Detection of Plasmopara halstedii in sunflower seeds: A case study using molecular testing

Plasmopara halstedii (Farl.) Berl. & De Toni causing downy mildew of sunflower is responsible for considerable economic losses worldwide. Because P. halstedii can be seed-transmitted, monitoring of seeds for pathogen contamination is important for the sunflower seed trade. The relevance of asymptomatic or latent infections as factors of disease spread have not been studied by molecular techniques. A molecular marker based on a putative effector gene of P. halstedii was used to examine the pathogen´s presence in asymptomatic sunflowers growing near patches of mildewed plants in naturally infected fields. The method based on conventional PCR was highly sensitive for detection of P. halstedii in DNA from whole seeds. By the application of this protocol, we found that all seed samples obtained from symptomatic plants amplified the expected fragment, whereas the diagnostic marker identified the presence of pathogen in one out of 21 asymptomatic plants. Possible uses of this marker to detect downy mildew in seed from asymptomatic plants or for race identification are discussed.Fil: Martínez, Ana Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida. Universidad Nacional del Sur. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida; ArgentinaFil: Quiroz, Facundo José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Agencia de Extensión Rural Balcarce; ArgentinaFil: Carrera, Alicia Delia. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía; Argentin

Genetic characterization of Plasmopara halstedii populations in Argentina using simple sequence repeats (SSR) and effectorbased markers

Argentina is the fourth leading producing country of sunflower worldwide. Sunflower downy mildew, caused by the pathogenPlasmopara halstedii, is an economically important disease of sunflower. Since 2012, P. halstedii epiphytotics were identified inseveral production regions of Argentina. However, the genetic diversity of the pathogen in Argentina remains largely unknown. Fortytwofield isolates from Argentina were analyzed using eight loci SSR. The number of alleles per locus (APL), the expected (HE) andobserved heterozygosity (HO) were determined. SSR data were analyzed with regions (two), collection years (four) and races (six) asvariation sources (AMOVA), and the population structure was defined (Bayesian method). DNA sequences of two effector genes wereobtained from two isolates per race and the polymorphisms were analyzed (ClustalW). The mean APL was 2.6, varying from 1 to 4(total 21). The highest number of alleles and races were found in 2017. Average HO and HE were 0 and 0.369, respectively. Geneticvariation was observed among regions (7%) and years (32%), but not between races. Based on effectors, local races were similar to agroup of French races, without variation within the ARG races. Increased genetic variability observed in recent years seems to parallelwith the emergence of novel races reducing fungicides and/or R genes efficacy. The effector study suggests that the races evolutiondepends on country specific factors.Fil: Martínez, Ana Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida. Universidad Nacional del Sur. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía; Argentina. North Dakota State University; Estados UnidosFil: Garayalde, Antonio Francisco. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Matemática; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida. Universidad Nacional del Sur. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida; ArgentinaFil: Quiroz, Facundo José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Carrera, Alicia Delia. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida. Universidad Nacional del Sur. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida; ArgentinaAmerican Phytopathological Society North Central Division Meeting​IowaEstados UnidosAmerican Phytopathological Societ

Sensitivity of sunflower cultivars with and without Clearfield technology to the presence of diclosulam residues in the soil

