O efeito de extratos de plantas medicinais na quimiotaxia leucocitária in vitro

Orientador : Cid Aimbiré de Moraes SantosCo-orientadora : Almeriane Maria Weffort SantosDissertaçao (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciencias da SaúdeResumo: Vários métodos in vitro têm sido empregados para a investigação das atividades biológicas de plantas usadas na medicina popular para o tratamento de processos inflamatórios. Os eventos associados à resposta inflamatória são complexos, sendo a quimiotaxia uma das etapas fundamentais desse processo, recrutando leucócitos para o local da lesão. Neste trabalho, investigou-se a influência dos extratos hidroalcóolicos de Chamomilla recutita (L.) Rauschert, Rauvolfia sellowii Muell. Arg, Hybanthus bigibbosus (St.-Hil) Hassler e Anchieta pyrifolia (Mart.) G. Don, conhecidas popularmente como camomila, pau-pra-tudo, canela-de-veado e cipó-suma, respectivamente, sobre a quimiotaxia de leucócitos humanos, estimulados a migrar contra um gradiente de caseína, utilizando-se o método de Boyden. Dexametasona foi utilizada como controle de inibição do procedimento experimental. Os resultados aqui apresentados demonstraram efeito inibitório significativo sobre a migração de polimorfonucleares induzida por caseína para todas as plantas testadas. Entretanto, essa atividade variou de intensidade conforme a concentração e a espécie estudada. Para a camomila, onde analisou-se uma amostra produzida em solo local e uma importada, observou-se um efeito inibitório máximo de cerca de 34%, para ambas, nas doses de 10 e 0,1 mg/ml, respectivamente, comparável aos 31% exercido pela dexametasona (10 M),. Para os extratos de pau-pra-tudo, canela-de-veado e cipó-suma, esses valores foram de aproximadamente 20, 15 e 8%, nas doses de 1000, 10 e 1ng/ml, respectivamente. De particular interesse, além do surpreendente efeito inibitório do extrato de camomila sobre a quimiotaxia dos leucócitos, foram os resultados observados quando essa atividade pôde ser parcialmente bloqueada pelo pré-tratamento dos leucócitos com as drogas morfina e naloxona, sugerindo a mediação desses efeitos via receptores opióides. Análise da composição do óleo essencial de ambas, com o objetivo de comparar qualitativa e quantitativamente seus componentes ativos, demonstrou inversão na constituição relativa dos óxidos derivados do a-bisabolol. Embora estudos mais aprofundados sejam necessários, os resultados aqui apresentados e as informações deles derivadas podem servir como uma base preliminar de dados, contribuindo para esclarecer a atividade antiinflamatória atribuída a essas plantas na medicina caseira. Palavras chave: plantas medicinais, migração leucocitária, receptores opióides, caseína, inflamação, quimiotaxia.Abstract: Several in vitro methods have been used for the investigation of the biological activities of herbal plants used in folk medicine for the treatment of inflammatory conditions. The events associated with the inflammatory response are complex, and chemotaxis is just one of the fundamental steps of such process, which recruits leukocytes to the inflammatory sites. In this study, we have investigated the ability of hydroethanolic extracts from Chamomilla recutita (L.) Rauschert, Rauvolfia sellowii Muell. Arg, Hybanthus bigibbosus (St.-Hil) Hassler and Anchieta pyrifolia (Mart) G. Don, locally known as camomila, pau-pra-tudo, canela-de-veado, and cipo-suma, respectively, in interfering with the human leukocytes migration induced by casein, using the Boyden chamber method. Dexamethasone has been used as a positive control for leukocyte inhibition in the same experimental approach. The data herein presented showed a significant inhibition of the caseininduced polymorphonuclear leukocytes migration for all plants studied. However, the intensity of such activity was variable according to the dose and plant tested. For camomila, the maximum inhibition effect was -34%, similar to the 31% found for dexamethasone. For pau-pra-tudo, canela-de-veado, and cipo-suma extracts the values found were 20, 15, and 8%, for the doses of 1000, 10, and 1^g/ml, respectively. Of particular interest, apart from the unexpected leukocyte inhibitory effects of camomila extract, were the results observed after treating these cells with the drugs morphine and naloxone, in which such activity could be partially blocked, suggesting that these effects might be opioid receptors' mediated. Analysis of the essential oil of both national and imported samples, with the aim of comparing the presence of active components, has shown an inversion of the relative constitution of the a-bisabolol derivative oxides. Although further studies are needed, the results and suggestions presented in this study may be useful to clarify the anti-inflammatory properties of these herbal medicines, supporting their ethno-medical application in the treatment of inflammation diseases. Key words: herbal plants, chemotaxis, leukocyte migration, opioid receptors, casein, inflammation, chemotaxis

Zika Virus Infection at Different Pregnancy Stages: Anatomopathological Findings, Target Cells and Viral Persistence in Placental Tissues

