Advantages of Digital Technology in the Assessment of Bone Marrow Involvement by Magnetic Resonance Images

Magnetic resonance imaging (MRI) is the gold standard for evaluating bone marrow (BM). The information provided is a useful tool for obtaining a global map of the contents of the medullary cavity. The applications of this technique to the study of different processes affecting the bone marrow are of great importance to know the extension of disease, to distinguish by image different entities, and to evaluate response to therapies. Actually, machine learning tools aid in the interpretation of images and patterns that are not visible or are unfamiliar to the observer. In addition, integrating clinical, biological, and therapeutic data with imaging using artificial intelligence methods applied to these studies provides a broad perspective and tool that can predict the risk of complications. The systematic inclusion of structured bone marrow MRI reporting is useful to standardize the collected data collaborate in developed algorithms to learning model, and facilitate clinical management and academics collaboration

Valor predictivo del PET-TAC en el seguimiento de la respuesta al tratamiento en Linfoma de Hodgkin

Antecedentes: en la actualidad más del 80 % de los pacientes con Linfoma de Hodgkin (LH) se curan con el tratamiento disponible, sin embargo los importantes efectos adversos a largo plazo, exigen la necesidad de una planificación terapéutica individualizada basada en un método de estadificación precisa, y valoración temprana de la respuesta al tratamiento para lograr la curación al menor coste tóxico posible. El objetivo del presente estudio es evaluar la utilidad y el valor predictivo de la tomografía por emisión de positrones combinado con tomografía axial computarizada (PET-TAC) en la monitorización de la respuesta al tratamiento en el LH. Pacientes y métodos: se realizó un estudio retrospectivo-prospectivo incluyéndose 57 pacientes con LH. Se realizó a cada uno un PET-TAC tras 2 ciclos de quimioterapia y al finalizar el tratamiento. La supervivencia fue representada usando las curvas de Kaplan-Meier. Se utilizó análisis de regresión para valorar la independencia del PET-TAC inicial de los factores pronósticos establecidos. Resultados: tras 2 ciclos de tratamiento 43 de 57 (75,4 %) pacientes presentaron PET-TAC negativo. En 4 pacientes (7 %), el PET-TAC mostraba actividad hipermatobólica positiva. El segundo PET-TAC realizado tras completar tratamiento resultó negativo en la totalidad de los pacientes en estadio I y II, mientras que 6 de los pacientes en estadío avanzado presentaban persistencia de actividad hipermetabólica tras 6 ciclos de tratamiento. Conclusión: en nuestra experiencia la evaluación de la respuesta temprana al tratamiento con PET-TAC en LH es de gran utilidad, siendo un fuerte factor de predicción en la supervivencia libre de progresión (SLP) para esta enfermedad. La realización del segundo PET-TAC al finalizar el tratamiento en los pacientes con estadios I y II y PET-TAC precoz negativo podría considerarse prescindible

Estudio funcional de variantes en el gen GLA: implicación en la heterogeneidad clínica de la enfermedad de Fabry y en su tratamiento

