Hábito de crescimento de Colletotrichum gossypii e C. gossypii var. Cephalosporioides em sementes de algodoeiro Growth habit of Colletotrichum gossypii and C. Gossypii var. Cephalosporioides on cotton seeds

Observações sobre o hábito de crescimento de Colletotrichum gossypii e C. gossypii var. cephalosporioides em sementes de algodoeiro, inoculadas artificialmente e incubadas a 20-22°C durante cinco a sete dias, evidenciaram as seguintes características: (a) em raízes: acérvulos isolados ou em grupos, massa conidial cor branco-suja, alaranjada ou salmão (mais freqüente), setas marrom-escuras, muitas vezes encobertas pela matriz gelatinosa; conídios produzidos também no micélio aéreo ou nas extremidades das setas, onde ficam aderidos, formando pequenos aglomerados; (b) na superfície das sementes: conídios produzidos nos ápices de setas que emergem diretamente do tegumento, ficando aderidos uns aos outros, formando cachos, semelhantes a cadeias, que são vistos brilhantes sob a luz, em estereomicroscópio. As setas férteis são formadas também no micélio aéreo que recobre as sementes, geralmente após cinco dias de incubação. Os acérvulos com massa conidial raramente são visíveis, exceto em sementes danificadas ou mortas. Como característica de C. gossypii, observou-se que as sementes exibem, de modo geral, uma coloração rosada, em decorrência da abundante esporulação; a ausência ou escassez de micélio aéreo e as setas curtas resultam em um crescimento rente ao tegumento e aspecto compacto. Comparativamente, nas sementes com C. gossypii var. cephalosporioides, as setas são mais longas e menos densas; o micélio aéreo com setas férteis ocorre com mais freqüência, conferindo às sementes tonalidades acinzentadas e aspecto solto. A constatação de setas férteis em lesões foliares de ramulose evidencia que, no campo, essas estruturas podem funcionar como autênticos conidióforos, desempenhando um importante papel epidemiológico, ao possibilitar a disseminação dos esporos pelos ventos, a longas distâncias.<br>The growth habit of Colletotrichum gossypii and C. gossypii var. cephalosporioides on artificially inoculated cotton seeds and incubated at 20-22°C during 5 to 7 days, showed the following characteristics: (a) on roots: single or coalesced acervuli, conidial mass dirty white, orange or salmon (frequently), dark brown setae, often covered by the gelatinous matrix; conidia also produced from the aerial mycelium or from the apex of the setae, where some of them remain bound to each other, forming small heads; (b) seed surface: the setae arise directly from the seed coat, bearing conidia in the apex. These conidia are seen slicked together, forming clusters resembling chains, bright under stereomicroscope light. The fertile setae are also produced from the aerial mycelium that cover the seeds, generally 5 days after incubation. The acervuli with conidial matrix are rarely visible, except for the embrionary tissues, under the damaged seed coat or for dead seeds. The seeds with C. gossypii show generally a light pink shade due to the abundant sporulation that cover the setae. The mycelium over the seeds is scanty or absent and the short setae appear flat on the seeds, resulting in a compact growth. In contrast, on seeds with C. gossypii var. cephalosporioides, the setae are taller and less dense. The aerial mycelium with fertile setae is frequent, giving to the seed a grayish and loose, fluffy appearance. The presence of fertile setae also could be seen on foliar lesions of ramulosis. This fact suggest that under field conditions these structures have a function of authentic conidiophores, which play an important epidemiological role on long distance spore dissemination by the wind

Variabilidade genética entre isolados de Colletotrichum gossypii do algodoeiro Genetic variability among the isolates of Colletotrichum gossypii of cotton