El girasol puede sufrir carryover por diclosulam aplicado en soja como antecesor. El objetivo fue evaluar la sensibilidad a campo de híbridos de girasol CL, CL Plus y No CL, a distintas concentraciones de diclosulam en un suelo de Balcarce, y determinar los rangos de tolerancia. Se realizó un experimento en la EEA INTA Balcarce (Argentina) en 2017/2018, donde se evaluaron los cultivares de girasol Paraíso 102 CL (CL), Paraíso 1600 CL Plus (CL Plus) y Syn 3825 (no CL), expuestos a un rango de concentraciones de diclosulam entre 0 y 8,71 µg kg-1 de suelo. Se evaluaron variables de crecimiento, rendimiento y calidad y se construyeron regresiones entre estas variables y las concentraciones de diclosulam en el suelo que permitieron estimar el EC50 y EC10 (concentración de herbicida que reduce el valor de una variable en un 50% o un 10%, respectivamente). La sensibilidad del girasol a los residuos de diclosulam, mostró el siguiente patrón para todas las variables evaluadas excepto el número de plantas a emergencia: CL < CL Plus < no CL. La concentración de residuos de diclosulam en el suelo que no redujo significativamente el rendimiento respecto al testigo estuvo comprendida en el rango entre 0 y 0,9 µg kg-1 para no CL y CL Plus. El rendimiento de CL, en cambio, no fue afectado por ninguna concentración. El contenido de materia grasa fue afectado en los tres híbridos, observándose las mayores reducciones (15%) en no CL a concentraciones de 4,6 a 8,7 µg kg-1.Sunflower can suffer carryover by diclosulam applied on soybean predecessor. The objective was to evaluate sensitivity of CL, CL Plus and No CL sunflower hybrids to different soil concentrations of diclosulam under field conditions in Balcarce, and to determine tolerance ranges. The experiment was carried out in the EEA INTA Balcarce (Argentina) in 2017/2018, where Syn 3825 (non-CL), Paraiso 102 CL and Paraiso 1600 Cl Plus sunflower cultivars were exposed to a range of soil concentrations of diclosulam between 0 to 8,71 µg kg-1 of soil. Variables of plant growth, grain yield and grain quality were evaluated and regressions models were developed between variables and soil concentrations of diclosulam to estimate EC50 and EC10 (herbicide concentration which reduces a variable value in a 50 or 10%, respectively). Diclosulam-sensitivity of sunflower cultivars showed the following pattern for most of the variables evaluated, except for the density of plants at emergence: CL < CL Plus < non-CL. Non-significant yield reductions were recorded in non-CL and CL Plus cultivars at 0 and 0,9 µg kg-1 of diclosulam in soil. Instead, CL yield was not affected at any concentration. Grain oil content was negatively affected by the herbicide, the larger reduction (15%) was recorded in the non-CL cultivar at soil concentrations of diclosulam of 4,6 to 8,7 µg kg-1.Fil: Divita, Ignacio Federico. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Bedmar, Francisco. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Gianelli, Valeria. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Agencia de Extensión Rural Balcarce; ArgentinaFil: Quiroz, Facundo José. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Agencia de Extensión Rural Balcarce; ArgentinaFil: Monterrubianessi, Gloria. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Medici, Sandra Karina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Instituto de Investigaciones En Produccion, Sanidad y Ambiente. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones En Produccion, Sanidad y Ambiente.; Argentin

Exploring sunflower responses to Sclerotinia head rot at early stages of infection using RNA-seq analysis

Sclerotinia head rot (SHR), caused by the necrotrophic fungus Sclerotinia sclerotiorum, is one of the most devastating sunflower crop diseases. Despite its worldwide occurrence, the genetic determinants of plant resistance are still largely unknown. Here, we investigated the Sclerotinia-sunflower pathosystem by analysing temporal changes in gene expression in one susceptible and two tolerant inbred lines (IL) inoculated with the pathogen under field conditions. Differential expression analysis showed little overlapping among ILs, suggesting genotype-specific control of cell defense responses possibly related to differences in disease resistance strategies. Functional enrichment assessments yielded a similar pattern. However, all three ILs altered the expression of genes involved in the cellular redox state and cell wall remodeling, in agreement with current knowledge about the initiation of plant immune responses. Remarkably, the over-representation of long non-coding RNAs (lncRNA) was another common feature among ILs. Our findings highlight the diversity of transcriptional responses to SHR within sunflower breeding lines and provide evidence of lncRNAs playing a significant role at early stages of defense.Fil: Fass, Mónica Irina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Rivarola, Maximo Lisandro. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Ehrenbolger, Guillermo Federico. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Maringolo, Carla A.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Montecchia, Juan Francisco. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Quiroz, Facundo José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: García García, Francisco. Centro de Investigaciones Príncipe Felipe; EspañaFil: Dopazo Blázquez, Joaquín. Hospital Virgen del Rocio; EspañaFil: Hopp, Horacio Esteban. Universidad de Buenos Aires; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Heinz, Ruth Amelia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Paniego, Norma Beatriz. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Lia, Verónica Viviana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; Argentin

Black stem by Phoma macdonaldii affected ecophysiological components that determine grain yield in sunflower (Helianthus annuus L.)

Black stem (BS) of sunflower (Helianthus annuus L.) by Phoma macdonaldii has been reported in many production areas of the world associated to losses in grain yield. Their symptoms could be confounded with natural leaf senescence because they appear during the reproductive period. The objective of this work was to evaluate the effect of BS by P. macdonaldii on grain yield and the ecophysiological components determining it. Two field experiments were conducted under natural inoculation of P. macdonaldii. Two hybrids were protected or not with a combination of leaf fungicides. Severity of BS, leaf area, leaf senescence, intercepted PAR and dry matter were periodically measured. Nitrogen nutrition index was estimated at flowering. At physiological maturity, BS incidence, grain number and weight, and oil concentration were also measured. Presence of other diseases was low or null. Incidence of BS ranged from 2.9% to 49% within the protection treatments, hybrids and experiments. The protected treatment diminished BS in both hybrids and experiments in comparison with the unprotected one. Plants from protected treatment showed higher leaf area, leaf area duration, intercepted PAR, radiation use efficiency, dry matter and grain yield and their components, than those from unprotected treatment. Oil concentration was not affected by the disease. Differences in all studied variables were mainly supported for differences in mid and upper leaves. Black stem was related to premature leaf senescence and thus to reduction of intercepted radiation. An effect not only on the efficiency of radiation interception but also in the efficiency of the radiation conversion was observed.Fil: Quiroz, Facundo José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata; ArgentinaFil: Edwards Molina, Juan Pablo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Dosio, Guillermo Aníbal Adrián. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata; Argentin

Increases in the source to sink ratio related to a higher carbohydrate concentration reduce phoma black stem in sunflower

Phoma black stem (BS), caused by Leptosphaeria lindquistii (synonymous Phoma macdonaldii Boerema) is an endemic disease of sunflower in Argentina and occurs worldwide. The expression of some diseases is related to the translocation of photosynthates during grain fill, which in turn is related to the source to sink ratio (SSr). The aim of this study was to assess the effect of total soluble carbohydrates (TSC) in the stem, and determine the effect of changes in SSr during the grain filling period on the incidence and severity of BS. A range of SSr and TSC was obtained by artificial shading and performing grain excision treatments, in two sunflower hybrids. A positive relationship was determined between SSr and TSC. Both the incidence and severity index of BS decreased with increasing SSr and TSC. This response was affected by the conditions of the experiment and the leaf position, for both incidence and severity of BS, respectively. Rainy days and leaf position (leaf age) were the main factors affecting the relationship between BS and TSC. Results contribute to understanding the physiological basis of the interaction between L. lindquistii and sunflower, and suggest how breeding for particular traits might result in improved cultivars. The results should also be useful for guiding management of the disease.Fil: Nuñez Bordoy, Iris Evangelina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Quiroz, Facundo José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Dosio, Guillermo Aníbal Adrián. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Variación molecular de Plasmopara halstedii en Argentina mediante marcadores basados en repeticiones de secuencia simple (SSR)