La enfermedad de Fabry (EF) es una alteración de acúmulo lisosomal producida por una deficiencia de la enzima lisosomal ¿-galactosidasa A. Este defecto conlleva a la acumulación de glucoesfingolípidos, Gb3 de forma mayoritaria, en los lisosomas de varios tejidos; principalmente en el epitelio vascular, renal, cardíaco y el sistema nervioso. De acuerdo con el tipo de mutación en el gen GLA (gen que codifica para la síntesis de la ¿-galactosidasa A) y el inicio de las manifestaciones clínicas, los casos de EF se clasifican en dos tipos de fenotipos: el tardío y el clásico. Las manifestaciones clínicas del fenotipo clásico en los varones, incluyen las acroparestesisas; angioqueratomas; hipohidrosis; opacidad corneal y lenticular; disfunción cardiaca; alteraciones renales y del sistema nervioso central. Las mujeres portadoras pueden ser asintomáticas o llegar a desarrollar el fenotipo clásico debido al fenómeno de inactivación del cromosoma X. El diagnóstico en la EF, probablemente, está subestimado debido a la naturaleza no específica de las manifestaciones clínicas asociadas a la enfermedad. El tratamiento en las primeras fases de desarrollo de la enfermedad es muy importante para la mejora de calidad de vida del paciente e impedir secuelas irreversibles. Hasta la fecha se han descrito más de 600 mutaciones causales de EF (ver enlaces), además el gen GLA presenta siete variantes fisiológicas de ayuste alternativo y la alteración del patrón de ayuste, se genera por una gran cantidad de esas mutaciones. Las mutaciones exónicas pueden también alterar el patrón de ayuste, pero no son reconocidas fácilmente. Han sido descritas un gran número de variantes polimórficas del gen GLA pero no se ha demostrado si la herencia de haplotipos formados por la combinación de estas variantes puede causar EF. El haplotipo complejo intrónico (HCI) dentro del gen GLA (IVSO-10C>T, IVS2-76_80del5, IVS4-16A>G, IVS6-22C>T) ha sido asociado a neuropatía de fibra fina y en un estudio de cribado el 8,9% de sujetos con síntomas de EF presenta este haplotipo. El haplotipo IVS2-76_80del5, IVS4-16A>G, IVS6-22C>T ha sido detectado en pacientes con afectación renal. Por otra parte la mutación G183V también ha sido asociada a la EF; esta mutación se encuentra en la junta del exón 3 con el 4 en la región codificante del gen GLA, causando el cambio de aminoácido 183 en la secuencia proteica de la enzima y posiblemente un patrón aberrante de ayuste. La identificación de los pacientes de Fabry en la población general está dificultada por la baja prevalencia de la enfermedad y la naturaleza heterogénea de sus síntomas. El diagnóstico viene determinado por niveles bajos de actividad enzimática y confirmado por el estudio mutacional. El problema es que la enfermedad carece de biomarcadores que reflejen el estado del paciente. El análisis enzimático no es adecuado para el diagnóstico y seguimiento de mujeres heterocigotas, ya que la expresión de la enzima depende del patrón de activación del cromosoma X, o para varones con variantes atípicas de la enfermedad en los que la actividad residual es muy alta. No existe una relación entre el genotipo y el fenotipo que presentan los pacientes. La terapia principal de la enfermedad se basa en la administración de la enzima recombinante humana por vía intravenosa. Aunque la respuesta a la terapia en muchos casos es buena, no refleja una mejora en todas las morbilidades asociadas a la EF. Existen indicios de que hay otros mecanismos implicados en el desarrollo de la enfermedad y el conocimiento molecular de esos mecanismos, puede permitir identificar nuevas dianas terapéuticas para la mejora de la calidad de vida de los pacientes con EF. Teniendo en cuenta estos hechos nos planteamos los siguientes objetivos: 1.-Caracterizar funcionalmente las variantes del haplotipo complejo intrónico (IVSO-10C>T, IVS2-76_80del5, IVS4-16A>G, IVS6-22C>T) y G183V encontradas en un grupo de individuos con y sin síntomas y signos de EF y profundizar en los mecanismos moleculares patológicos relacionados con las diferentes manifestaciones clínicas de la enfermedad. 2.-Identificar los mecanismos epigenéticos relacionados con las diferentes variantes clínicas de la EF. 3.-Buscar nuevos biomarcadores de diagnóstico y seguimiento de la enfermedad. 4.-Realizar una prueba de concepto de aplicación de fármacos hipometilantes en líneas primarias de fibroblastos en la EF

Estudio de factores genéticos de susceptibilidad para el desarrollo de enfermedad de Parkinson