Zika virus (ZIKV) infection in humans has been associated with congenital malformations and other neurological disorders, such as Guillain-Barré syndrome. The mechanism(s) of ZIKV intrauterine transmission, the cell types involved, the most vulnerable period of pregnancy for severe outcomes from infection and other physiopathological aspects are not completely elucidated. In this study, we analyzed placental samples obtained at the time of delivery from a group of 24 women diagnosed with ZIKV infection during the first, second or third trimesters of pregnancy. Villous immaturity was the main histological finding in the placental tissues, although placentas without alterations were also frequently observed. Significant enhancement of the number of syncytial sprouts was observed in the placentas of women infected during the third trimester, indicating the development of placental abnormalities after ZIKV infection. Hyperplasia of Hofbauer cells (HCs) was also observed in these third-trimester placental tissues, and remarkably, HCs were the only ZIKV-positive fetal cells found in the placentas studied that persisted until birth, as revealed by immunohistochemical (IHC) analysis. Thirty-three percent of women infected during pregnancy delivered infants with congenital abnormalities, although no pattern correlating the gestational stage at infection, the IHC positivity of HCs in placental tissues and the presence of congenital malformations at birth was observed. Placental tissue analysis enabled us to confirm maternal ZIKV infection in cases where serum from the acute infection phase was not available, which reinforces the importance of this technique in identifying possible causal factors of birth defects. The results we observed in the samples from naturally infected pregnant women may contribute to the understanding of some aspects of the pathophysiology of ZIKV

O efeito de extratos de plantas medicinais na quimiotaxia leucocitária in vitro

Orientador : Cid Aimbiré de Moraes SantosCo-orientadora : Almeriane Maria Weffort SantosDissertaçao (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciencias da SaúdeResumo: Vários métodos in vitro têm sido empregados para a investigação das atividades biológicas de plantas usadas na medicina popular para o tratamento de processos inflamatórios. Os eventos associados à resposta inflamatória são complexos, sendo a quimiotaxia uma das etapas fundamentais desse processo, recrutando leucócitos para o local da lesão. Neste trabalho, investigou-se a influência dos extratos hidroalcóolicos de Chamomilla recutita (L.) Rauschert, Rauvolfia sellowii Muell. Arg, Hybanthus bigibbosus (St.-Hil) Hassler e Anchieta pyrifolia (Mart.) G. Don, conhecidas popularmente como camomila, pau-pra-tudo, canela-de-veado e cipó-suma, respectivamente, sobre a quimiotaxia de leucócitos humanos, estimulados a migrar contra um gradiente de caseína, utilizando-se o método de Boyden. Dexametasona foi utilizada como controle de inibição do procedimento experimental. Os resultados aqui apresentados demonstraram efeito inibitório significativo sobre a migração de polimorfonucleares induzida por caseína para todas as plantas testadas. Entretanto, essa atividade variou de intensidade conforme a concentração e a espécie estudada. Para a camomila, onde analisou-se uma amostra produzida em solo local e uma importada, observou-se um efeito inibitório máximo de cerca de 34%, para ambas, nas doses de 10 e 0,1 mg/ml, respectivamente, comparável aos 31% exercido pela dexametasona (10 M),. Para os extratos de pau-pra-tudo, canela-de-veado e cipó-suma, esses valores foram de aproximadamente 20, 15 e 8%, nas doses de 1000, 10 e 1ng/ml, respectivamente. De particular interesse, além do surpreendente efeito inibitório do extrato de camomila sobre a quimiotaxia dos leucócitos, foram os resultados observados quando essa atividade pôde ser parcialmente bloqueada pelo pré-tratamento dos leucócitos com as drogas morfina e naloxona, sugerindo a mediação desses efeitos via receptores opióides. Análise da composição do óleo essencial de ambas, com o objetivo de comparar qualitativa e quantitativamente seus componentes ativos, demonstrou inversão na constituição relativa dos óxidos derivados do a-bisabolol. Embora estudos mais aprofundados sejam necessários, os resultados aqui apresentados e as informações deles derivadas podem servir como uma base preliminar de dados, contribuindo para esclarecer a atividade antiinflamatória atribuída a essas plantas na medicina caseira. Palavras chave: plantas medicinais, migração leucocitária, receptores opióides, caseína, inflamação, quimiotaxia.Abstract: Several in vitro methods have been used for the investigation of the biological activities of herbal plants used in folk medicine for the treatment of inflammatory conditions. The events associated with the inflammatory response are complex, and chemotaxis is just one of the fundamental steps of such process, which recruits leukocytes to the inflammatory sites. In this study, we have investigated the ability of hydroethanolic extracts from Chamomilla recutita (L.) Rauschert, Rauvolfia sellowii Muell. Arg, Hybanthus bigibbosus (St.-Hil) Hassler and Anchieta pyrifolia (Mart) G. Don, locally known as camomila, pau-pra-tudo, canela-de-veado, and cipo-suma, respectively, in interfering with the human leukocytes migration induced by casein, using the Boyden chamber method. Dexamethasone has been used as a positive control for leukocyte inhibition in the same experimental approach. The data herein presented showed a significant inhibition of the caseininduced polymorphonuclear leukocytes migration for all plants studied. However, the intensity of such activity was variable according to the dose and plant tested. For camomila, the maximum inhibition effect was -34%, similar to the 31% found for dexamethasone. For pau-pra-tudo, canela-de-veado, and cipo-suma extracts the values found were 20, 15, and 8%, for the doses of 1000, 10, and 1^g/ml, respectively. Of particular interest, apart from the unexpected leukocyte inhibitory effects of camomila extract, were the results observed after treating these cells with the drugs morphine and naloxone, in which such activity could be partially blocked, suggesting that these effects might be opioid receptors' mediated. Analysis of the essential oil of both national and imported samples, with the aim of comparing the presence of active components, has shown an inversion of the relative constitution of the a-bisabolol derivative oxides. Although further studies are needed, the results and suggestions presented in this study may be useful to clarify the anti-inflammatory properties of these herbal medicines, supporting their ethno-medical application in the treatment of inflammation diseases. Key words: herbal plants, chemotaxis, leukocyte migration, opioid receptors, casein, inflammation, chemotaxis

Comparison of chemical constituents of Chamomilla recutita (L.) rauschert essential oil and its anti-chemotactic activity

Several essential oil samples from dried flower-heads of Chamomilla recutita (L.) Rauschert, grown and commercially available around Curitiba metropolitan area, South of Brazil, were analyzed by GC-MS and the chemical constituents were compared with an Egyptian sample obtained under similar conditions and used as a control. The local grown herbs showed levels of essential oil below the standards recommended by the Brazilian Pharmacopoeia. Also, differences in their composition as well as in the quantity of several components were found such as the unexpected inversion of the relative constitution of the A and B alpha-bisabolol oxides. Of particular interest was the striking effect of the chamomile extracts upon human leukocyte chemotaxis, a biological anti-inflammatory activity not reported before, in which cell migration was in vitro inhibited at the same level as showed by dexamethasone.Óleos essenciais extraídos de amostras de Chamomilla recutita (l.) Rauschert cultivadas e comercializadas na região metropolitana de Curitiba, sul do Brasil, foram analisadas por cromatografia com fase gasosa acoplada à espectrometria de massa e seus constituintes químicos comparados com uma amostra egípcia, usada como controle. A quantidade de óleo essencial obtida das amostras locais foi abaixo do padrão recomendado pela Farmacopéia Brasileira IV. Observou-se, também, diferenças na composição química desses óleos, assim como na quantidade relativa dos constituintes, como os óxidos A e B do alfa-bisabolol. De particular interesse foram os efeitos inibidores dos extratos de camomila sobre a quimiotaxia de leucócitos humanos induzida por caseína, efeito biológico descrito pela primeira vez e semelhante ao promovido pela dexametasona

Reemergence of Dengue Virus Serotype 3, Brazil, 2023

We characterized 3 autochthonous dengue virus serotype 3 cases and 1 imported case from 2 states in the North and South Regions of Brazil, 15 years after Brazil's last outbreak involving this serotype. We also identified a new Asian lineage recently introduced into the Americas, raising concerns about future outbreaks

Reemergence of Dengue Virus serotype 3, Brazil, 2023

Fundação Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brazil / Fundação Oswaldo Cruz. Manaus, AM, Brazil.Centers for Disease Control and Prevention. San Juan, PR, USA.Laboratório Central de Saúde Pública de Roraima. Boa Vista, RR, Brazil.Laboratório Central de Saúde Pública de Roraima. Boa Vista, RR, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Manaus, AM, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Manaus, AM, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Manaus, AM, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Manaus, AM, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Manaus, AM, Brazil.Fundação de Vigilância em Saúde Dra. Rosemary Costa Pinto. Manaus, AM, Brazil.Fundação de Medicina Tropical Dr Heitor Vieira Dourado. Manaus, AM, Brazil.Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde e Ambiente. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, Brasil.Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde e Ambiente. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, Brasil.Laboratório Central de Saúde Pública do Paraná. Curitiba, PR, Brazil.Laboratório Central de Saúde Pública do Paraná. Curitiba, PR, Brazil.Laboratório Central de Saúde Pública do Paraná. Curitiba, PR, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, BrazilFundação Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Recife, PE, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Recife, PE, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Curitiba, PR, Brazil.Universidade Federal do Espírito Santo. Alegre, ES, Brazil.Florida Department of Health. Tampa, FL, USA.Florida Department of Health. Tampa, FL, USA.Centers for Disease Control and Prevention. San Juan, PR, USA.Fundação Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brazil.We characterized 3 autochthonous dengue virus serotype 3 cases and 1 imported case from 2 states in the North and South Regions of Brazil, 15 years after Brazil’s last outbreak involving this serotype. We also identified a new Asian lineage recently introduced into the Americas, raising concerns about future outbreaks