Protective effect of immunosuppressive treatment before orthotopic kidney autotransplantation

Background: Ischemia reperfusion injury (IRI) is one of the risk factors for delayed graft function, acute rejection and long term allograft survival after kidney transplantation. IRI is an independent antigen inflammatory process that produces tissue damage. Our objective was to study the impact of immunosuppressive treatment (IS) on IRI applying only one dose of IS before orthotopic kidney autotransplantation. Methods: Twenty-four rats allocated in four groups were studied. One group served as control (G1: autotransplanted rats without IS) and the rest received IS 12. h before kidney autotransplantation (G2: Rapamycin, G3: Mycophenolate mofetil and G4: Tacrolimus). Results: Improved renal function and systemic inflammatory response were found among IS groups compared to the control group (Delta Urea p < 0.0001; Delta Creatinine p < 0.0001; Delta C3 p < 0.001). The number of apoptotic nuclei in renal medulla in G1 was higher than in IS groups (p < 0.0001). Tubular damage was less severe in IS groups respecting G1 (p < 0.001). C3, TNF-γ and IL-6 expression in kidney samples was reduced when IS was used compared to the control group. No differences were observed among the different immunosuppressive drugs tested. However, Heme oxygenase-1(HO-1) was increased only in Rapamycin treatment. Conclusions: These data suggest that the use of IS administered before transplant attenuates the IRI process after kidney transplantation in an animal model.Fil: Cicora, Federico. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Hospital Alemán; Argentina. Fundación Para la Investigación y Asistencia de la Enfermedad Renal; ArgentinaFil: Lausada, Natalia Raquel. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Vasquez, Daniela Noris. Fundación Para la Investigación y Asistencia de la Enfermedad Renal; ArgentinaFil: Cicora, Paola. Fundación Para la Investigación y Asistencia de la Enfermedad Renal; ArgentinaFil: Guerrieri, Diego. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Farmacología; ArgentinaFil: Gonzalez, Pedro. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Zalazar, Gustavo. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas; ArgentinaFil: Stringa, Pablo Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Raimondi, Jorge Clemente. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; Argentin

Trece años de experiencia en la enseñanza teórico-práctica de la microcirugía experimental

La microcirugía complementa diversas especialidades quirúrgicas a fin de magnificar la estructura a intervenir; y en profesiones no-médicas se utiliza para realizar técnicas altamente complejas en roedores de laboratorio. La enseñanza de la técnica se realiza con ejercicios de complejidad creciente hasta culminar realizando con éxito anastomosis vasculares y nerviosas en estructuras menores a los 2 mm. Estos ejercicios se llevan a cabo inicialmente en modelos inanimados y posteriormente en la rata de laboratorio. Nuestro objetivo es presentar la metodología pedagógica y los resultados obtenidos en 13 años de experiencia de enseñanza de la técnica microquirúrgica en nuestra facultad. Anualmente se dictan cursos desde el año 2000 hasta la fecha.Facultad de Ciencias Médica

Trece años de experiencia en la enseñanza teórico-práctica de la microcirugía experimental

La microcirugía complementa diversas especialidades quirúrgicas a fin de magnificar la estructura a intervenir; y en profesiones no-médicas se utiliza para realizar técnicas altamente complejas en roedores de laboratorio. La enseñanza de la técnica se realiza con ejercicios de complejidad creciente hasta culminar realizando con éxito anastomosis vasculares y nerviosas en estructuras menores a los 2 mm. Estos ejercicios se llevan a cabo inicialmente en modelos inanimados y posteriormente en la rata de laboratorio. Nuestro objetivo es presentar la metodología pedagógica y los resultados obtenidos en 13 años de experiencia de enseñanza de la técnica microquirúrgica en nuestra facultad. Anualmente se dictan cursos desde el año 2000 hasta la fecha.Facultad de Ciencias Médica

Amelioration of renal damage by administration of anti-thymocyte globulin to potential donors in a brain death rat model