Los avances alcanzados en las últimas décadas respecto a la etiología y fisiopatología de la enfermedad de Parkinson (EP), han sido espectaculares. Los estudios publicados en los últimos años sugieren una posible asociación entre la EP y factores genéticos de susceptibilidad implicados en el desarrollo de la enfermedad, como la presencia de mutaciones en el gen que codifica para la glucocerebrosidasa (GBA), responsables de la enfermedad de Gaucher (EG). En los últimos años, ha aparecido un número creciente de publicaciones que revelan la propensión de una minoría de pacientes de EG a desarrollar EP. La aparición de una variante de EP de comienzo temprano en pacientes con EG, motivó la realización de estudios de prevalencia de mutaciones en el gen GBA en diversas poblaciones de pacientes con EP, con el objetivo de analizar las alteraciones genéticas y las características clínicas asociadas, así como detectar factores que permitan identificar los casos de forma precoz. Aunque la EP ha sido considerada durante mucho tiempo como un trastorno no genético de origen esporádico, estudios recientes han demostrado la importancia de las contribuciones genéticas a la EP, demostrando que los factores genéticos constituyen factores de susceptibilidad o modificadores de la enfermedad, afectando a la penetrancia, edad de inicio, gravedad y progresión de la misma. Es conocido que la presencia del alelo E4 del gen apoE puede inducir una susceptibilidad genética para el desarrollo de varios procesos neurodegenerativos, entre los que se encuentra la EP. Teniendo en cuenta esto hechos, los objetivos planteados en este trabajo fueron: 1.- Conocer si alguna de las isoformas de la apolipoproteína E produce susceptibilidad para el desarrollo de EP, en una población de pacientes de la Comunidad Autónoma de Aragón. 2.- Evaluar si la presencia de variantes en el gen GBA puede constituir un factor de susceptibilidad genética para el desarrollo de EP, o provocar un inicio precoz de la enfermedad, en pacientes de la Comunidad Autónoma de Aragón. 3.- Explorar si la presencia de variantes en los genes GBA y apoE influye en el comportamiento clínico de los pacientes con EP. 4.- Identificar si existen factores ambientales que determinen mayor susceptibilidad para el desarrollo de EP. Para el desarrollo de estos estudios, se utilizaron técnicas de biología molecular: análisis in silico de secuencias genómicas, amplificación de fragmentos genómicos por PCR, digestión con enzimas de restricción, secuenciación, pirosecuenciación, y análisis estadístico. De los resultados obtenidos en el presente estudio se deducen las siguientes conclusiones: 1.- El análisis de las isoformas de la apolipoproteína E demuestra que éstas no constituyen un factor de susceptibilidad para el desarrollo de enfermedad de Parkinson. 2.- La frecuencia alélica de la mutación N370S en el gen GBA en población aragonesa es 0,0023, mientras que la frecuencia alélica de la mutación L444P es 0,0008. Ambas representan las mutaciones más frecuentes responsables de la enfermedad de Gaucher en España y su incidencia es similar a la observada en otras poblaciones de origen no judío Ashkenazi. 3.- La incidencia global de portadores de variantes en el gen GBA es el doble en el grupo de pacientes con enfermedad de Parkinson respecto al grupo control de población general. 4.- Entre las variantes encontradas en el grupo de pacientes con enfermedad de Parkinson, la variante T369M presentó doble incidencia respecto al grupo control, mientras que las variantes L444P y E326K se han detectado exclusivamente entre los pacientes con enfermedad de Parkinson. La incidencia de la mutación L444P en el grupo de pacientes con enfermedad de Parkinson ha sido tres veces superior a la encontrada en población aragonesa. 5.- En el grupo de pacientes analizado no se ha encontrado la mutación N370S. Por el contrario, la incidencia de esta mutación en el grupo control fue similar a la encontrada en población general aragonesa. 6.- Se ha encontrado que la variante c.(-203)A>G del gen GBA, descrita previamente en pacientes con enfermedad de Gaucher, presentaba una incidencia de 4,6% en el grupo control de población general, lo que confirma que se trata de un polimorfismo. No se ha encontrado relación de este polimorfismo con la aparición de enfermedad de Parkinson. 7.- Los resultados encontrados en población aragonesa con respecto a la incidencia de mutaciones en GBA en pacientes con enfermedad de Parkinson, son similares a los descritos en otras poblaciones europeas. 8.- La presencia de la mutación L444P en el gen GBA constituye un factor de susceptibilidad genética para el inicio precoz de la enfermedad de Parkinson, en el grupo de pacientes estudiado. 9.- Existe una gran heterogeneidad en las manifestaciones clínicas de los pacientes portadores de variantes en el gen GBA. No hemos observado una relación clara entre el genotipo del gen GBA y el fenotipo encontrado en los pacientes con enfermedad de Parkinson. 10.- En nuestro estudio, la exposición a agentes tóxicos, los empastes dentales de amalgama de mercurio y los antecedentes familiares de enfermedad de Parkinson, constituyen factores de riesgo para el desarrollo de la enfermedad, aunque ninguno de ellos se asocia significativamente con el inicio precoz de la misma