Con el objetivo de explorar la variabilidad del patógeno P. halstedii (Farl.) Berl. et de Toni, causante del mildiu de girasol en Argentina, se emplearon ocho loci SSR en 42 aislamientos colectados en 2013 a 2018 de las regiones Centro (Buenos Aires) y Norte (Chaco y Santa Fe). Se determinaron las razas de los aislamientos en ensayos de patogenicidad ante líneas diferenciales de girasol. Se calculó el número de alelos por locus, heterocigosis observada y esperada (Ho y He). La matriz de distancia genética se sometió al análisis AMOVA, con regiones (dos), años (cuatro) y razas (seis) como fuentes de variación. Se definieron grupos poblacionales por método bayesiano. El número medio de alelos por locus fue 2,6 variando de 1 a 4 (21 totales). En 2017 se observó el mayor número de alelos y de razas. Ho y He promedio fueron 0 y 0,369, respectivamente. A través del AMOVA, se encontró variación genética atribuible a diferencias entre regiones (7 %) y entre años (32 %), pero no se encontró diferenciación genética asociada a razas. Asimismo, no se observó correlación entre distancia geográfica y genética (Mantel, r= 0,114). El análisis de estructura poblacional del P. halstedii en Argentina mostró cuatro grupos, explicados principalmente por el factor año. La ausencia de heterocigotos se asocia a la reproducción sexual predominantemente homotálica de P. halstedii. El incremento de la variabilidad genética observado en los últimos años podría estar relacionado con la reciente aparición de nuevas variantes patogénicas en nuestro país, causantes de pérdida de eficacia de genes de resistencia y/o de fungicidas.Fil: Martínez, Ana Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida. Universidad Nacional del Sur. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida; ArgentinaFil: Garayalde, Antonio Francisco. Universidad Nacional del Sur; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida. Universidad Nacional del Sur. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida; ArgentinaFil: Petrucelli, Macarena. Universidad Nacional de Mar del Plata; ArgentinaFil: Erreguerena, Ignacio Antonio. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Quiroz, Facundo José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Carrera, Alicia Delia. Universidad Nacional del Sur; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida. Universidad Nacional del Sur. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida; ArgentinaXLVIII Congreso Argentino de GenéticaMar del PlataArgentinaSociedad Argentina de Genética

Impacto de las enfermedades foliares sobre variables fisiológicas determinantes del rendimiento del girasol ante diferentes situaciones de cultivo

