Quantification of bovine leukemia virus proviral DNA using a low-cost real-time polymerase chain reaction

The detection of bovine leukemia virus (BLV) proviral DNA is an important tool to address whether an animal is infected with BLV. Compared with serological assays, real-time PCR accounts for greater sensitivity and can serve as a confirmatory test for the clarification of inconclusive or discordant serological test results. However, the high cost related to real-time PCR assays has limited their systematic inclusion in BLV surveillance and eradication programs. The aim of the present study was to validate a low-cost quantitative real-time PCR. Interestingly, by using SYBR Green detection dye, we were able to reduce the cost of a single reaction by a factor of 5 compared with most common assays based on the use of fluorogenic probes (i.e., TaqMan technology). This approach allowed a highly sensitive and specific detection and quantification of BLV proviral DNA from purified peripheral blood leukocytes and a milk matrix. Due to its simplicity and low cost, our in-house BLV SYBR quantitative real-time PCR might be used either as a screening or as a confirmatory test in BLV control programs.Fil: Petersen Cruceño, Marcos Iván. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Alvarez, Irene. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Trono, Karina Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Jaworski, Juan Pablo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

BLV: Lessons on vaccine development

Vaccination against retroviruses is a challenge because of their ability to stably integrate into the host genome, undergo long-term latency in a proportion of infected cells and thereby escape immune response. Since clearance of the virus is almost impossible once infection is established, the primary goal is to achieve sterilizing immunity. Besides efficacy, safety is the major issue since vaccination has been associated with increased infection or reversion to pathogenicity. In this review, we discuss the different issues that we faced during the development of an efficient vaccine against bovine leukemia virus (BLV). We summarize the historical failures of inactivated vaccines, the efficacy and safety of a live-attenuated vaccine and the economical constraints of further industrial development.Fil: Abdala, Alejandro Ariel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Santa Fe. Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; ArgentinaFil: Alvarez, Irene. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Brossel, Hélène. Université de Liège; BélgicaFil: Calvinho, Luis Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Santa Fe. Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; ArgentinaFil: Carignano, Hugo Adrián. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Franco, Lautaro Nahuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Gazon, Hélène. Université de Liège; BélgicaFil: Gillissen, Christelle. Université de Liège; BélgicaFil: Hamaidia, Malik. Université de Liège; BélgicaFil: Hoyos, Clotilde. Université de Liège; BélgicaFil: Jacques, Jean Rock. Université de Liège; BélgicaFil: Joris, Thomas. Université de Liège; BélgicaFil: Laval, Florent. Université de Liège; BélgicaFil: Petersen Cruceño, Marcos Iván. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Porquet, Florent. Université de Liège; BélgicaFil: Porta, Natalia Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Ruiz, Vanesa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Safari, Roghaiyeh. Université de Liège; BélgicaFil: Suárez Archilla, Guillermo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Santa Fe. Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; ArgentinaFil: Trono, Karina Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Willems, Luc. Université de Liège; Bélgic

Evidence of reduced vertical transmission of Neospora caninum associated with higher IgG1 than IgG2 serum levels and presence of IFN-γ in non-aborting chronically infected cattle under natural condition

Neospora caninum infection of cattle can be vertically transmitted, resulting in abortion or birth of infected calves. Vertical transmission occurs both in acutely or chronically infected cattle. There is little information on the immune response needed to prevent endogenous transplacental transmission, particularly from chronically infected cattle to their offspring in a natural environment. In this study, N. caninum seropositive pregnant cattle from three different farms with high avidity antibodies and low IgM titers were selected and their newborn colostrum-deprived calves were tested for anti-N. caninum antibodies. Based on these results, dams were grouped according to their congenital transmission status. The analysis of the immune profile of the chronically-infected pregnant cattle revealed that higher ratio between IgG1 and IgG2 anti-N. caninum serum titers and higher levels of systemic IFN-γ were associated with diminished vertical transmission rates, compared to dams with the opposite profile. Our results evidenced an association between the immune profile and vertical transmission in non-aborting chronically infected dams, and confirm that vertical transmission, even when not leading to abortion, is related to a defined immune profile. This is important information to accomplish successful vaccine development efforts.Fil: Pereyra, Rodrigo Andres. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Mansilla, Florencia Celeste. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Petersen Cruceño, Marcos Iván. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Suarez, Victor. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin