Modificación de la respuesta de ratones macho con trasplante tumoral subcutáneo a la orina de hembras en celo

La variabilidad comportamental y los comportamientos “de lujo” sugieren que las necesidades básicas de los animales se encuentran satisfechas y, por lo tanto, sirven como indicadores de bienestar animal. La eficiencia reproductiva es un indicador clásico, en el que su disminución demuestra que dichas necesidades se encuentran insatisfechas. Sin embargo, falla en demostrar alteraciones leves en la homeostasis del individuo con el medio ambiente. En este sentido, la motivación para iniciar un comportamiento que no es esencial podría ser un indicador más sensible de una reducción del bienestar. En el presente trabajo evaluamos el interés de ratones macho nude (stock N:NIH(S)- Fox1nu) con un trasplante tumoral subcutáneo por la orina de hembras en celo, en un paradigma denominado “Female urine seeking test (FUST)”.Facultad de Ciencias Veterinaria

Mouse breeding facilities in Argentina: Current state, challenges, and strengths in relation to animal welfare

The science and technology of laboratory animals has come a long way worldwide, but for reasons related to the development of the countries, this journey started later in some Latin American countries, as is the case of Argentina. Without a specific legal framework to conduct animal experimentation, local strengths to promote animal welfare are based on professionals specifically trained in the care of laboratory animals as well as an extended network of ethics committees that ensures compliance with the ethical principles applied to animal experimentation. Nevertheless, there are no updated reports showing welfare indicators in rodent facilities. Therefore, we conducted a survey on mice breeding facilities enrolled in a national record elaborated by the National Ministry of Science. Questions related to four of the Five Domains Model of Mellor, concerning (1) nutrition, (2) physical environment, (3) health, and (4) behavioral interactions with the environment, other animals, and humans, were included as well as information concerning general aspects of the establishments. Data obtained from 25 mice breeder facilities localized all over the country were summarized, providing for the first time a clear picture of the national situation about the welfare of laboratory mice in these establishments. This data will be essential to design future policy as well as for deciding priorities aiming to improve the welfare of mice bred in Argentinian facilities.Fil: Resasco, Agustina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Laboratorio de Animales de Experimentación; ArgentinaFil: Diaz, Silvina Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentin

Modificación de la respuesta de ratones macho con trasplante tumoral subcutáneo a la orina de hembras en celo

La variabilidad comportamental y los comportamientos “de lujo” sugieren que las necesidades básicas de los animales se encuentran satisfechas y, por lo tanto, sirven como indicadores de bienestar animal. La eficiencia reproductiva es un indicador clásico, en el que su disminución demuestra que dichas necesidades se encuentran insatisfechas. Sin embargo, falla en demostrar alteraciones leves en la homeostasis del individuo con el medio ambiente. En este sentido, la motivación para iniciar un comportamiento que no es esencial podría ser un indicador más sensible de una reducción del bienestar. En el presente trabajo evaluamos el interés de ratones macho nude (stock N:NIH(S)- Fox1nu) con un trasplante tumoral subcutáneo por la orina de hembras en celo, en un paradigma denominado “Female urine seeking test (FUST)”.Facultad de Ciencias Veterinaria

Impacto del desarrollo de la línea tumoral A549 en el bienestar de ratones de la cepa N:NIH(s)-Fox1nu