O algodoeiro é atacado por Colletotrichum gossypii (CG) e C. gossypii var. cephalosporioides (CGC). Ambos os patógenos são transmitidos pela semente e sua distinção morfológica é extremamente difícil e inconsistente. Tentativas foram feitas no presente trabalho para verificar a variabilidade genética entre CG e CGC através de RAPD-PCR, ERIC- e REP-PCR e PCR-RFLP da região ITS rDNA. Foram utilizados 53 isolados coletados de sementes e folhas de plantas de diferentes cultivares nos estados do Paraná, São Paulo, Mato Grosso, Minas Gerais, e Paraiba, entre 1999 e 2003. Baseado em testes de patogenicidade, vinte e um isolados foram classificados como CG e 32 como CGC. Os resultados obtidos por RAPD-PCR, utilizando-se oito primers, revelaram dois grupos distintos sendo que o primeiro foi formado por 94% dos isolados de sementes e o segundo por 95% dos isolados de folhas. Na análise de ERIC- e REP-PCR, resultados semelhantes a RAPD foram obtidos, sendo que o primeiro grupo foi formado por 93% dos isolados provenientes das sementes e o segundo por 78% dos isolados provenientes das folhas. Quando o produto de amplificação da região ITS rDNA foi digerido com oito enzimas de restrição, um perfil de bandas semelhante para todos os isolados foi obtido. Resultados de RAPD, ERIC- e REP-PCR demonstraram que existem diferenças genéticas entre os isolados provenientes das sementes e aqueles provenientes de parte aérea, e esses dois grupos foram claramente distintos. Estudos futuros devem ser realizados utilizando outras técnicas moleculares para a obtenção de marcadores capazes de distinguir entre isolados de CG e CGC.<br>Cotton is attacked by Colletotrichum gossypii (CG) and C. gossypii var. cephalosporioides (CGC). Both the pathogens are transmitted by seed and their morphological distinction is extremely difficult and inconsistent. In the present study, attempts were made to verify the genetic variability among 53 isolates of CG and CGC using RAPD-PCR, ERIC- and REP-PCR, as well as PCR-RFLP of the ITS rDNA region. Based on pathogenicity tests, 21 isolates were classified as CG and 32 as CGC. RAPD analysis was performed using eight primers and the results revealed two major groups. The first group contained 94% of the isolates originated from seeds and the second contained 95% of the isolates originated from leaves. Similar results were obtained by ERIC- and REP-PCR, where the first group contained 93% of the isolates originated from seeds and the second contained 78% of the isolates originated from leaves. When the amplified product of the ITS rDNA region was digested with eight restriction enzymes, similar banding patterns were observed for all isolates. Results of RAPD, ERIC- and REP-PCR demonstrated the existence of genetic variability among the seed and leaf isolates and these two groups could be clearly distinguished. Further studies need to be performed using other molecular techniques in order to obtain markers that can distinguish CG and CGC isolates in infected seeds

Análise não-paramétrica da sanidade de sementes e índices de eliminação e classificação de genótipos de soja Non-parametric analysis of seed sanity and elimination and ranking indices of soybean genotypes

O objetivo deste trabalho foi avaliar genótipos de soja quanto à sanidade de semente, com um método de análise, pelo qual se obtém índices de sanidade (eliminação e classificação) com base em análise não-paramétrica. Esses índices consistiram em eliminar os genótipos com incidência de patógenos acima de um dado valor, estabelecido pelo experimentador e, em seguida, classificar os genótipos não eliminados, por ordem de incidência desses patógenos. A fim de comprovar sua eficácia, realizaram-se a simulação e comparação desse método com outros, e seu uso em dados de germinação e sanidade das sementes de cultivares e linhagens de soja, de ensaios finais do Programa de Melhoramento de Soja, do Departamento de Fitotecnia, da Universidade Federal de Viçosa, conduzidos no ano agrícola de 2002/2003. Os pesos das variáveis e os limites de corte, utilizados nos índices, foram estabelecidos tendo-se levado em consideração estudos que relacionam a sanidade das sementes e sua germinação. A utilização dos índices propostos permite classificar genótipos de soja, quanto à qualidade sanitária das sementes, e eliminar das análises os genótipos que não atingiram os níveis mínimos requeridos.<br>The objective of this work was to assess soybean genotypes for seed sanity, with a method by which a sanity index (elimination and classification) is obtained based on non-parametric analysis. This index consisted in the elimination of genotypes with pathogen incidence above a certain value, established by the researcher, and then the classification of the noneliminated genotypes in the first step, ordering them according to the incidence of the pathogens. To verify its effectiveness, it was accomplished a simulation study and comparison of this proposed method with others, and its use in germination and sanity data of seeds from soybean lineages and cultivars of final experiments of the Soybean Breeding Program of Departmento de Fitotecnia, Universidade Federal de Viçosa, in 2002/2003 crop season. The weights of the variables and the cut limits used in the index were established considering studies related to seeds sanity and their germinations. The use of the proposed index allows the ranking of soybean genotypes, regarding to the sanitary quality of the seeds, and the elimination from the analyses of the genotypes that have not reached the requested minimum levels