La mancha de la hoja por Alternaria (ALT) y la mancha negra del tallo por Phoma (MNT) son enfermedades foliares endémicas del girasol en Argentina. MNT disminuye regularmente el rendimiento del girasol de alto potencial del sur de Buenos Aires. La variabilidad ambiental entre años y la fecha de siembra inciden en la ocurrencia de estas enfermedades, sin embargo, la información sobre su efecto es escasa. El objetivo de este trabajo fue evaluar la ocurrencia de estas enfermedades y su impacto sobre el rendimiento, el peso y número de aquenios y el contenido de aceite, en diferentes ambientes (años y fechas de siembra) del sur de Buenos Aires, Argentina. Se realizaron cinco experimentos en la Estación Experimental Agropecuaria del Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria en Balcarce en los años 2003, 2005, 2007, 2008 y 2009 en condiciones de campo e inoculación natural. Se evaluaron cinco híbridos, protegidos o no protegidos con una mezcla de fungicidas foliares. Tres experimentos incluyeron dos fechas de siembra (temprana y tardía). Se midió el área foliar, la incidencia y severidad de las enfermedades, el rendimiento, el peso y número de aquenios y el contenido de aceite. MNT fue la enfermedad de mayor prevalencia e incidencia (19 a 81%). Con menor frecuencia se observó presencia severa de ALT (0,3 a 10%) y ocurrencia atípica de roya negra por Puccinia helianthi (RN; 0 a 23%) en 2007. Las mayores precipitaciones y humedad relativa observadas en fechas de siembra tardías se correspondieron con aumento en la incidencia o severidad de síntomas (> 70%) principalmente de ALT. MNT, ALT y RN disminuyeron la duración del área foliar principalmente en hojas del estrato medio o superior, mientras que la protección con fungicidas redujo su efecto. MNT fue la enfermedad que más se asoció con la disminución del peso y número de aquenios. El contenido de aceite disminuyó en los tratamientos testigo en asociación con la siembra tardía y la presencia de ALT. El efecto de las enfermedades foliares sobre el rendimiento (11 a 17%), el peso y número de aquenios y el contenido de aceite varió con el ambiente de experimentación y en relación con la incidencia de MNT y la ocurrencia de epifitias severas de RN y ALT. La aplicación de fungicidas foliares mostró un beneficio productivo.Leaf spot by Alternaria (ALT) and black stem spot by Phoma (BS) are endemic leaf diseases of sunflower in Argentina. BS regularly reduced the yield of high potential sunflower of the south of Buenos Aires. Environmental variability between years and sowing date affect the occurrence of these diseases however the information about its effect is scarce. The objective of this work was to assess the occurrence and importance of leaf diseases on yield, number and weight of achenes, and oil content, in different environments (years and sowing dates) in the south of Buenos Aires, Argentina. Five experiments were performed at the field station of INTA Balcarce in the years 2003, 2005, 2007, 2008 and 2009 under field conditions and natural inoculation. Five hybrids, protected or not protected with a mixture of foliar fungicides, were evaluated. Three experiments included two sowing dates (early and late). Leaf area, incidence and severity of diseases, yield, number and weight of achenes, and oil content were measured. BS was the disease with the highest prevalence and incidence (19 to 81%). Less frequently, severe ALT (0.3 to 10%) and atypical black rust by Puccinia helianthi (BR, 0 to 23%) were observed in 2007. The higher rainfall and relative humidity observed at late sowing dates corresponded to an increase in incidence or severity of symptoms (> 70%), mainly of ALT. BS, ALT and BR decreased leaf area duration mainly in leaves of medium or higher strata, while fungicide protection reduced its effect. BS was the disease that was most associated with decreased weight and number of achenes. The oil content decreased in the control treatments in association with late sowing and the presence of ALT. The effect of foliar diseases on yield (11 to 17 %), the number and weight of achenes, and the oil content varied with experimental environment and in relation to the incidence of BS and the occurrence of severe epiphytes of BR and ALT. Application of foliar fungicides resulted in productive benefit.Fil: Quiroz, Facundo José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Agencia de Extensión Rural Balcarce; ArgentinaFil: Velazquez, Luciano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Lázzaro, Natalia Soledad. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Agencia de Extensión Rural Balcarce; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Escande, Alberto Raul. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Agencia de Extensión Rural Balcarce; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Aguirrezábal, Luis Adolfo Nazareno. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Dosio, Guillermo Aníbal Adrián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentin

Methodologies for Plasmopara halstedii Research

The objective of this work was to find practical procedures to overcomemethodological drawbacks encountered during studies on sunflower downy mildew.Techniques for recovering living isolates of Plasmopara halstedii from the fieldand for the preservation of infected leaf samples for furthermolecular analysis weredeveloped. A Polymerase Chain Reaction (PCR)-based test for the detection of P.halstedii in sunflower leaves and a method to remove azoxystrobin from fungicidetreatedseeds are proposed. In situ-inoculations of pre-germinated seeds allowedthe recovery of living isolates from the field. Three sample-preservation methodswere evaluated (silica, heating and lyophilization) resulting in high yield andquality of the DNA extract. It was detected the presence of the pathogen insymptomless leaves through PCR using molecular markers based on expressed sequence tags. A treatment using sodium hypochlorite is recommended for theremoval of azoxystrobin from fungicide treated seeds.Fil: Martínez, Ana Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida. Universidad Nacional del Sur. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida; ArgentinaFil: Anderson, Freda Elizabeth. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida. Universidad Nacional del Sur. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida; ArgentinaFil: Quiroz, Facundo José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Garayalde, Antonio Francisco. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Matemática; ArgentinaFil: Erreguerena, Ignacio Antonio. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Armando, Lorena Vanesa. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía; ArgentinaFil: Huguet, Norma. Sunflower pathology services; ArgentinaFil: Carrera, Alicia Delia. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía; Argentin