Estudio de enfermedad de Fabry en pacientes con miocardiopatía hipertrófica de ventrículo izquierdo

La Enfermedad de Anderson-Fabry se trata de un error congénito del metabolismo glucolipídico ligado al cromosoma X. En este error, se produce un acúmulo de sus sustratos (principalmente galactoesfingolípidos neutros como Globotraosilceramida) debido a la disfunción de la hidrolasa ácida lisosomal α-Galactosidasa A. Como hemos mencionado, se trata de una enfermedad ligada al cromosoma X en el que los varones hemizigotos para variantes patológicas son los que desarrollarán fenotipos más graves. A diferencia de otras enfermedades con este tipo de herencia, los individuos heterocigotos para variantes patológicas de la enfermedad (mujeres) no se comportan como meros portadores de ella, si no que pueden desde no desarrollar sintomatología a padecer síntomas de la misma gravedad que los varones hemizigotos. Desde el punto de vista clínico y bioquímico se trata de una enfermedad compleja, así lo reflejan los distintos registros de prevalencia de la enfermedad en población general y neonatos haciendo sospechar que la prevalencia real está subestimada. Dependiendo de la actividad residual de la enzima y del tejido dónde se produzca el acúmulo del sustrato, originarán fenotipos clásicos de la enfermedad o fenotipos atípicos o tardíos. En estos últimos la presentación de la enfermedad se retrasa por que la enzima presenta una actividad residual elevada. La sintomatología que puede exhibir en ambos fenotipos es bastante variada, siendo los más destacados afectación neurológica, afectación renal, afectación cardiaca etc. Éste ultimo cuadro clínico es bastante frecuente entre enfermos de Fabry (40-60% manifiestan signos cardíacos de la enfermedad) por lo que se propopone un estudio para conocer la prevalencia de la enfermedad en individuos que presentan una miocardiopatía mediante técnicas de cribado poblacional basado en diagnóstico enzimático y genético en gota de sangre seca recogida en papeles de filtro aptas para conservar muestras biológicas

Avances en el diagnóstico y en el conocimiento genético de la enfermedad de Niemann Pick tipo C

La enfermedad de Niemann Pick tipo C (NP-C), es una enfermedad de herencia recesiva y con una baja incidencia poblacional, por lo que se encuentra englobada entre las enfermedades denominadas raras. Se debe a la presencia de variantes asociadas a patogenicidad en los genes NPC1 o NPC2, que codifican para proteínas lisosomales, la primera transmembrana y la segunda una proteína soluble. La principal función de éstas es el transporte del colesterol no esterificado fuera del lisosoma, de modo que una disfunción, provoca su acúmulo en el interior de este orgánulo y en consecuencia la acumulación de otros sustratos y el mal funcionamiento celular. La gran heterogeneidad fenotípica que presenta esta enfermedad, así como la complejidad del estudio de los genes causantes hace muy complejo el diagnóstico de una enfermedad que si no se trata de forma temprana provoca un rápido deterioro neurológico.Esta tesis doctoral se centra en implementar nuevos sistemas para mejorar el diagnóstico de la enfermedad y en la caracterización genética de sujetos con sospecha de la enfermedad, además de buscar otros mecanismos que puedan justificar la aparición de sintomatología en sujetos portadores de una única variante patogénica en heterozigosidad.En base a esto, se ha implementado el test de resistencia osmótica eritrocitaria como un nuevo método rápido, económico y fácil para descartar rápidamente la enfermedad en sujetos con sospecha, además de valorar la capacidad combinada de tres biomarcadores para orientar el diagnóstico. A nivel molecular se han detectado variantes no asociadas a patogenicidad no descritas en población española, así como una alteración en la frecuencia de la variante patogénica más común en población europea. El estudio ha permitido clasificar seis variantes de significado incierto como benignas y describir 5 nuevas variantes asociadas a patogenicidad, pero no ha detectado otros genes asociados a la expresión fenotípica de la NP-C o alteraciones en la secuencia del miRNA que regula la expresión del gen NPC1.<br /

