassava crumbs increased. The concentration of 20% yielded the greatest production of sclerotia for all three amendments. In relation to the alternative control, the results indicate that the greatest inhibition of mycelial growth was directly related to the increase of Azadirachta indica doses. The interaction A. indica with Pongamia glabra was significant, and the dose of 1/3 P. glabra was the most effective, with 65% inhibition. Of all vegetable extracts, the fruit of Piper aduncum was the most effective for reducing mycelial growth, with 43% inhibition. The results of "in vitro" chemical control demonstrated that the fungicides flutriafol, fluazinam, propiconazole, epoxiconazole + piraclostrobin, tebuconazole + trifloxistrobin, tebuconazole, ciproconazole + propiconazole, cyproconazole, fluquinconazole, tetraconazole, procymidone, iprodione, ciproconazole + trifloxistrobin, epoxiconazole, myclobutanil and difenoconazole inhibited more than 98% of the mycelial growth for both isolates. In the in vivo trial differences were noted for the fungicide effect, applied either preventively or as a curative. The fungicide iprodione best controlled the disease for both types of application. The results of inoculation of different soybean growth stages demonstrated that the smallest percentages of disease severity were directly proportional to plant age, and the best stage for inoculating the plants were V2 (leaves and stems) e V3 (leaves). The most consistent inoculation method was the permanent disk, for detached organs and for the whole plant, resulting in a significant correlation. Only 19 soybean genotypes performed as resistant or moderately resistant by the detached leaf method. When whole plants were inoculated, only two of these were moderately resistant, while all others were moderately susceptible or susceptible, generating a non significant correlation. CHAPTER 2: Sclerotia are fundamental for the life cycle of Sclerotinia sclerotiorum because they are the resting structures that form apothecia and, consequently, ascospores, and the hyphae. Studies involving this pathogen require inoculum availability; thus, the objective of this study was to evaluate vegetable growth media and the concentrations of cornmeal, cassava crumbs and bulgur wheat for sclerotium production. The vegetable culture media analyzed were: carrot, cabbage, soybean, cauliflower, common beans, sunflower, snap beans, potato, sweet potato and pumpkin, with or without the amendment of cornmeal. The concentrations of cornmeal, wheat and cassava crumbs amended on the common beans medium were 0, 5, 20, 35, 50, 65, 85 and 100%. The culture media of both tests were moistened with distilled water. The Erlenmeyers flasks containing the media were sterilized at 120ºC, for 20 minutes. Twelve hours after the media had cooled to room temperature, 5 6-mm diameter mycelial plugs were inoculated into each flask. The flasks were incubated at 22 ± 3ºC and 12 hours lighting, for 30 days (vegetable based media) or 45 days (concentrations of cornmeal, wheat and cassava crumbs). The sclerotia were separated from the original media after the incubation period by washing in tap water on a 2 mm screen. The sclerotia were dried on paper towel for 48 hours at room temperature. Subsequently, the weight and number of sclerotia were determined. Culture media yield was determined based on the sclerotia weight. The culture media amended with cornmeal were more effective, regardless of the vegetable used as a base, for both yield and number of sclerotia, and within this group, the media based on common beans and sunflower were the best ones. Sclerotia yield and number decreased as the concentrations of cornmeal, wheat and cassava crumbs increased. The concentration of 20% yielded the greatest production of sclerotia, and cornmeal and wheat were more effective at that. CHAPTER 3: The constant use of pesticides in agriculture has brought an interest for the search of natural products and production systems that cause less impact on man and the environment. Plants present a great diversity of substances in their composition and, oftentimes, these can present fungicide or fungistatic potential, and are being studied for the synthesis of new fungicides as well as for the induction of plant resistance, or, still, to be used directly by the farmer in the form of plant extracts on the crops. Considering that S. sclerotiorum is one of the most important pathogens in soybeans and other crops, this study analyzed the effect of vegetable oils and water extracts on the fungus mycelial growth. Concentrations of 25, 50, 75 and 100 ppm of the active ingredient azadiractine of Azadirachta indica oil were studied in association with the doses of 0, 1/3, 1/6, 1/8 and 1/10 of Pongamia glabra oil. The doses of P. glabra were obtained in relation to the volume of A. indica oil used to obtain the concentrations 25, 50, 75 and 100 ppm of A. indica. The trial with vegetable water extracts used the following plants: Peruvian pepper tree (Schinus molle L.), goatweed (Ageratum conyzoides L.), holy basil (Ocimum spp. L.), absinth wormwood (Artemisia absinthium L.), jamun (Syzygium cumini (L.) Skeels), common rue (Ruta graveolens L.), cassava (Manihot esculenta Crantz), white cedar (Melia azedarach L.) e matico (Piper aduncum L.). The vegetable extracts were incorporated to PDA at the concentration of 30%. The plant parts analyzed were the leaves, with the exception of the pepper, which, besides the leaves, the fruit was also tested. The control treatments were non amended PDA as a negative control and the fungicide procimidone at 10 ppm active ingredient as a positive control. The experimental design was completely randomized, with three repetitions (test of vegetable oils) and 5 repetitions (test of vegetable water extracts). The treatments were added after autoclaving the medium PDA, at low temperature. Subsequent to media solidification 6-mm diameter mycelial disks were inoculated on the center of the Petri plates and incubated at 22 ± 3ºC and 12 hours lighting for 48 hours. Evaluations started 24 hours after inoculation and lasted for 48 hours, when the negative control treatment had taken the whole plate surface. Mycelial growth inhibition percentage was calculated. The results indicated that greater mycelial growth inhibition was directly proportional to increasing concentration of A. indica and P. glabra. The interaction between A. indica and P. glabra was significant and the dose of 1/3 P. glabra was the most effective, with 65% inhibition. No dosage inhibited 100% of the mycelial growth as the fungicide. The water extract of the fruit of Piper aduncum was the most promising for the reduction of mycelial growth, with 43% inhibition. CHAPTER 4: Chemical control of soybean stem white rot is done based on previous studies about white rot on common beans. This study evaluated fungicides of different chemical groups on S. sclerotiorum in vitro , selecting them for in vivo trials. The fungicides flutriafol, fluazinam, propiconazole, epoxiconazole + piraclostrobin, tebuconazole + trifloxistrobin, tebuconazole, cyproconazole + propiconazole, cyproconazole, fluquinconazole, tetraconazole, procymidone, iprodione, cyproconazole + trifloxistrobin, epoxiconazole, vinclozolin, prothioconazole, azoxistrobin + cyproconazole, chlorothalonil + thiophanate-methyl, flutriafol + thiophanate-methyl, myclobutanil, difenoconazole, carbendazim, benomyl, carboxin + thiram, methyl thiophanate, quintozene, pencycuron, chlorothalonil and azoxistrobin were evaluated for controlling mycelial growth of two S. sclerotiorum isolates, from Jataí-GO and Indianópolis-MG, in a completely randomized design, with three repetitions. After the media containing 100 ppm active ingridient solidified, 6-mm diameter mycelial plugs were inoculated in the center of the Petri plates. The plates were incubated at 22 ± 3ºC and 12 hours lighting. Growth evaluations started 24 hours after inoculation and lasted for 48 hours for the isolate from Jataí and 72 for the one from Indianópolis. Mycelial growth percent inhibition was calculated. The in vivo trial was done only with the isolate from Jataí with inoculation on cultivar FMT Tabarana at the stage V3. The fungicides used in preventive and curative applications were fluazinam, epoxiconazole + piraclostrobin, tebuconazole + trifloxistrobin, tebuconazole, cyproconazole + propiconazole, procymidone, iprodione, vinclozolin, prothioconazole, azoxistrobin + cyproconazole and thiophanate methyl. The experimental design was completely randomized, with 4 repetitions. Evaluations were done 72 hours after inoculation at 22 ± 3ºC and 12 hours lighting, using a diagrammatic scale made with the program Quant. In vitro results demonstrated that the fungicides flutriafol, fluazinam, propiconazole, epoxiconazole + piraclostrobin, tebuconazole + trifloxistrobin, tebuconazole, cyproconazole + propiconazole, cyproconazole, fluquinconazole, tetraconazole, procymidone, iprodione, cyproconazole + trifloxistrobin, epoxiconazole, vinclozolin, prothioconazole, azoxistrobin + cyproconazole, chlorothalonil + thiophanate methyl, flutriafol + thiophanate methyl, myclobutanil and difenoconazole inhibited more than 98% of the mycelial growth of both isolates. There were significant differences on the fungicide effects in the in vivo trial, applied both preventively and curatively. The fungicide iprodione had the best performance on disease control for both modes of action. CHAPTER 5: The reaction of soybean genotypes to Sclerotinia sclerotiorum, as well as the phenological stages and inoculation methods for the selection of genotypes resistant to stem white rot has not been well determined. Therefore, this study determined the best phonological stage and inoculation method for S. sclerotiroum in soybean genotypes and studied partial resistance to stem white rot. The phenological stages analyzed for inoculation were Vc, V2, V3, V4 and R1 of cultivars MG/BR-46 (Conquista) and M-Soy 8200. The inoculation methods tested were a permanent PDA mycelial plug, which remained on the plant until evaluation, a plug for 24 hours, and a touch plug, which was placed on the leaf and immediately removed. Inoculations were done both on detached leaves and stems, as well as on intact plants of both cultivars. Soybean genotype resistance reaction was analyzed on 90 soybean genotypes inoculated with a permanent PDA plug on detached leaves placed on gerboxes. The genotypes that were resistant or moderately resistant were re-evaluated with inoculations on the whole plants. Evaluations were done 72 hours after incubation at 22 ± 3ºC and 12 hours lighting, based on a diagrammatic scale prepared with the program Quant. The experimental design was completely randomized, with 3 repetitions. The results indicated that the smallest disease severity was directly proportional to plant age, and the ideal stage for inoculation were V2 (leaves and stems) e V3 (leaves). The permanent mycelial plug was the best inoculation method for S. sclerotiorum for both soybean cultivars, and detached organs as well as the whole plant, in a significant correlation. Only 19 soybean genotypes performed as resistant to moderately resistant by the detached leaf inoculation test. However, when these genotypes were tested as intact plants, only 2 were moderately resistant, while all others were moderately susceptible to susceptible. In this case, the correlation was not significant, possibly due to the number of genotypes used (only two susceptible), for the evaluation of inoculation methods, and 19 with a different reaction for resistance evaluation.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e TecnológicoMestre em AgronomiaA podridão branca da haste causada por S. sclerotiorum vem aumentando em campos de cultivo de soja, devido ao cultivo de espécies altamente suscetíveis na safrinha e a utilização de sementes contaminadas por S. sclerotiorum. Estudos envolvendo produção de inóculo, controle alternativo e químico, metodologia de inoculação e resistência de genótipos de soja à Sclerotinia sclerotiorum constituíram os objetivos deste trabalho. Os experimentos foram conduzidos no Laboratório de Micologia e Proteção de Plantas LAMIP da Universidade Federal de Uberlândia. Os isolados utilizados foram obtidos de plantas de soja provenientes de Jataí-GO e Indianópolis-MG. Quanto à produção de escleródios, os resultados demonstraram que meios de cultura combinados com fubá foram mais promissores, tanto no rendimento, quanto no número de escleródios. Os meios de cultura feijão e girassol foram os mais promissores. Quanto às doses de fubá de milho, trigo para kibe e farinha de mandioca, o rendimento e número de escleródios decresceram com o aumento das concentrações. A concentração de 20% proporcionou maior produção de escleródios para os três complementos. Em relação ao controle alternativo, os resultados demonstraram que a maior inibição do crescimento micelial está diretamente proporcional ao aumento das doses de Azadirachta indica. A interação A. indica e Pongamia glabra foi significativa, sendo a dosagem de 1/3 de P. glabra a mais eficiente, com 65% de inibição. Quanto aos extratos vegetais, o fruto de Piper aduncum foi o mais promissor sobre a redução do crescimento micelial, com 43% de inibição. Os resultados referentes ao controle químico "in vitro" demonstraram que os fungicidas flutriafol, fluazinam, propiconazol, epoxiconazol + piraclostrobina, tebuconazol + trifloxistrobina, tebuconazol, ciproconazol + propiconazol, ciproconazol, fluquinconazol, tetraconazol, procymidone, iprodione, ciproconazol + trifloxistrobina, epoxiconazol, miclobutanil e difenoconazol inibiram o crescimento acima de 98% para os dois isolados. Quanto ao