Estudos citogenéticos em Tetraodontiformes Sphoeroides greeleyi S. testudineus (Tetraodontidae) e Cyclichthys spinosus (Diodontidae) pertencentes ao litoral do Paraná

Orientadora: Marta Margarete CestariMonografia (Bacharelado) - Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciencias Biológicas. Curso de Graduaçao em Ciencias BiológicasResumo : Os complexos estuarinos da região sul-sudeste do Brasil são caracterizados por apresentarem canais no manguezal, chamados de gamboas, que consistem em ecossistemas de extrema importância na reprodução e desenvolvimento de diversas espécies de peixes. Os "baiacus" das famílias Diodontidae e Tetraodontidae são principalmente marinhos, mas várias espécies ocorrem em águas salobras e doces, em regiões tropicais e subtropicais. Estes peixes contêm a tetrodontoxina, encontrada na pele, fígado e gônadas, onde atua como ferormônio. Com relação aos Tetraodontiformes, é característico deste grupo ter a menor relação DNA/célula entre os peixes. Os "baiacusespinho" da família Diodontidae possuem um genoma estimado em 1,6 a 1,8 pícogramas de DNA por célula diplóide. Contudo o genoma dos tetraodontídeos é duas vezes menor (0,7- 1,0 pg), sendo portanto o menor de todos os vertebrados, fato que explica seus cromossomos reduzidos e as dificuldades na obtenção de metáfases mitóticas. O objetivo deste estudo foi caracterizar citogeneticamente duas espécies do gênero Sphoeroides (Tetraodontidae) e Cyclichthys spinosus (Diodontidae) oriundos da Baía de Paranaguá - PR: S. testudineus (2F e 13M), S. greeleyi (10F e 1M) e C. spinosus (1F, 2M e 1 imaturo). Os cromossomos mitóticos foram obtidos a partir de células renais segundo a técnica "air drying", nitrato de prata foi utilizado para evidenciar as Regiões Organizadoras de Nucléolo, para o estudo de bandas C utilizou-se o tratamento com hidróxido de bário e bandas fluorescentes foram obtidas com CMA3. Para a família Tetraodontidae foi observado nas duas espécies 2n=46 cromossomos sendo a fórmula cariotípica para S. testudineus 30M/SM+16A (NF=76) e para S. greeleyi 24M/SM+4ST+18A (NF=74). O cariótipo composto por 2n=46 cromossomos, com a ocorrência de cromossomos M e SM, é considerado básico para as espécies da família Tetraodontidae, embora represente uma condição derivada para a ordem Tetraodontiformes, que tem como cariótipo basal 2n=48 cromossomos. As bandas C positivas evidenciaram para ambas as espécies regiões centroméricas, contudo em S. greeleyi houve também marcações teloméricas em alguns pares de cromossomos e em S. testudineus todo o braço curto de certos cromossomos. Um padrão de RONs simples foi observado para as duas espécies. S. testudineus as apresentou em posição telomérica no braço curto de um par de cromossomos submetacêntricos, e S. greeleyi na posição telomérica em um par de cromossomos acrocêntricos, os quais foram também marcados pela CMA3. O diodontídeo C. spinosus, apresentou 2n=50 cromossomos, distribuídos em 4M+18SM+12ST+16A (NF=84). Da mesma forma que nos tetraodontídeos anteriormente, não foi verificado heteromorfismo cromossômico sexual para esta espécie. As Ag-RONs se mostraram positivas na posição terminal do braço curto do par 5 (SM), cuja região foi também corada positivamente pelo bandamento C e CMA3. Freqüentemente foi observada associação destes cromossomos pela região das RONs. Bandas C+ foram reveladas nos centrômeros, associadas às RONs e ocupando todo um braço de um par de cromossomos submetacêntricos. Embora análises adicionais deverão ser realizadas, os resultados do presente estudo acrescentam dados relevantes para abordagens crtotaxonômicas e para construção de um cenário consistente da evolução cromossômica para estas famílias e para peixes desta ordem

ESTUDO CROMOSSÔMICO DE UMA POPULAÇÃO DE TRAÍRA, Hoplias malabaricus (CHARACIFORMES, ERYTHRINIDAE), PROVENIENTES DO MÉDIO RIO IGUAÇU

A espécie Hoplias malabaricus é um dos principais representantes dos eritrinídeos neotropicais, caracterizada por um amplo polimorfismo cariotípico, uma vez que até o momento sete cariomorfos já foram descritos. Considerada por diversos autores como um complexo de diferentes espécies, H. malabaricus possui taxonomia confusa e, desse modo se faz necessário mais estudos cobrindo maiores áreas de amostragem para melhor compreender a origem dos cariomorfos. O presente estudo teve como objetivo realizar uma análise do cariótipo da espécie acima referida proveniente do médio Rio Iguaçu, segundo planalto paranaense. Os espécimes foram coletados no município de Cruz Machado - PR e submetidos a análises de citogenética clássica, enfocando o número diploide através de coloração com Giemsa, o padrão da heterocromatina constitutiva (Bandas C) e a localização dos genes ribossômicos 45S (Regiões Organizadoras de Nucléolos – RONs) através de impregnação com nitrato de prata. Os espécimes analisados apresentaram um cariótipo com 2n = 42 cromossomos, RONs múltiplas e bandas C no centrômero de todos os cromossomos, além de algumas marcações teloméricas em alguns pares. Este padrão caracteriza o cariomorfo A, cuja estrutura cariotípica é a de maior frequência na bacia do Rio Iguaçu. Frente ao fato de ser considerado um complexo de espécies, aspectos biogeográficos e de evolução cromossômica, enfatizando transformações cariotípicas entre os cariomorfos ocorrentes nesta bacia são discutidos

CARACTERIZAÇÃO CARIOTÍPICA DE Phyllomedusa tetraploidea (ANURA, HYLIDAE), PROVENIENTE DA MATA ATLÂNTICA PARANAENSE

No hemisfério Sul, o Brasil ocupa o primeiro lugar em relação à riqueza de espécies de anfí­bios, e estes apresentam alta diversidade e endemismo na Mata Atlântica, que por sua vez é um dos ecossistemas mais ameaçados do mundo. A espécie Phyllomedusa tetraploidea caracteriza-se pelo fato de cada célula somática dessa espécie abrigar quatro cópias de cada cromossomo. Preparações cromossômicas foram realizadas a partir de espécimes coletados em um fragmento de Mata Atlântica do Estado do Paraná. Metodologias convencionais como coloração com Giemsa e bandamento C foram realizadas com objetivo de conhecer a estrutura cromossômica dessa espécie. Com relação à macroestrutura cariotí­pica, foi encontrado 2n = 4x = 52 cromossomos distribuí­dos em metacêntricos, submetacêntricos e subtelocêntrico com Número Fundamental (NF=104). O bandamento C evidenciou heterocromatina constitutiva nas regiões pericentroméricas de alguns quartetos de cromossomos, e em grande parte deles as bandas C não foram idênticas entre os cromossomos homólogos, o que pode indicar um processo de diploidização. É muito importante e imprescindí­vel que a técnica de banda C seja realizada em um maior número de indiví­duos e em outros representantes do gênero Phyllomedusa, para se avaliar a hipótese da diploidização dos tetraploides. No Brasil P. tetraploidea é encontrada em simpatria com outras espécies do gênero, onde animais triploides também ocorrem como consequência de hibridização natural. Assim além de descrever pela primeira vez o cariótipo dessa espécie para o estado do Paraná, buscamos contribuir com dados sobre a origem da poliploidia nesse grupo

ESTUDO CROMOSSÔMICO DE UMA POPULAÇÃO DE TRAÍRA, Hoplias malabaricus (CHARACIFORMES, ERYTHRINIDAE), PROVENIENTES DO MÉDIO RIO IGUAÇU

A espécie Hoplias malabaricus é um dos principais representantes dos eritriní­deos neotropicais, caracterizada por um amplo polimorfismo cariotí­pico, uma vez que até o momento sete cariomorfos já foram descritos. Considerada por diversos autores como um complexo de diferentes espécies, H. malabaricus possui taxonomia confusa e, desse modo se faz necessário mais estudos cobrindo maiores áreas de amostragem para melhor compreender a origem dos cariomorfos. O presente estudo teve como objetivo realizar uma análise do cariótipo da espécie acima referida proveniente do médio Rio Iguaçu, segundo planalto paranaense. Os espécimes foram coletados no municí­pio de Cruz Machado - PR e submetidos a análises de citogenética clássica, enfocando o número diploide através de coloração com Giemsa, o padrão da heterocromatina constitutiva (Bandas C) e a localização dos genes ribossômicos 45S (Regiões Organizadoras de Nucléolos – RONs) através de impregnação com nitrato de prata. Os espécimes analisados apresentaram um cariótipo com 2n = 42 cromossomos, RONs múltiplas e bandas C no centrômero de todos os cromossomos, além de algumas marcações teloméricas em alguns pares. Este padrão caracteriza o cariomorfo A, cuja estrutura cariotí­pica é a de maior frequência na bacia do Rio Iguaçu. Frente ao fato de ser considerado um complexo de espécies, aspectos biogeográficos e de evolução cromossômica, enfatizando transformações cariotí­picas entre os cariomorfos ocorrentes nesta bacia são discutidos

Karyotype reexamination of Corydoras paleatus (Siluriformes) and a review of the cytogenetics of genus with a focus on the ribosomal genes

The subfamily Corydoradinae is the second largest among the callictids, comprising three genera, with Corydoras Lacépède, 1803 being the largest in the number of species. The genus Corydoras has been divided into five groups of species based on differences in diploid number, chromosomal morphology, and DNA content. Chromosome studies can provide crucial details on population differentiation. To better understand the diversification that occurs in this fish group, the current study based on such markers, presents data from a population of Corydoras paleatus from the first plateau of Paraná, putting them in a comparative scenario. The specimens studied has 2n=44 chromosomes with a karyotypic formula of 18m+26sm. Although conserved, this karyotypic structure shows variation in other populations of C. paleatus already studied, a consequence of chromosomal rearrangements that modify the morphology of chromosomes without modifying the 2n, such as centromeric repositioning. C-banding revealed conspicuous pericentromeric markings in metacentric pairs 4 and 8 and in submetacentric pairs 10 and 14, whose bands have been considered a chromosomal marker not only for C. paleatus but also for the genus. Fluorescent in situ hybridization (FISH) showed the major rDNA (45S) in the terminal region of the long arm of metacentric pair 5. Such location has already been described in other populations of C. paleatus, as they have also been mapped in short arms and with multiple patterns. The present study also provides a review of the genus Corydoras regarding the 2n, karyotypic formula and mainly regarding the number and location of the 45S and 5S rDNA, confirming a scenario in which chromosomal rearrangements have been modeling karyotypes of different populations and settling in the absence of gene flow, a consequence of vicariant events that occurred in the different basins

AVALIAÇÃO DO EFEITO SUBSTITUTIVO DE RAÇÃO POR ADUBAÇÃO ORGÂNICA NA ALIMENTAÇÃO EM ALEVINOS DE TILÁPIA (Oreochromis niloticus)

A utilização de adubação orgânica na dieta de peixes filtradores tem exibido indicadores promissores no cultivo de algumas espécies em sistemas de piscicultura intensiva. Partindo da premissa que ocorra um efeito substitutivo de adubação orgânica por ração na alimentação de peixes filtradores, o presente estudo objetivou avaliar esse efeito em alevinos de tilápia (Oreochromis niloticus). O trabalho foi desenvolvido na estação de piscicultura da UNESPAR campus de União da Vitória-PR. Foram selecionados 120 alevinos de tilápia com peso médio inicial 9,5 ± 0,24g e comprimento total 8,3±0,20cm. A dimensão de cada unidade experimental foi de 10m3, sendo alocados 30 alevinos em cada uma, conforme as seguintes dietas: na primeira os alevinos não receberam nenhum tipo de tratamento sendo o grupo controle; na segunda, os alevinos receberam 2% peso vivo (PV) em ração, consorciada com 4 kg de adubo orgânico; na terceira, os alevinos receberam 3% PV em ração, consorciada com 3 kg de adubo orgânico; na quarta, os alevinos receberam 4% PV em ração, consorciada com 2 kg de adubo orgânico.Os resultados do presente estudo após 60 dias de acompanhamento demonstraram que não houve diferença significativa entre os tratamentos (p < 0,01). Assim, podemos inferir que houve efeito substitutivo significativo de ração por adubação no desenvolvimento de alevinos de tilápia, indicando ao piscicultor que o consórcio de adubação orgânica com ração, representa um ótima alternativa para o manejo visando o melhor custo benefício

AVALIAÇÃO DOS EFEITOS GENOTÓXICOS DO FUNGICIDA RIDOMIL EM Astyanax altiparanae (PISCES, CHARACIFORMES)

