Trasplante heterotópico de intestino en ratones: descripción de la técnica quirúrgica y análisis histopatológico en diferentes etapas del procedimiento

El trasplante intestinal (TI) se ha constituido en una alternativa terapéutica para pacientes con insuficiencia intestinal y falla de la nutrición parenteral. Los resultados clínicos después del TI todavía representan un desafío frente a otros órganos sólidos. Por lo tanto, los modelos animales son fundamentales para comprender mejor la inmunología y la fisiología de estos injertos. Pese a su complejidad quirúrgica, los modelos de trasplante (Tx) en ratones brindan la ventaja de disponer de cepas manipuladas genéticamente.Facultad de Ciencias Médica

Injuria por isquemia-reperfusión intestinal : Impacto del tiempo de isquemia en el daño tisular y en la supervivencia post-quirúrgica

El intestino es uno de los órganos más sensibles a la injuria por isquemia-reperfusión (IRI), fenómeno presente en diversas situaciones clínicas como hernias estranguladas, vólvulo, enterocolitis necrotizante y trasplante intestinal. Pese a que se sabe que la duración de la isquemia es determinante en el daño tisular luego de un evento de isquemia-reperfusión, no está claramente dilucidado cual es el tiempo de isquemia intestinal que provoca una lesión letal para el órgano en cuestión y para la supervivencia pos reperfusión.Facultad de Ciencias Médica

Precondicionamiento isquémico como estrategia para atenuar la injuria por isquemia reperfusión en un modelo experimental de trasplante intestinal

El trasplante de intestino (TXI) constituye una opción terapéutica para pacientes con insuficiencia intestinal que se ven imposibilitados de continuar bajo nutrición parenteral total. La injuria por isquemia-reperfusión es una complicación inherente al TXI capaz de comprometer la funcionalidad y la supervivencia del injerto y del paciente. Por tal motivo, diversas estrategias, aún en etapas experimentales, son propuestas para atenuar este daño, sin existir un consenso sobre cual es la más apropiada.Facultad de Ciencias Médica

Precondicionamiento isquémico como estrategia para atenuar la injuria por isquemia reperfusión en un modelo experimental de trasplante intestinal

El trasplante de intestino (TXI) constituye una opción terapéutica para pacientes con insuficiencia intestinal que se ven imposibilitados de continuar bajo nutrición parenteral total. La injuria por isquemia-reperfusión es una complicación inherente al TXI capaz de comprometer la funcionalidad y la supervivencia del injerto y del paciente. Por tal motivo, diversas estrategias, aún en etapas experimentales, son propuestas para atenuar este daño, sin existir un consenso sobre cual es la más apropiada.Facultad de Ciencias Médica

Técnica quirúrgica de inducción de isquemia y precondicionamiento isquémico uterino en ratas

El advenimiento de los trasplantes de útero como opción terapéutica a la infertilidad por factor uterino absoluto demanda la adquisición de conocimientos básicos en la temática. La lesión por isquemia reperfusión es inherente a todo procedimiento de trasplante y aún quedan muchos mecanismos por dilucidar en el trasplante uterino, así como estrategias que sean capaces de proteger el daño postreperfusión. El Precondicionamiento Isquémico (PCI), maniobra quirúrgica de breves períodos de isquemia y reperfusión previos al insulto isquémico mayor, ha demostrado resultados favorables en otros órganos trasplantados y en modelos in-vivo y ex-vivo de injuria isquémica. Objetivos: desarrollar un modelo experimental de isquemia-reperfusión uterina en ratas; optimizar la técnica del PCI como estrategia para atenuar la isquemia-reperfusión uterina en ratas.Facultad de Ciencias Médica

Técnica quirúrgica de inducción de isquemia y precondicionamiento isquémico uterino en ratas

