29 research outputs found
Pharmacokinetic profile of glucosamine and chondroitin sulfate association in healthy male individuals
Osteoarthrosis is a chronic joint disease that, once patent, leads to a progressive functional disability. As proteochondroitin sulfates are the major contents of the cartilage, it is expected that the ingestion of glucosamine and chondroitin might improve the biological status of that tissue. As we could not find any studies on the pharmacokinetic profile of this association by oral administration route in human beings, the objective of this study was to evaluate it by using the association of glucosamine sulfate (GS) and chondroitin sulfate (CS) given to two groups of twelve healthy male volunteers (group I: one capsule containing 500 mg of GS and 400 mg of CS; group II: four capsules with the same content). Blood samples were collected at pre-determined time intervals up to 48 hours post-dosing. GS and CS were measured in plasma by the DMMB (1,9,dimethyl-dimethilene blue) method. Maximum concentration was achieved within 2 hours (average ± SE; 0.893±0.093 µg/ml, group I; and 2.222±0.313 µg/ml, group II). Areas under curve up to 48 hours were 10.803±0.965 µg-hr/ml and 38.776±2.981 µg-hr/ml for groups I and II, respectively. Both groups showed a second peak after 18 hours, indicating an enterohepatic flow. Our results indicate that this association is absorbed through the oral route by a saturable mechanism, which can enable its use in clinical treatments.A osteoartrose é uma doença crônica das articulações que, uma vez instalada, leva seus portadores a uma incapacidade funcional progressiva. Como os proteocondroitins sulfato são os maiores constituintes das cartilagens, espera-se que com a ingestão de glucosamina e condroitina haja uma melhora das condições biológicas desse tecido. Uma vez que não temos conhecimento de estudo da farmacocinética da administração oral dessa associação em seres humanos, o objetivo deste trabalho foi avaliá-la utilizando a associação entre o sulfato de glucosamina (SG) e o sulfato de condroitina (SC) administrada a dois grupos de doze voluntários sadios do sexo masculino (grupo I uma cápsula de (500 mg SG; 400 mg SC) e grupo II quatro cápsulas). Amostras de sangue foram retiradas a intervalos de tempo pré-definidos até 48 horas pós-dose. O SG e o SC foram dosados no plasma pelo método de DMMB (azul de 1,9,dimetildimetileno). A concentração máxima foi atingida em 2 horas (média ±SE; 0,893±0,093 µg/mL, grupo I e 2,222±0,313 µg/mL, grupo II). As áreas sob a curva até 48 horas foram de 10,803±0,965 µg-hr/mL e 38,776±2,981 µg-hr/mL, respectivamente para os grupos I e II. Os dois grupos apresentaram um segundo pico após 18 horas, indicando circulação êntero-hepática. Os nossos resultados indicam que essa associação é absorvida por via oral por mecanismo saturável, o que pode facilitar o seu uso em tratamentos clínicos.Fundação Oswaldo Ramos Hospital do Rim e HipertensãoUNIFESP-EPMUNIFESP, EPMSciEL
Diversity of Apolipoprotein E genetic polymorphism significance on cardiovascular risk is determined by the presence of Metabolic Syndrome among hypertensive patients
Background: Hypertension has a significant relevance as a cardiovascular risk factor. A consistent increase on world's Metabolic Syndrome (MetS) incidence has been associated with an epidemic cardiovascular risk in different populations. Dislipidemia plays a major role determining the epidemic CV burden attributed to MetS. Apolipoprotein E (ApoE) is involved on cholesterol and triglycerides metabolism regulation. Once ApoE polymorphism may influence lipid metabolism, it is possible that it brings on individual susceptibility consequences for the development of MetS and cardiovascular risk. the objective of the study is to measure the discriminatory power of ApoE polymorphism in determining cardiovascular risk stratification based on the presence MetS in a cohort of hypertensive patients.Methods: It was enrolled 383 patients, divided in two groups, classified by MetS presence (IDF criteria): Group 1: 266 patients with MetS (MetS +) and Group 2: 117 patients without Mets (MetS -). Patient's data were collected by clinical evaluation, physical exam, file reviews and laboratory testing. Polymorphic ApoE analysis was performed by PCR amplification. Groups were compared on clinical and laboratory characteristics as well as allele and genotype distribution towards ApoE polymorphism. Mets CVD prevalence was analysed according to E4 allele prevalence.Results: the results evidenced 184 men (48%), 63,7% whites, 45,1% diabetics and 11,7% of patients were smokers. Mean age was 64,0 +/- 12,0 years. When genotypic distribution was analyzed, E3/3 genotype and E3 allele frequencies were more prevalent. Among patients with MetS, we observed an independent association between CVD prevalence and E4 allele frequency (OR 2.42 (1.17-5.0, p < 0,05)). On the opposite direction, in those without MetS, there was lesser CVD burden in E4 allele carriers (OR 0,14 (0,02-0,75)). These associations remained significant even after confounding factor corrections.Conclusions: the results presented demonstrate that the association between ApoE gene and CVD may be modulated by the presence of MetS, with an increased CV burden observed among E4 allele carriers with the syndrome. On the opposite way, E4 allele carriers without visceral obesity had lesser prevalence of CVD.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Universidade Federal de São Paulo, Div Nephrol, BR-04039032 São Paulo, BrazilTufts Univ, New England Med Ctr, Div Nephrol, Boston, MA 02111 USAHosp Israelita Albert Einstein, Res & Educ Inst, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Div Nephrol, BR-04039032 São Paulo, BrazilWeb of Scienc