Brain death (BD), a non-immunological factor of renal injury, triggers an inflammatory process causing pathological signs of cell death in the kidney, such as necrosis and apoptosis. Kidneys from brain dead donors show lower success rates than kidneys from living donors and one strategy to improve transplantation outcome is to precondition the donors. For the first time, anti-rat thymoglobulin (rATG) was administered in an experimental brain death animal model to evaluate if it could ameliorate histopathological damage and improve organ function. Animals were divided into three groups: V (n = 5) ventilated for 2 h; BD (n = 5) brain death and ventilated for 2 h; and BD+rATG (n = 5) brain death, ventilated for 2 h, rATG was administered during brain death (10 mg/kg). We observed lower creatinine levels in treatment groups (means): V, 0·88 ± 0·22 mg/dl; BD, 1·37 ± 0·07 mg/dl; and BD+rATG, 0·64 ± 0·02 mg/dl (BD versus BD+rATG, P < 0·001). In the BD group there appeared to be a marked increase of ATN, whereas ATN was decreased significantly in the rATG group (V, 2·25 ± 0·5 versus BD, 4·75 ± 0·5, P < 0·01; BD+rATG, 2·75 ± 0·5 versus BD 4·75 ± 0·5 P < 0·01). Gene expression was evaluated with reverse transcription–polymerase chain reaction; tumour necrosis factor (TNF)-α, interleukin (IL)-6, C3, CD86 showed no significant difference between groups. Increased IL-10 and decreased CCL2 in BD+rATG compared to BD (both cases P < 0·01). Myeloperoxidase was increased significantly after the brain death setting (V: 32 ± 7·5 versus BD: 129 ± 18). Findings suggest that rATG administered to potential donors may ameliorate renal damage caused by BD. These findings could contribute in the search for specific cytoprotective interventions to improve the quality and viability of transplanted organs.Facultad de Ciencias Médica

Impact of ishemia-reperfusion injury on long survival rate in intestinal transplantation in rats

Introducción. El intestino es un órgano altamente sensible a la injuria por isquemia y reperfusión (I-R) y responde de manera temprana aumentando su permeabilidad. Posteriormente, esta respuesta se traduce en cambios morfológicos e histológicos que ponen de manifiesto el daño causado por la injuria. El trasplante heterotópico intestinal en ratas permite evaluar las lesiones por I-R sin comprometer la supervivencia del animal. Objetivo. Establecer una relación entre el grado de lesión por I-R con la supervivencia prolongada del animal. Métodos. Se incluyeron 10 trasplantes de intestino en ratas Wistar, machos, adultas e isogénicas. Las biopsias ileales se tomaron: 1) inmediatamente post-disección, 2) al final de la isquemia fría, 3) a los 30 minutos de la reperfusión, 4) a las 48 horas posttrasplante y 5) a los 5 días de supervivencia, reportadas según la clasificación de Park e inmunomarcación a malondialdehído (MDA). Resultados. Los índices de Park obtenidos fueron 1) 0,57±1,13(N=10); 2) 2,71±1,25(N=10); 3) 4,14±0,89(N=10); 4) 1,0±0,81(N=7); 5) 0(N=7). A los 30 min de la reperfusión se manifiestan grados elevados hasta 3 lo cual significa entre un 51% a 75% de extensión de la inmunomarcación a MDA en las células endoteliales de los capilares de la lámina propia. Tres animales murieron a las 48 horas, los cuales presentaron Park superior a 4 a los 30 min de la reperfusión y clínicamente signología compatible con endotoxemia. Conclusiones. El daño tisular más severo se observó en la postreperfusión inmediata. A las 48 horas el tejido tiende a normalizarse. Las lesiones por I-R a los 30 min postreperfusion impactan significativamente en la supervivencia alejada del animal.INTRODUCTION: The intestine is a highly sensitive tissue to ischemia-reperfusion (IR) injury that will early respond increasing its permeability. Later this response is translated in morphologic and histological changes that reveal the degree of damage. The heterotopic intestinal transplantation model in rats allows to evaluate the evolution of intestinal tissue injury after ischemia-reperfusion without affecting the long survival rate. OBJECTIVE: The aim of this paper is to establish a relationship between the ischemic reperfusion injury with the long-term survival METHODS:Ten intestinal transplants were analyzed in adult, Wistar, inbred, male rats. Light microscopical examination was performed on intestine graft: 1) immediately post-dissection, 2) at the end of cold isquemia, 3) 30 min, 4) 48hs and 5) 5 days post-transplant procedure, respectively. Biopsies were reported according to Park's classification and extension of staining using immunohistochemestry to malondialdehyde (MDA) products. RESULTS:The Park's classification indexes reported in samples were 1) 0,57 +/- 1,13 (N=10); 2) 2,71 +/- 1,25 (N=10); 3) 4,14 +/- 0,89 (N=10); 4) 1,0 +/- 0,81 (N=7); 5) 0 (N=7). The highest levels of immunohistochemical detection of MDA were observed thirty minutes post-reperfusion (extension of staining between 51% to 75%). Three animals died when they were sampled at 48 hours, and the biopsies had Park's classification > or = 4 at 30 minutes post-reperfusion and endotoxemic signology. CONCLUSIONS: The highest degree of mucosal damage was observed immediately post-reperfusion. At 48hs the graft tended to be normalized Failure to repair the immediately I-R injury signficantly affects the long term survival.Fil: Lausada, Natalia Raquel. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Stringa, Pablo Luis. Fundación Favaloro; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Cabanne, Ana. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Ramisch, Diego. Fundación Favaloro; ArgentinaFil: Machuca, Mariana Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fundación Favaloro; ArgentinaFil: Galvao, Flavio. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Coronato, Silvia. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Raimondi, Jorge Clemente. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Gondolesi, Gabriel Eduardo. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Impact of ishemia-reperfusion injury on long survival rate in intestinal transplantation in rats

Introducción. El intestino es un órgano altamente sensible a la injuria por isquemia y reperfusión (I-R) y responde de manera temprana aumentando su permeabilidad. Posteriormente, esta respuesta se traduce en cambios morfológicos e histológicos que ponen de manifiesto el daño causado por la injuria. El trasplante heterotópico intestinal en ratas permite evaluar las lesiones por I-R sin comprometer la supervivencia del animal. Objetivo. Establecer una relación entre el grado de lesión por I-R con la supervivencia prolongada del animal. Métodos. Se incluyeron 10 trasplantes de intestino en ratas Wistar, machos, adultas e isogénicas. Las biopsias ileales se tomaron: 1) inmediatamente post-disección, 2) al final de la isquemia fría, 3) a los 30 minutos de la reperfusión, 4) a las 48 horas posttrasplante y 5) a los 5 días de supervivencia, reportadas según la clasificación de Park e inmunomarcación a malondialdehído (MDA). Resultados. Los índices de Park obtenidos fueron 1) 0,57±1,13(N=10); 2) 2,71±1,25(N=10); 3) 4,14±0,89(N=10); 4) 1,0±0,81(N=7); 5) 0(N=7). A los 30 min de la reperfusión se manifiestan grados elevados hasta 3 lo cual significa entre un 51% a 75% de extensión de la inmunomarcación a MDA en las células endoteliales de los capilares de la lámina propia. Tres animales murieron a las 48 horas, los cuales presentaron Park superior a 4 a los 30 min de la reperfusión y clínicamente signología compatible con endotoxemia. Conclusiones. El daño tisular más severo se observó en la postreperfusión inmediata. A las 48 horas el tejido tiende a normalizarse. Las lesiones por I-R a los 30 min postreperfusion impactan significativamente en la supervivencia alejada del animal.INTRODUCTION: The intestine is a highly sensitive tissue to ischemia-reperfusion (IR) injury that will early respond increasing its permeability. Later this response is translated in morphologic and histological changes that reveal the degree of damage. The heterotopic intestinal transplantation model in rats allows to evaluate the evolution of intestinal tissue injury after ischemia-reperfusion without affecting the long survival rate. OBJECTIVE: The aim of this paper is to establish a relationship between the ischemic reperfusion injury with the long-term survival METHODS:Ten intestinal transplants were analyzed in adult, Wistar, inbred, male rats. Light microscopical examination was performed on intestine graft: 1) immediately post-dissection, 2) at the end of cold isquemia, 3) 30 min, 4) 48hs and 5) 5 days post-transplant procedure, respectively. Biopsies were reported according to Park's classification and extension of staining using immunohistochemestry to malondialdehyde (MDA) products. RESULTS:The Park's classification indexes reported in samples were 1) 0,57 +/- 1,13 (N=10); 2) 2,71 +/- 1,25 (N=10); 3) 4,14 +/- 0,89 (N=10); 4) 1,0 +/- 0,81 (N=7); 5) 0 (N=7). The highest levels of immunohistochemical detection of MDA were observed thirty minutes post-reperfusion (extension of staining between 51% to 75%). Three animals died when they were sampled at 48 hours, and the biopsies had Park's classification > or = 4 at 30 minutes post-reperfusion and endotoxemic signology. CONCLUSIONS: The highest degree of mucosal damage was observed immediately post-reperfusion. At 48hs the graft tended to be normalized Failure to repair the immediately I-R injury signficantly affects the long term survival.Fil: Lausada, Natalia Raquel. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Stringa, Pablo Luis. Fundación Favaloro; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Cabanne, Ana. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Ramisch, Diego. Fundación Favaloro; ArgentinaFil: Machuca, Mariana Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fundación Favaloro; ArgentinaFil: Galvao, Flavio. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Coronato, Silvia. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Raimondi, Jorge Clemente. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Gondolesi, Gabriel Eduardo. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Preconditioning donor with a combination of tacrolimus and rapamacyn to decrease ischaemia-reperfusion injury in a rat syngenic kidney transplantation model

Reperfusion injury remains one of the major problems in transplantation. Repair from ischaemic acute renal failure (ARF) involves stimulation of tubular epithelial cell proliferation. The aim of this exploratory study was to evaluate the effects of preconditioning donor animals with rapamycin and tacrolimus to prevent ischaemia–reperfusion (I/R) injury. Twelve hours before nephrectomy, the donor animals received immunosuppressive drugs. The animals were divided into four groups, as follows: group 1 control: no treatment; group 2: rapamycin (2 mg/kg); group 3 FK506 (0, 3 mg/kg); and group 4: FK506 (0, 3 mg/kg) plus rapamycin (2 mg/kg). The left kidney was removed and after 3 h of cold ischaemia, the graft was transplanted. Twenty-four hours after transplant, the kidney was recovered for histological analysis and cytokine expression. Preconditioning treatment with rapamycin or tacrolimus significantly reduced blood urea nitrogen and creatinine compared with control [blood urea nitrogen (BUN): P < 0·001 versus control and creatinine: P < 0·001 versus control]. A further decrease was observed when rapamycin was combined with tacrolimus. Acute tubular necrosis was decreased significantly in donors treated with immunosuppressants compared with the control group (P < 0·001 versus control). Moreover, the number of apoptotic nuclei in the control group was higher compared with the treated groups (P < 0·001 versus control). Surprisingly, only rapamycin preconditioning treatment increased anti-apoptotic Bcl2 levels (P < 0·001). Finally, inflammatory cytokines, such as tumour necrosis factor (TNF)-α and interleukin (IL)-6, showed lower levels in the graft of those animals that had been pretreated with rapamycin or tacrolimus. This exploratory study demonstrates that preconditioning donor animals with rapamycin or tacrolimus improves clinical outcomes and reduce necrosis and apoptosis in kidney I/R injury.Facultad de Ciencias MédicasComisión de Investigaciones Científicas de la provincia de Buenos Aire

Adenolinfografía y coloración del sistema linfático inguinopelvico

Los autores hacen un breve resumen y puesta al día sobre algunos aspectos de la anatomía del sistema linfático genital femenino, y una historia de la linfoadenografía con todas sus variantes, y de lo que ella significa como investigación anátomo quirúrgica. Se menciona la más reciente bibliografía al respecto. Luego proponen una modificación a la técnica de la linfoadenografía coloreada (publicada recientemente por los autores), que consiste en la adición a la inyección endolinfática pre-operatoria, de un isótopo radioactivo de vida breve, con fines onco-terapéuticos en particular en el cáncer del cuello uterino.The authors propose a modification to the technique of lymphography by the addition to a radioactive isotope (I 131) of a vegetal colorant that permits the direct observation of the lymphatic tract during the surgical exploration.Facultad de Ciencias Médica

Establecimiento de un Modelo Experimental de Muerte Encefilica en Ratas para investigackin en Trasplante de Intestino

El trasplante intestinal experimental en ratas, es una herramienta muy utilizada en el estudio de la injuria por isquemia-reperfusion y rechazo. Aun asi, en la mayoria de estos protocolos se utilizan donantes vivos. Con el objetivo de generar un modelo mss cercano a la realidad clinica, nuestro trabajo pretende incluir a la muerte encefalica para analizar el impacto de este proceso en la biologia del trasplante de intestino. Materiales y metodos: Se utilizaron ratas Wistar divididas dos grupos, uno con muerte encefalica y un grupo control con ventilacion asistida. Ambos grupos fueron mantenidos en dichas condiciones durante 2 hs. y posteriormente se tomaron las muestras correspondientes. Se estudio el deo histologic° general y focal, mediante la escala de Park, y se realize la medicion del Indice Vellosidad/Cripta y el conteo de celulas Goblet. Resultados: El valor promedio en el grupo con ventilacion asistida fue 0±0 y para el grupo Muerte Encefalica fue de 0.8±0.83 (p=0.1729). Mientras tanto el dafio focal fue VA=0.5±0.57 y ME=1.6±0.54 (p=0.0270). El indice Vellosidad/Cripta se vie disminuido en el grupo ME, 2.64±0.65 vs 3.06±0.75 para el grupo control (p=0.0007). El conteo de celulas Goblet por cads 25 vello¬sidades fue de 763.8±120.1 para VA y de 531 ±103.5 para ME (p=0.0317). Conclusiones: Con este trabajo pudimos establecer un modelo confiable de muerte encefalica en ratas, que permits estudiar el impacto de la misma en el injerto intestinal destinado al trasplante. Nuestros resultados muestran que la muerte encefalica impacta negativamente, tomando como parametros la arquitectura del tejido, el piano funcional dado por el IVC y en las primeras barreras de defensa del intestino, en el caso de las celulas Goblet.Experimental intestinal transplantation in rats is a widely used tool in the study of ischemia reperfusion injury and rejection. Even so, live donors are used in the majority of these protocols. With the aim of generate a model closer to the clinical reality, our study intends to introduce brain death (BD) protocol to analyze the impact of biological processes associated with ITx. Materials and methods: Wistar rats divided into two groups, one under brain death (n=5) and a control group with assisted ventilation (n=4). Both groups were maintained in these conditions for 2 hours and subsequently the corresponding samples were taken. The general and focal histological damage was studied using the Park scale, the Villi/Crypt Index was measured and a counting for Goblet cells. Results: The general injury for the VA group was 0 ± 0 and for the ME group it was 0.8 ± 0.83 (p=0.1729). Meanwhile the focal damage was VA=0.5 ± 0.57 and ME=1.6 ± 0.54 (p=0.0270). The Villi/Crypt Index was low in the ME group, 2.64 ± 0.65 vs. 3.06 ± 0.75 for the control group (p=0.0007). The Goblet cell count every 25 villi was 763.8 ± 120.1 for VA and 531 ± 103.5 for ME (p=0.0317). Conclusions: With this work we were able to establish a reliable model of brain death in rats, which allows us to study its impact on the intestinal graft desti¬ned for transplantation. Our results show that brain death has a negative impact on the graft, taking as parameters the architecture of the tissue, functionality given by the IVC and the first bowel defense barriers, in the case of Goblet cells.Fil: Vecchio Dezillio, Leandro Emmanuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina. Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Laboratorio de Transplante de Órganos; ArgentinaFil: Stringa, Pablo Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina. Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Laboratorio de Transplante de Órganos; ArgentinaFil: Raimondi, Jorge Clemente. Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Laboratorio de Transplante de Órganos; ArgentinaFil: Rumbo, Martín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; ArgentinaFil: Lausada, Natalia Raquel. Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Laboratorio de Transplante de Órganos; Argentin

Impacto de las lesiones por isquemia-reperfusión en la supervivencia alejada de ratas con trasplante intestinal

Introducción. El intestino es un órgano altamente sensible a la injuria por isquemia y reperfusión (I-R) y responde de manera temprana aumentando su permeabilidad. Posteriormente, esta respuesta se traduce en cambios morfológicos e histológicos que ponen de manifiesto el daño causado por la injuria. El trasplante heterotópico intestinal en ratas permite evaluar las lesiones por I-R sin comprometer la supervivencia del animal. Objetivo. Establecer una relación entre el grado de lesión por I-R con la supervivencia prolongada del animal. Métodos. Se incluyeron 10 trasplantes de intestino en ratas Wistar, machos, adultas e isogénicas. Las biopsias ileales se tomaron: 1) inmediatamente post-disección, 2) al final de la isquemia fría, 3) a los 30 minutos de la reperfusión, 4) a las 48 horas posttrasplante y 5) a los 5 días de supervivencia, reportadas según la clasificación de Park e inmunomarcación a malondialdehído (MDA). Resultados. Los índices de Park obtenidos fueron 1) 0,57±1,13(N=10); 2) 2,71±1,25(N=10); 3) 4,14±0,89(N=10); 4) 1,0±0,81(N=7); 5) 0(N=7). A los 30 min de la reperfusión se manifiestan grados elevados hasta 3 lo cual significa entre un 51% a 75% de extensión de la inmunomarcación a MDA en las células endotelialesde los capilares de la lámina propia. Tres animales murieron a las 48 horas, los cuales presentaron Park superior a 4 a los 30 min de la reperfusión y clínicamente signología compatible con endotoxemia. Conclusiones. El daño tisular más severo se observó en la postreperfusión inmediata. A las 48 horas el tejido tiende a normalizarse. Las lesiones por I-R a los 30 min postreperfusion impactan significativamente en la supervivencia alejada del animal