Allelic variation in HMW glutenins in Spanish wheat landraces and their relationship with bread quality

The allelic variation of high molecular weight glutenins as principal determinants of bread quality has been analyzed in 165 Spanish wheat (Triticum aestivum ssp. vulgare L.) landraces provided by the Plant Genetic Resources Centre. The identification by standard electrophoresis techniques has been supported by a new PCR screening method, allowing the identification of the 2�� glutenin subunit from the Glu-A1 locus in some landraces. The relation of high molecular weight glutenins and bread quality has been evaluated by SDS-sedimentation tests and mixographs. A positive influence on quality has been found for the 2�� glutenin subunit from the Glu-A1 locus, pairs 7 + 8 and 13 + 16 from the Glu-B1 locus, and pair 5 + 10 from the Glu-D1 locus. The presence of a wide range of values for quality traits in landraces with the same high molecular weight glutenin composition points to the possible influence of other prolamins such as the low molecular weight glutenins. Their influence on bread quality will be assessed in future studies. A complete description of the high molecular weight glutenin composition and quality values of all the landraces analyzed in this study is provided for use in wheat breeding programs.En este trabajo, se ha analizado la variación alélica para gluteninas de alto peso molecular (HMW) en una colección de 165 variedades tradicionales españolas de trigo blando (Triticum aestivum ssp. vulgare L.) provenientes del Centro Nacional de Recursos Fitogenéticos. La identificación mediante técnicas estándar de electroforesis se ha complementado con un método de análisis por PCR que ha permitido la identificación de la subunidad 2�� del locus Glu- A1 en varios cultivares. La relación entre la composición en gluteninas de alto peso molecular y la calidad panadera se ha analizado mediante la prueba del volumen de sedimenatción con SDS y los datos del mixógrafo. Se ha encontrado una influencia positiva en la calidad por parte de la subunidad 2�� del locus Glu-A1, los pares de subunidades 7 + 8 y 13 + 16 del locus Glu-B1, y el par 5 + 10 del locus Glu-D1. Variedades con la misma composición en gluteninas de alto peso molecular han mostrado un amplio rango de valores en los parámetros de calidad, apuntando a la participación de otras prolaminas, como las gluteninas de bajo peso molecular, cuya influencia en la calidad será analizada en el futuro. En el presente trabajo, se incluye la descripción detallada de la composición en gluteninas de alto peso molecular y de parámetros de calidad de todos los cultivares analizados para su posible utilización en programas de mejora de trigo

Envejecimiento poblacional e incidencia de hemopatias primarias adquiridas en un area de la Comunidad Autonoma de Aragon