El advenimiento de los trasplantes de útero como opción terapéutica a la infertilidad por factor uterino absoluto demanda la adquisición de conocimientos básicos en la temática. La lesión por isquemia reperfusión es inherente a todo procedimiento de trasplante y aún quedan muchos mecanismos por dilucidar en el trasplante uterino, así como estrategias que sean capaces de proteger el daño postreperfusión. El Precondicionamiento Isquémico (PCI), maniobra quirúrgica de breves períodos de isquemia y reperfusión previos al insulto isquémico mayor, ha demostrado resultados favorables en otros órganos trasplantados y en modelos in-vivo y ex-vivo de injuria isquémica. Objetivos: desarrollar un modelo experimental de isquemia-reperfusión uterina en ratas; optimizar la técnica del PCI como estrategia para atenuar la isquemia-reperfusión uterina en ratas.Facultad de Ciencias Médica

Impact of ishemia-reperfusion injury on long survival rate in intestinal transplantation in rats

Introducción. El intestino es un órgano altamente sensible a la injuria por isquemia y reperfusión (I-R) y responde de manera temprana aumentando su permeabilidad. Posteriormente, esta respuesta se traduce en cambios morfológicos e histológicos que ponen de manifiesto el daño causado por la injuria. El trasplante heterotópico intestinal en ratas permite evaluar las lesiones por I-R sin comprometer la supervivencia del animal. Objetivo. Establecer una relación entre el grado de lesión por I-R con la supervivencia prolongada del animal. Métodos. Se incluyeron 10 trasplantes de intestino en ratas Wistar, machos, adultas e isogénicas. Las biopsias ileales se tomaron: 1) inmediatamente post-disección, 2) al final de la isquemia fría, 3) a los 30 minutos de la reperfusión, 4) a las 48 horas posttrasplante y 5) a los 5 días de supervivencia, reportadas según la clasificación de Park e inmunomarcación a malondialdehído (MDA). Resultados. Los índices de Park obtenidos fueron 1) 0,57±1,13(N=10); 2) 2,71±1,25(N=10); 3) 4,14±0,89(N=10); 4) 1,0±0,81(N=7); 5) 0(N=7). A los 30 min de la reperfusión se manifiestan grados elevados hasta 3 lo cual significa entre un 51% a 75% de extensión de la inmunomarcación a MDA en las células endoteliales de los capilares de la lámina propia. Tres animales murieron a las 48 horas, los cuales presentaron Park superior a 4 a los 30 min de la reperfusión y clínicamente signología compatible con endotoxemia. Conclusiones. El daño tisular más severo se observó en la postreperfusión inmediata. A las 48 horas el tejido tiende a normalizarse. Las lesiones por I-R a los 30 min postreperfusion impactan significativamente en la supervivencia alejada del animal.INTRODUCTION: The intestine is a highly sensitive tissue to ischemia-reperfusion (IR) injury that will early respond increasing its permeability. Later this response is translated in morphologic and histological changes that reveal the degree of damage. The heterotopic intestinal transplantation model in rats allows to evaluate the evolution of intestinal tissue injury after ischemia-reperfusion without affecting the long survival rate. OBJECTIVE: The aim of this paper is to establish a relationship between the ischemic reperfusion injury with the long-term survival METHODS:Ten intestinal transplants were analyzed in adult, Wistar, inbred, male rats. Light microscopical examination was performed on intestine graft: 1) immediately post-dissection, 2) at the end of cold isquemia, 3) 30 min, 4) 48hs and 5) 5 days post-transplant procedure, respectively. Biopsies were reported according to Park's classification and extension of staining using immunohistochemestry to malondialdehyde (MDA) products. RESULTS:The Park's classification indexes reported in samples were 1) 0,57 +/- 1,13 (N=10); 2) 2,71 +/- 1,25 (N=10); 3) 4,14 +/- 0,89 (N=10); 4) 1,0 +/- 0,81 (N=7); 5) 0 (N=7). The highest levels of immunohistochemical detection of MDA were observed thirty minutes post-reperfusion (extension of staining between 51% to 75%). Three animals died when they were sampled at 48 hours, and the biopsies had Park's classification > or = 4 at 30 minutes post-reperfusion and endotoxemic signology. CONCLUSIONS: The highest degree of mucosal damage was observed immediately post-reperfusion. At 48hs the graft tended to be normalized Failure to repair the immediately I-R injury signficantly affects the long term survival.Fil: Lausada, Natalia Raquel. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Stringa, Pablo Luis. Fundación Favaloro; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Cabanne, Ana. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Ramisch, Diego. Fundación Favaloro; ArgentinaFil: Machuca, Mariana Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fundación Favaloro; ArgentinaFil: Galvao, Flavio. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Coronato, Silvia. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Raimondi, Jorge Clemente. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Gondolesi, Gabriel Eduardo. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Impact of ishemia-reperfusion injury on long survival rate in intestinal transplantation in rats