O fungicida Ridomil é classificado como um agrotóxico muito perigoso ao meio ambiente (classe II), de alta persistência e alto potencial de deslocamento no solo, podendo atingir águas subterrâneas. É uma mistura do fungicida sistêmico, Metalaxil-M, e do fungicida de contato Mancozebe, cujos efeitos tóxicos já foram estudados em diversas espécies, porém até o momento nenhum estudo avaliou o potencial genotóxico deste agrotóxico em peixes. No Brasil, ainda são poucos os estudos visando estudar os efeitos dos agentes xenobióticos em espécies nativas, assim no presente estudo é avaliada a toxicidade do pesticida Ridomil na espécie Astyanax altiparanae vulgarmente conhecida como “lambari”. Os efeitos genotóxicos de uma exposição aguda (96 h) em concentrações de 0,4 mg/L e 0,8 mg/L foram avaliados através do teste do micronúcleo písceo em eritrócitos de 45 indivíduos. Os resultados apontaram para um efeito genotóxico, pois se observaram diferenças significativas entre os grupos (p < 0,05) frente à contaminação, uma vez que houve aumento na frequência de alterações morfológicas nucleares nos grupos contaminados em comparação ao grupo controle. Esses resultados mostram que a espécie nativa Astyanax altiparanae é um ótimo bioindicador para avaliar a toxicidade de compostos químicos no ambiente aquático, principalmente aqueles utilizados na agricultura, como é o fungicida Ridomil, reforçando assim a conscientização sobre o risco ambiental dos agrotóxicos

DESEMPENHO DE ALEVINOS DE TILÁPIA (OREOCHROMIS NILOTICUS) SUBMETIDOS A DIFERENTES FONTES DE ALIMENTAÇÃO

A piscicultura no Brasil apresenta um grande crescimento, tornando-se em algumas regiões do país, uma fonte importante para produtores. A espécie Oreochromis nilotticus popularmente conhecida como tilápia, apresenta bom crescimento em sistemas de piscicultura. Assim o presente trabalho objetivou avaliar a eficiência da adubação orgânica e da ração comercial como fontes alimentares em alevinos de tilápia, a fim de verificar qual o seu rendimento e qual o melhor custo benefício em um período de 60 dias. Foram utilizados 90 alevinos de um lote padrão divididos em 3 unidades experimentais medindo 10 m3. A biometria dos alevinos foi realizada a cada 30 dias. Os resultados do presente estudo demonstraram que houve diferenças significativas entre os tratamentos (p < 0,05), com os alevinos alimentados com ração comercial, apresentando os melhores índices de crescimento. Os alevinos submetidos à adubação orgânica revelaram índices inferiores se comparado com os alevinos tratados com ração, entretanto esta alternativa alimentar se mostrou eficiente, tendo em vista que as tilápias são filtradoras e acabam utilizando o plâncton como alimento inicial

AVALIAÇÃO DOS EFEITOS GENOTÓXICOS DO FUNGICIDA RIDOMIL EM Astyanax altiparanae (PISCES, CHARACIFORMES)

O fungicida Ridomil é classificado como um agrotóxico muito perigoso ao meio ambiente (classe II), de alta persistência e alto potencial de deslocamento no solo, podendo atingir águas subterrâneas. É uma mistura do fungicida sistêmico, Metalaxil-M, e do fungicida de contato Mancozebe, cujos efeitos tóxicos já foram estudados em diversas espécies, porém até o momento nenhum estudo avaliou o potencial genotóxico deste agrotóxico em peixes. No Brasil, ainda são poucos os estudos visando estudar os efeitos dos agentes xenobióticos em espécies nativas, assim no presente estudo é avaliada a toxicidade do pesticida Ridomil na espécie Astyanax altiparanae vulgarmente conhecida como "lambari" . Os efeitos genotóxicos de uma exposição aguda (96 h) em concentrações de 0,4 mg/L e 0,8 mg/L foram avaliados através do teste do micronúcleo pí­sceo em eritrócitos de 45 indiví­duos. Os resultados apontaram para um efeito genotóxico, pois se observaram diferenças significativas entre os grupos (p < 0,05) frente à contaminação, uma vez que houve aumento na frequência de alterações morfológicas nucleares nos grupos contaminados em comparação ao grupo controle. Esses resultados mostram que a espécie nativa Astyanax altiparanae é um ótimo bioindicador para avaliar a toxicidade de compostos quí­micos no ambiente aquático, principalmente aqueles utilizados na agricultura, como é o fungicida Ridomil, reforçando assim a conscientização sobre o risco ambiental dos agrotóxicos