Las Ciencias del Bienestar Animal y de los Animales de Laboratorio se asocian ineludiblemente, para evaluar científicamente cómo los procedimientos experimentales y las condiciones de alojamiento impactan sobre la calidad de vida de los animales. En particular en investigación oncológica, se han redactado guías de recomendaciones pero éstas fallan en describir cómo se pueden discernir alteraciones sutiles en el bienestar. De esta forma, el objetivo principal consistió en determinar el impacto de la línea tumoral humana A549 en el bienestar de ratones del stock NLAE:NIH(S)-Fox1nu trasplantados con la misma y en evaluar el efecto del enriquecimiento ambiental sobre el desarrollo tumoral. Para alcanzarlo se evaluó por un lado la fisiología de los ratones a través de la concentración de los metabolitos de la corticosterona en materia fecal, de cambios en la condición corporal y del análisis de parámetros sanguíneos y por el otro las frecuencias de comportamientos espontáneos que realizaron en la caja donde habitaban normalmente y la performance en distintas pruebas de comportamiento. Además, para poder alcanzar dichos objetivos se desarrollaron dos nuevas metodologías: una técnica de medición de los tumores subcutáneos no aversiva y una prueba para para evaluar el sesgo en el juicio ante un estímulo ambiguo. En líneas generales, no se evidenciaron alteraciones significativas en los parámetros de fisiología y de comportamiento que indicarían una alteración severa en el bienestar de los ratones. Sin embargo, sí se manifestaron algunas modificaciones sutiles que convalidan la interpretación de que el trasplante tumoral no es un procedimiento inocuo para estos animales. Con respecto al enriquecimiento ambiental, resultó llamativa la diferencia en el desarrollo tumoral entre machos y hembras por lo que se postuló que la inhibición del desarrollo tumoral se debió al estrés asociado al aumento de los comportamientos agonistas en la caja como consecuencia del enriquecimiento ambiental y no por dicha modificación ambiental.Animal Welfare and Laboratory Animal Sciences are inevitably associated, to assess scientifically how experimental procedures and husbandry affect the animals’ quality of life. Guidelines for oncologic research have been written, but these generally fail to describe subtle changes in welfare. Hence, the main objective was to assess the impact of tumor development in the welfare of NLAE:NIH(S)-Fox1nu mice transplanted with A549 cells and to evaluate the effect of environmental enrichment in tumor development. The physiology was assessed through the quantification of corticosterone metabolites in feces, body condition scoring and blood parameters and the behavior by means of behavioral tests as well as analyzing the frequency of home cage behaviors. In addition, to meet the objectives two new methodologies were described: a non-aversive photographic measurement method for subcutaneous tumors and an assay to assess judgment bias when exposed to an ambiguous stimulus. Altogether, severe alterations in the physiology and the behavior which would indicate a reduction in the animals’ welfare were not detected. Nevertheless, subtle behavioral modifications were observed by which it was assumed that tumor development did generate a subtle malaise sensation to the animals. With regards to environmental enrichment, an interesting difference in tumor development between males and females was observed, and it was hypothesized that this difference was due to stress associated to an increase of agonistic behaviors in the home cage as a consequence of environmental enrichment.Fil: Resasco, Agustina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Laboratorio de Animales de Experimentación; Argentin

Modificación de la respuesta de ratones macho con trasplante tumoral subcutáneo a la orina de hembras en celo

La variabilidad comportamental y los comportamientos “de lujo” sugieren que las necesidades básicas de los animales se encuentran satisfechas y, por lo tanto, sirven como indicadores de bienestar animal. La eficiencia reproductiva es un indicador clásico, en el que su disminución demuestra que dichas necesidades se encuentran insatisfechas. Sin embargo, falla en demostrar alteraciones leves en la homeostasis del individuo con el medio ambiente. En este sentido, la motivación para iniciar un comportamiento que no es esencial podría ser un indicador más sensible de una reducción del bienestar. En el presente trabajo evaluamos el interés de ratones macho nude (stock N:NIH(S)- Fox1nu) con un trasplante tumoral subcutáneo por la orina de hembras en celo, en un paradigma denominado “Female urine seeking test (FUST)”.Facultad de Ciencias Veterinaria

Valoración del bienestar animal en ratones inmunodeficientes con un trasplante tumoral evaluando la calidad del nido

A la sociedad le preocupa cada vez m ás la forma en que se utilizan los animales y cómo este uso afecta su bienestar. Los factores que modifican el bienestar de ratones de laboratorio aún no se conocen en su totalidad ya que los indicios de una disminución del mismo pueden ser sutiles (Jirkof, 2014). Cuando estimamos el bienestar animal, el comportamiento es importante porque nos brinda información acerca del estado interno de un animal de forma no invasiva (Broom, 2010; Jirkof, 2014). La evaluación de los comportamientos que ocurren dentro de la caja en que se mantienen los animales son de particular interés ya que al producirse un mínimo estrés se disminuyen efectos indeseados. Los comportamientos complejos y altamente motivados se están utilizando cada vez más como indicadores en la valoración del dolor, sufrimiento y distress debido a que son los primeros en disminuir en situaciones subóptimas (Boissy et al., 2007). Además, su ausencia podría indicarnos una disminución del bienestar, principalmente debido a una disminución en la motivación para realizarlos (Jirkof, 2014). Uno de estos comportamientos es la construcción del nido (“nesting”), ya que los ratones lo realizan vigorosamente cuando se les suministra material para este fin (Gaskill et al, 2103). El objetivo de este trabajo es evaluar si el desarrollo tumoral en ratones inmunodeficientes modifica la performance de la construcción de nidos, para definir si puede ser utilizado como indicador de bienestar animal.Facultad de Ciencias Veterinaria

Differential Hippocampal Expression of BDNF Isoforms and Their Receptors Under Diverse Configurations of the Serotonergic System in a Mice Model of Increased Neuronal Survival

Neurotrophic factors are relevant regulators of the neurogenic process at different levels. In particular, the brain-derived neurotrophic factor, BDNF, is highly expressed in the hippocampus (HC) of rodents and participates in the control of neuronal proliferation, and survival in the dentate gyrus (DG). Likewise, serotonin is also involved in the regulation of neurogenesis, though its role is apparently more complex. Indeed, both enhancement of serotonin neurotransmission as well as serotonin depletion, paradoxically increase neuronal survival in the HC of mice. In this study, we analyzed the protein expression of the BDNF isoforms, i.e., pro- and mature-BDNF, and their respective receptors p75 and TrkB, in the HC of mice chronically treated with para-chloro-phenyl-alanine (PCPA), an inhibitor of serotonin synthesis. The same analysis was conducted in hyposerotonergic mice with concomitant administration of the 5-HT1 A receptor agonist, 8-Hydroxy-2-(di-n- propylamino) tetralin (8-OH-DPAT). Increased expression of p75 receptor with decreased expression of pro-BDNF was observed after chronic PCPA. Seven-day treatment with 8-OH-DPAT reestablished the expression of pro-BDNF modified by PCPA, and induced an increase in the expression of p75 receptor. It has been demonstrated that PCPA-treated mice have higher number of immature neurons in the HC. Given that immature neurons participate in the pattern separation process, the object pattern separation test was conducted. A better performance of hyposerotonergic mice was not confirmed in this assay. Altogether, our results show that molecules in the BDNF signaling pathway are differentially expressed under diverse configurations of the serotonergic system, allowing for fine-tuning of the neurogenic process.Fil: Foltran, Rocío Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; ArgentinaFil: Stefani, Karen Melany. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; ArgentinaFil: Bonafina, Antonela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; ArgentinaFil: Resasco, Agustina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; ArgentinaFil: Diaz, Silvina Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; Argentin

Bienestar en animales de experimentación

La Ciencia de los Animales de Laboratorio es una especialidad dentro de la Medicina Veterinaria que se enfoca en desarrollar modelos experimentales para mejorar la calidad de vida tanto del ser humano como de otros animales. En este sentido, la forma en que alojamos a dichos animales corresponde a un aspecto fundamental de este proceso. Esto se debe a que las perturbaciones ambientales pueden alterar la fisiología de los individuos y, como consecuencia, modificar las variables experimentales (Balcombe y col., 2004). Sin embargo, no solo es importante considerar la calidad de la experimentación biomédica sino también las obligaciones morales que poseemos hacia aquellos organismos que están bajo nuestro cuidado. Es por esta razón que el Bienestar Animal se asocia ineludiblemente con la Ciencia de los Animales de Laboratorio, como forma de evaluar científicamente cómo los procedimientos experimentales y las condiciones de alojamiento impactan sobre la calidad de vida de los animales (Baumans, 2005).Facultad de Ciencias Veterinaria

Estudio preliminar de protocolos anestésicos para la realización de vasectomía en roedores de la cepa C57BL/6J

Las combinaciones anestésicas más usadas en roedores requieren de una puesta a punto en cada laboratorio y adaptarlas a cada procedimiento, e incluso a su comportamiento en cada cepa de ratones en particular frente a las drogas utilizadas (Zuñiga M, 2008). Las combinaciones anestésicas utilizadas para realizar vasectomías en ratones de experimentación requieren de ajustes de los tiempos de anestesia, de recuperación, ya que en algunos casos suele ser lenta, generando complicaciones por hipotermia, depresión respiratoria y bradicardia (Chari Y. T. Hart, 2001). Asimismo, el escaso volumen de drogas que se permite administrar a ratones vía intraperitoneal (IP) (Zuñiga M, 2008), debe garantizar un plano quirúrgico adecuado y al mismo tiempo, no provocar efectos que comprometan la vida del animal. Por lo expuesto, resulta fundamental poner a punto el protocolo de anestesia de manera que resulte práctico, seguro y no afecte el bienestar de los animales. El presente trabajo tiene por objetivo informar los resultados obtenidos al emplear una combinación de ketamina-xilacina (KX) asociada con tramadol, ketamina-xilacina (KX), ketamina-midazolan (KM) administrados IP para realizar vasectomías en ratones de la cepa C57BL/6J.Facultad de Ciencias Veterinaria

In vitro and in vivo anticancer effects of two quinoline–platinum(II) complexes on human osteosarcoma models

Platinum-based drugs, mainly cisplatin, are used for the treatment of several solid tumors such as OS. However, cisplatin treatment often results in the development of chemoresistance, leading therapeutic failure. We have previously reported that platinum complexes containing 8-hydroxyquinoline ligands have good antitumor activity against different cancer cell lines and with a different and better cytotoxic profile than cisplatin. Here, the anticancer properties of two different quinoline–platinum complexes [Pt(Cl)₂(quinoline)(dmso)] (1) [PtCl(8-O-quinoline)(dmso)] (2) on in vitro (2D and 3D) and in vivo models (xenograft tumor of human osteosarcoma in mice) are presented. In this order, [PtCl(8-O-quinoline)(dmso)] (2) impaired cell viability to have a more pronounced antitumor effect than cisplatin on MG-63 osteosarcoma cells (IC₅₀ 4 µM vs. 39 µM). Besides, [PtCl(8-O-quinoline)(dmso)] (2) increased ROS production in a dose-manner response and this compound induced early and late apoptotic fractions of human osteosarcoma cells. Finally, [PtCl(8-O-quinoline)(dmso)] (2) decreased the cell viability of multicellular spheroids and reduced the tumor volume on athymic nude mice N:NIH(S) Fox1nu without inducing side effects. In this way, [PtCl(8-O-quinoline)(dmso)] (2) did not alter the normal cytoarchitecture of liver and kidney and the blood biomarkers (GPT, GOT, uremia, and creatinine) did not suffer modifications. Taken together, our data indicate that these compounds showed a better anticancer performance than cisplatin on in vitro and in vivo studies. These results showed the importance of chelation in the antitumor properties, suggesting that the [PtCl(8-O-quinoline)(dmso)] (2) might be a promising agent for the treatment of human osteosarcoma tumors resistant to cisplatin.Facultad de Ciencias ExactasCentro de Química InorgánicaFacultad de Ciencias Veterinaria