ensaio in vivo , houve diferença no efeito dos fungicidas, quando aplicados preventivamente e curativamente. O fungicida iprodione controlou melhor a doença, tanto em aplicações preventivas, como curativas. Quanto às inoculações em diferentes estádios de desenvolvimento de plantas de soja, os resultados demonstraram que as menores porcentagens de severidade da doença foram diretamente proporcionais à idade das plantas, determinando-se como estádios ideais de inoculação os estádios V2 (folhas e hastes) e V3 (folhas). Em relação aos métodos de inoculações, o disco permanente proporcionou resultados mais consistentes, seja em órgãos destacados como na própria planta, resultando em correlação significativa. Quanto à seleção de genótipos de soja, apenas 19 genótipos se comportaram como resistentes e moderadamente resistentes pelo método de inoculação na folha destacada. Em inoculações na planta, apenas 2 genótipos destes 19 foram moderadamente resistentes e os demais moderadamente suscetível a suscetível, gerando correlação não significativa. CAPÍTULO 2: Considerando a biologia de Sclerotinia sclerotiorum, os escleródios são fundamentais em seu ciclo de vida, pois são precursores dos apotécios e conseqüentemente dos ascosporos e produção de hifas. Estudos envolvendo o patógeno exigem a disponibilidade de inóculo. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar meios de cultura à base de vegetais e concentrações de fubá de milho, farinha de mandioca e trigo para kibe sobre a produção de escleródios. Os meios de cultura à base de vegetais estudados foram: cenoura, repolho, soja, couve-flor, feijão, tomate, girassol, vagem, batata, batata-doce e abóbora, com e sem adição de fubá de milho. Em relação ao ensaio de concentrações de fubá de milho, trigo e farinha de mandioca, as concentrações estudadas foram: 0, 5, 20, 35, 50, 65, 85 e 100% em adição ao substrato feijão. Os meios de cultura estudados nos dois ensaios foram umedecidos com água destilada. Os Erlenmeyers contendo os meios de cultura foram esterilizados a 120ºC, por 20 minutos. Após 12 horas de resfriamento dos meios de cultura, 5 discos de micélio de 6 mm de diâmetro foram inoculados em cada frasco de erlenmeyer. Os frascos foram incubados a 22 ± 3ºC e fotoperíodo de 12 horas, durante 30 dias consecutivos (meios de cultura à base de vegetais) e 45 dias (concentrações de fubá de milho, trigo e farinha de mandioca). Decorrido o período de incubação, os escleródios foram separados do meio original através de lavagem em água corrente sobre malha de 2 mm. Os escleródios foram secos sobre papel toalha, por 48 horas, a temperatura ambiente. Em seguida, determinou-se o peso e o número de escleródios. Com base no peso dos escleródios, determinou-se o rendimento para cada meio de cultura estudado. Pelos resultados obtidos, verificou-se que meios combinados com fubá de milho foram mais promissores, independente do vegetal utilizado, tanto no rendimento, quanto no número de escleródios, sendo que os melhores foram os meios de cultura a base de feijão e girassol. Quanto às concentrações de fubá de milho, trigo e farinha de mandioca, o rendimento e número de escleródios decresceram com o aumento das concentrações. A concentração de 20% proporcionou maior produção de escleródios, sendo fubá de milho e trigo os mais promissores. CAPÍTULO 3: O uso constante de defensivos agrícolas na agricultura tem despertado a busca por produtos naturais e sistemas de produção que causem menos impacto ao homem e ao meio ambiente. As plantas, por apresentarem uma diversidade de substâncias em sua composição, muitas vezes com potencial fungicida ou fungistático, vêm sendo estudadas para síntese de novos fungicidas no futuro como também na indução de resistência as plantas, ou ainda, serem utilizadas diretamente pelo produtor com a aplicação do extrato da planta cultivada. Considerando a importância do patógeno S. sclerotiorum para cultura da soja e demais culturas, este trabalho teve como objetivo estudar o efeito de óleo e extratos vegetais sobre o crescimento micelial do fungo. Concentrações de 25, 50, 75 e 100 ppm do ingrediente ativo azadiractina do óleo de Azadirachta indica foram estudadas em associação as doses de 0, 1/3, 1/6, 1/8 e 1/10 do óleo de Pongamia glabra. As doses de P. glabra foram obtidas sobre o volume do óleo de A. indica utilizado para obter as concentrações de 25, 50, 75 e 100 ppm de A. indica. No ensaio de extratos vegetais, as plantas estudadas foram: aroeirinha (Schinus molle L.), mentrasto (Ageratum conyzoides L.), alfafaca (Ocimum spp. L.), losna (Artemisia absinthium L.), jambolão (Syzygium cumini (L.) Skeels), arruda (Ruta graveolens L.), mandioca (Manihot esculenta Crantz), Santa Bárbara (Melia azedarach L.) e pimenta longa (Piper aduncum L.) Os extratos vegetais foram incorporados ao meio BDA na concentração de 30%. As partes botânicas estudadas foram as folhas, com exceção de pimenta longa que, além da folha, estudou-se o fruto. Para os dois ensaios, o tratamento testemunha foi utilizado como controle negativo e o fungicida procimidone a 10 ppm do ingrediente ativo como controle positivo. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado com 3 repetições (ensaio óleos vegetais) e 5 repetições (ensaio extratos vegetais). Os tratamentos foram adicionados após a autoclavagem do meio BDA, com a temperatura baixa. Após a solidificação do meio, discos de micélio de 6 mm de diâmetro foram depositados no centro das placas de Petri, e estas foram incubadas a temperatura de 22 ± 3ºC e fotoperíodo de 12 horas por 48 horas. As avaliações foram iniciadas 24 horas após a incubação, perdurando até 48 horas após, momento em que as colônias fúngicas do tratamento testemunha atingiram toda a superfície do meio. Através dos dados, calculou-se a porcentagem de inibição do crescimento micelial. Os resultados demonstraram que a maior inibição do crescimento micelial foi diretamente proporcional ao aumento das concentrações de A. indica e P. glabra. A interação entre A. indica e P. glabra foi significativa, sendo a dosagem de 1/3 de P. glabra a mais eficiente com 65% de inibição. Nenhuma dosagem inibiu o crescimento em 100% igual ao fungicida procimidone. Quanto aos extratos vegetais, o fruto de Piper aduncum foi o mais promissor sobre a redução do crescimento micelial, com 43% de inibição. CAPÍTULO 4: O controle químico da podridão branca da haste da soja vem sendo realizado com base em estudos já realizados sobre o mofo branco na cultura do feijoeiro. O objetivo deste trabalho foi avaliar fungicidas de diferentes grupos químicos sobre S. sclerotiorum in vitro selecionando-os para ensaios in vivo . Os fungicidas flutriafol, fluazinam, propiconazol, epoxiconazol + piraclostrobina, tebuconazol + trifloxistrobina, tebuconazol, ciproconazol + pro

Inoculation methods of Sclerotinia sclerotiorum for screening of soybean cultivars resistant to white mold

Submitted by Luciana Ferreira ([email protected]) on 2018-05-14T11:54:31Z No. of bitstreams: 2 Artigo - Riccely Ávila Garcia - 2015.pdf: 406290 bytes, checksum: 914eaec29a8b7e6f01c69e922c214417 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)Approved for entry into archive by Luciana Ferreira ([email protected]) on 2018-05-15T12:34:41Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Artigo - Riccely Ávila Garcia - 2015.pdf: 406290 bytes, checksum: 914eaec29a8b7e6f01c69e922c214417 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)Made available in DSpace on 2018-05-15T12:34:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Artigo - Riccely Ávila Garcia - 2015.pdf: 406290 bytes, checksum: 914eaec29a8b7e6f01c69e922c214417 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-08O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência e a praticidade de métodos de inoculação de Sclerotinia sclerotiorum, para uso na seleção de cultivares de soja resistentes ao mofo-branco. Avaliaram-se quatro métodos de inoculação, em plantas no estádio fenológico V3/V4. Aos três e sete dias após a inoculação, mediu-se o comprimento da lesão na haste das plantas. As cultivares de soja BRS 8460RR, BRSGO Ipameri e P98Y11 apresentaram as menores lesões. O método de inoculação por meio de ponteira no pecíolo é o mais eficiente e mais prático para avaliar a resistência ao mofo‐branco em soja.The objective of this work was to evaluate the efficacy and usefulness of methods of Sclerotinia sclerotiorum inoculation for screening soybean cultivars resistant to white mold. Four inoculation methods were evaluated in plants at the V3/V4 phenological stages. Stem lesion length was measured three and seven days after inoculation. The soybean cultivars BRS 8460RR, BRSGO Ipameri, and P98Y11 had the smallest stem lesions. The inoculation method with pipette tip on the petiole is the most effective and practical to evaluate soybean resistance to white mold

DIAGRAMMATIC SCALE TO EVALUATE TARGET SPOT SEVERITY IN CUCUMBER PLANT LEAVES ESCALA DIAGRAMÁTICA PARA AVALIAÇÃO DA SEVERIDADE DA MANCHA ALVO EM FOLHAS DE PEPINEIRO