Study of kininases, purified from human urine and from fresh urine using internally quenched fluorescents substrates
Cininase e uma denominacao geral para enzimas proteoliticas capazes de inativar cininas como bradicinina (BK), lisil-bradicinina (LBK) e metionil-lisil-bradicinina (MLBK). Em estudos anteriores realizados em nosso laboratorio, foram purificadas de urina de individuos normais, atraves de cromatografia em DEAE-celulose, 8 enzimas com atividade cininasica: duas atividades do tipo carboxipeptidase, duas enzimas conversaras de angiotensina I, duas serino endopeptidase (Hl e H2), uma prolil endopeptidase (H) e uma endopeptidase neutra (NEP-Iike). Neste trabalho, com o objetivo de estabelecer um metodo extremamente sensivel para a quantificacao de endopeptidases, purificamos e caracterizamos 4 enzimas, a partir de urina humana, que foram classificadas com base nos estudos de inibicao e ligacao hidrolisada na molecula de BK, como serino tiol endopeptidase (H2), serino endopeptidase (Hl), prolil endopeptidase (H) e endopeptidase neutra (NEP-Iike). Para tanto utilizamos o substrato com apagamento intramolecular da fluorescencia AbzOBKQOEDDnp, bem como testamos diversos substratos fluorogenicos para estudar a especificidade das referidas enzimas. A prolil endopeptidase e uma tiol metalo endopeptidase sendo inibida por EDTA, 2-ME e POHMB. A serino endopeptidase Hl foi inibida por PMSF e a serino tio[ endopeptidase H2 alem de ser inibida por PMSF foi tambem inibida por E64 e POHMB. A NEP-Iike foi inibida por fosforamidom, tiorfam e OPA. Os substratos fluorogenicos Abz-FPQ-EDDnp, Abz-FGQ-EDDnp, AbzFRQ-EDDnp e Abz-FDQ-EDDnp foram determinados especificos para as enzimas H, Hl, H2 e NEP-Iike respectivamente. O Km encontrado foi da ordem de mM para estes substratos, bem como para Abz-BKQ-EDDnp. Utilizando o substrato Abz-BKQ-EDDnp a atividade maxima encontrada para a prolil endopeptidase foi em 9,0; para a serino endopeptidase Hl foi em 7,0 e 8,5, e para a NEP-Iike foi em 7,0 e 8,0. Quando utilizamos os substratos especificos para cada enzima encontramos atividade maxima nos seguintes pHs: 6,5 e 8,0 para a prolil endopeptidase, utilizando o substrato Abz-FPQ-EDDnp; 5,5 e 8,0 para a serino Hl utilizando o substrato Abz-FRQ-EDDnp; e 6,0 e 7,0 para a NEP-/ike utilizando o substrato Abz-FDQ-EDDnp. Para a endopeptidase H2 nao foi possivel determinar o pH otimo de atividade. Os pesos moleculares determinados para a prolil endopeptidase, 45 kDa; para a serino endopeptidase Hl, 49 kDa...(au)BV UNIFESP: Teses e dissertaçõe
Identification of a new site of angiotensin-I converting enzyme (ACE) production in IMCD cells and study of interation between the bradykinin receptors and ACE using ACE inhibitors
Enzima conversora de angiotensina I (ECA) ou kininase II é uma dipeptidil- carboxipepitidase (EC 3.4.15.1) que tem um importante papel na regulação de pressão sangüínea, cliva o dipeptídeo C-terminal da angiotensina I(AI)i produzindo o potente peptídeo vasopressor angiotensina II (AII) e inativa bradicinina (BK), um potente vasodilatador. Baseados no estudo de Casarini e cols. (1997) no qual um novo sítio produção de ECA foi localizado no ducto coletor, o objetivo deste trabalho foi purificar e caracterizar na cultura de células mIMCD-3 a presença e/ou síntese da ECA, enfatizando desta forma um papel fisiológico importante para esta enzima nestas células, uma vez que todo sistema calicreína-cininas encontra-se presente nesta região. Outro objetivo foi estudar a interação da ECA com os receptores B2 da BK utilizando inibidores da ECA. Inicialmente, isolamos a atividade da ECA presente nas células mIMCD no meio de cultura, por gel filtração em coluna empacotada com resina AcA-34 previamente calibrada. Cada isoforma foi recromatografada em coluna afinidade Lisinopril-sepharose. As enzimas isoladas do meio foram denomina M1 e M2, e as ECAs extraídas das células, C1 e C2. As massas moleculares determinadas por eletroforese em gel de poliacrilamida foram: M1, 60 kDa e M2 117 kDa (isoformas secretadas) e C1, 63 kDa e C2, 130 kDa (isoformas intracelulares). A expressão protéica foi verificada por Western Blotting utilizando anticorpo monoclonal 9B9, nas isoformas purificadas e nas frações do citoplasma da membrana e do núcleo…(au).BV UNIFESP: Teses e dissertaçõe
Multiple angiotensin I-converting enzyme (ACE) isoforms from WKY and SHR rats.
UNIFESP, Dept Med, Div Nephrol, Sao Paulo, BrazilUNIFESP, Dept Med, Div Nephrol, Sao Paulo, BrazilWeb of Scienc
Purification and characterization of angiotensin-I convering enzyme from urine of normotensive Wistar Kyoto rats.
UNIFESP, Escola Paulista Med, Nephrol Div & Biophys, Sao Paulo, BrazilINCOR, Mol Biol Lab, Sao Paulo, BrazilUNIFESP, Escola Paulista Med, Nephrol Div & Biophys, Sao Paulo, BrazilWeb of Scienc