BACKGROUND: Aging probably comprises one of the major factors contributing to the onset of acquired primary blood diseases (APBD’s), most of which are of a chronic type. The purpose of this study is that to analyze the rate of occurrence (RO) of HPA in a population of 522,621 inhabitants (Males: 252,721; Females: 269,900) showing a negative vegetative growth (-1.4/ 10(5) inhabitants/year), said occurrence being dealt with separately for the population under age 60 and the population over age 60. METHODS: In January-December, 1994, a estimate was made of the HPA rate of occurrence and rate of analyses among the patients from the area in question, dealing separately with those under age 60 and over age 60. The diagnostic criteria applied were Monoclonal Gammopathies of Undetermined Significance (MGUS’s) in keeping with Kyle’s criteria. Multiple Myeloma (MM) and Chronic Lymphatic Leukemia (CLL) in keeping with the Myeloma Task Force criteria, Non-Hodgkin’s Lymphoma (NHL) and Hodgkin’s Disease (HD) in keeping with the REAL classification, Myelodisplasic Syndromes (MS’s) and Acute Leukemia (AL) in keeping with the FAB classification, Chronic Myeloproliferative Syndromes (CMS’s) in keeping with the PVSG. For calculating the rates of occurrence, descriptive epidemiological methods were used. RESULTS: The highest rates of blood analyses as the result of suspected APH’s fell within the over 60 age group ( p years: 100/202, p age 60): overall: 31.31 / 178.86; MGUS: 7.37 / 52.87; MM: 1.84 / 13.21; NHL: 5.53 / 34.36; CLL: 1.53 / 18.50; MS: 0.62 / 27.31; CMS: 5.52 / 16.74 ; AL: 1.53 / 5.29; HD: 3.68 / 1.76. CONCLUSIONS: The highest rate of analyses as the result of suspected APH was found among those over 60 years of age. The overall occurrence of APH is significantly higher in those over age 60, as well as for each type of APH taken into account, except for AL and HD. The highest rate of occurrence is that of MGUS, NHL and MS’s, especially in males.FUNDAMENTO: El envejecimiento constituye probablemente uno de los factores más importantes que contribuyen a la aparición de hemopatías primarias adquiridas (HPA), la mayoría de carácter crónico. El propósito de este trabajo ha sido el estudiar la tasa de incidencia (TI) de HPA en una población de 522.621 habitantes (V: 252.721; M: 269.900), con un crecimiento vegetativo negativo (-1,4/10(5) habitantes/año), considerando por separado dicha incidencia en la población menor y la mayor de 60 años. MÉTODOS: Durante el periodo enero-diciembre de 1994, se realizó una estimación de las tasas de consulta y las tasas de incidencia de HPA en los pacientes procedentes del área, considerando separadamente los menores y los mayores de 60 años. Las categorías diagnósticas aplicadas fueron: gammapatías monoclonales de significado indeterminado (GMSI), según criterios de Kyle; mieloma múltiple (MM) y leucemia linfática crónica (LLC) según criterios del Myeloma Task Force, linfoma no Hodgkin (LNH) y enfermedad de Hodgkin (EH) siguiendo la clasificación REAL, síndromes mielodisplásicos (SMD) y leucemia aguda (LA) según la clasificación FAB, síndromes mieloproliferativos crónicos (SMPC), según el PVSG. Para el cálculo de las tasas de incidencia se utilizaron los métodos epidemiológicos descriptivos. RESULTADOS: La mayor tasa de consultas hematológicas por sospecha de HPA procedía de los mayores de 60 años (p<0,0001). En el periodo analizado se diagnosticaron un total de 302 HPA (<60/³ 60 años: 100/202, p<0,0001), destacando: 84 GMSI; 21 MM; 57 LNH; 26 LLC; 33 SMD; 24 SMPC; 11 LA y 14 EH. La distribución por sexos: V: 177; M: 125. Edad media 63,54 años (extremos 19-92). Las tasas de incidencia (casos/10(5)hab/año) fueron (<60/³ 60 años): global: 31,31 / 178, 86; GMSI 7,37 / 52,87; MM: 1,84 / 13,21; LNH: 5,53 / 34,36; LLC: 1,53 / 18,50 ; SMD: 0,62 / 27,31; SMPC: 5,52 / 16,74; LA: 1,53 / 5,29; EH: 3,68 / 1,76. CONCLUSIONES: La mayor tasa de consultas por sospecha de HPA se dio entre mayores de 60 años. La incidencia global de HPA es significativamente más elevada en mayores de 60 años que en menores, así como para cada tipo de HPA considerada, excepto para LA y EH. La mayor tasa de incidencia corresponde a las GMSI, LNH y SMD, especialmente en varones