<p style="margin-bottom: 0cm; font-style: normal; font-weight: normal; line-height: 120%; text-decoration: none;" lang="pt-BR"><span style="color: #000000;"><span style="font-family: Times New Roman,serif;"><span style="font-size: small;"><span style="color: #000000;"><span style="text-decoration: none;"><span style="font-family: Times New Roman,serif;"><span lang="pt-BR"><span style="font-style: normal;"><span style="font-weight: normal;">The lack of a diagrammatic scale to evaluate the cucumber target spot, caused by </span></span></span></span></span></span><span style="color: #000000;"><span style="text-decoration: none;"><span style="font-family: Times New Roman,serif;"><span lang="pt-BR"><em><span style="font-weight: normal;">Corynespora cassiicola</span></em></span></span></span></span><span style="color: #000000;"><span style="text-decoration: none;"><span style="font-family: Times New Roman,serif;"><span lang="pt-BR"><span style="font-style: normal;"><span style="font-weight: normal;">, led to the development of an assessment system for a faster and more reliable way to quantify this disease. So, a diagrammatic scale was elaborated considering the maximum and minimum severity limits of the disease observed in the field. The intermediate values followed logarithmic increments for the target spot symptoms (0.3%, 0.8%, 2%, 5%, 11.5%, 25%, and 46%). For validating the scale, eight raters quantified the disease severity on fifty leaves infected with different levels of the disease. Initially, the severity estimation was carried out without the aid of the scale. Then, the same raters used it to estimate the severity on the same leaves previously assessed. Assessments with the aid of the diagrammatic scale were more precise and accurate, according to most of the raters. The proposed diagrammatic scale was considered adequate to estimate the target spot severity in cucumber leaves, and it can be used in epidemiologic studies and in evaluation strategies for controlling this disease.</span></span></span></span></span></span></span></span></span></p><p style="margin-bottom: 0cm; font-style: normal; font-weight: normal; line-height: 120%; text-decoration: none;" lang="pt-BR"><span style="color: #000000;"><span style="font-family: Times New Roman,serif;"><span style="font-size: small;"><span style="color: #000000;"><span style="text-decoration: none;"><span style="font-family: Times New Roman,serif;"><span lang="pt-BR"><span style="font-style: normal;"><span style="font-weight: normal;">Devido à ausência de escala diagramática para a mancha alvo do pepineiro, causada por </span></span></span></span></span></span><span style="color: #000000;"><span style="text-decoration: none;"><span style="font-family: Times New Roman,serif;"><span lang="pt-BR"><em><span style="font-weight: normal;">Corynespora cassiicola</span></em></span></span></span></span><span style="color: #000000;"><span style="text-decoration: none;"><span style="font-family: Times New Roman,serif;"><span lang="pt-BR"><span style="font-style: normal;"><span style="font-weight: normal;">, verificou-se a necessidade de um sistema de quantificação da doença, que proporcionasse maior rapidez e precisão na obtenção dos resultados. Para tanto, uma escala</span></span></span></span></span></span><span style="color: #ff0000;"><span style="text-decoration: none;"><span style="font-family: Times New Roman,serif;"><span lang="pt-BR"><span style="font-style: normal;"><span style="font-weight: normal;"> </span></span></span></span></span></span><span style="color: #000000;"><span style="text-decoration: none;"><span style="font-family: Times New Roman,serif;"><span lang="pt-BR"><span style="font-style: normal;"><span style="font-weight: normal;">diagramática foi elaborada, considerando-se o limite máximo e mínimo de severidade da doença observados no campo. Os valores intermediários da escala seguiram incrementos logarítmicos para os sintomas da mancha alvo (0,3%; 0,8%; 2%; 5%; 11,5%; 25%; e 46%). Para a validação da escala, oito avaliadores quantificaram a severidade da doença, em cinquenta folhas com diferentes níveis de doença. Inicialmente, a estimativa da severidade foi feita sem auxílio da escala. A seguir, os mesmos avaliadores, utilizando a escala diagramática proposta, estimaram a severidade nas mesmas folhas avaliadas anteriormente. As avaliações com a escala diagramática foram mais precisas e acuradas, nas estimativas da maioria dos avaliadores. A escala diagramática proposta foi considerada adequada para estimar a severidade da mancha alvo, em folhas de pepineiro, e poderá ser utilizada em estudos epidemiológicos e de avaliação de estratégias de controle desta doença.</span></span></span></span></span></span></span></span></span></p&gt