Introducción. El intestino es un órgano altamente sensible a la injuria por isquemia y reperfusión (I-R) y responde de manera temprana aumentando su permeabilidad. Posteriormente, esta respuesta se traduce en cambios morfológicos e histológicos que ponen de manifiesto el daño causado por la injuria. El trasplante heterotópico intestinal en ratas permite evaluar las lesiones por I-R sin comprometer la supervivencia del animal. Objetivo. Establecer una relación entre el grado de lesión por I-R con la supervivencia prolongada del animal. Métodos. Se incluyeron 10 trasplantes de intestino en ratas Wistar, machos, adultas e isogénicas. Las biopsias ileales se tomaron: 1) inmediatamente post-disección, 2) al final de la isquemia fría, 3) a los 30 minutos de la reperfusión, 4) a las 48 horas posttrasplante y 5) a los 5 días de supervivencia, reportadas según la clasificación de Park e inmunomarcación a malondialdehído (MDA). Resultados. Los índices de Park obtenidos fueron 1) 0,57±1,13(N=10); 2) 2,71±1,25(N=10); 3) 4,14±0,89(N=10); 4) 1,0±0,81(N=7); 5) 0(N=7). A los 30 min de la reperfusión se manifiestan grados elevados hasta 3 lo cual significa entre un 51% a 75% de extensión de la inmunomarcación a MDA en las células endoteliales de los capilares de la lámina propia. Tres animales murieron a las 48 horas, los cuales presentaron Park superior a 4 a los 30 min de la reperfusión y clínicamente signología compatible con endotoxemia. Conclusiones. El daño tisular más severo se observó en la postreperfusión inmediata. A las 48 horas el tejido tiende a normalizarse. Las lesiones por I-R a los 30 min postreperfusion impactan significativamente en la supervivencia alejada del animal.INTRODUCTION: The intestine is a highly sensitive tissue to ischemia-reperfusion (IR) injury that will early respond increasing its permeability. Later this response is translated in morphologic and histological changes that reveal the degree of damage. The heterotopic intestinal transplantation model in rats allows to evaluate the evolution of intestinal tissue injury after ischemia-reperfusion without affecting the long survival rate. OBJECTIVE: The aim of this paper is to establish a relationship between the ischemic reperfusion injury with the long-term survival METHODS:Ten intestinal transplants were analyzed in adult, Wistar, inbred, male rats. Light microscopical examination was performed on intestine graft: 1) immediately post-dissection, 2) at the end of cold isquemia, 3) 30 min, 4) 48hs and 5) 5 days post-transplant procedure, respectively. Biopsies were reported according to Park's classification and extension of staining using immunohistochemestry to malondialdehyde (MDA) products. RESULTS:The Park's classification indexes reported in samples were 1) 0,57 +/- 1,13 (N=10); 2) 2,71 +/- 1,25 (N=10); 3) 4,14 +/- 0,89 (N=10); 4) 1,0 +/- 0,81 (N=7); 5) 0 (N=7). The highest levels of immunohistochemical detection of MDA were observed thirty minutes post-reperfusion (extension of staining between 51% to 75%). Three animals died when they were sampled at 48 hours, and the biopsies had Park's classification > or = 4 at 30 minutes post-reperfusion and endotoxemic signology. CONCLUSIONS: The highest degree of mucosal damage was observed immediately post-reperfusion. At 48hs the graft tended to be normalized Failure to repair the immediately I-R injury signficantly affects the long term survival.Fil: Lausada, Natalia Raquel. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Stringa, Pablo Luis. Fundación Favaloro; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Cabanne, Ana. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Ramisch, Diego. Fundación Favaloro; ArgentinaFil: Machuca, Mariana Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fundación Favaloro; ArgentinaFil: Galvao, Flavio. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Coronato, Silvia. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Raimondi, Jorge Clemente. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Gondolesi, Gabriel Eduardo. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin