Toll-Like Receptor 2-Independent Host Innate Immune Response against an Epidemic Strain of Streptococcus suis That Causes a Toxic Shock-Like Syndrome in Humans

Streptococcus suis is an emerging zoonotic agent causing meningitis and septicemia. Outbreaks in humans in China with atypical cases of streptococcal toxic shock-like syndrome have been described to be caused by a clonal epidemic S. suis strain characterized as sequence type (ST) 7 by multilocus sequence typing, different from the classical ST1 usually isolated in Europe. Previous in vitro studies showed that Toll-like receptor (TLR) 2 plays a major role in S. suis ST1 interactions with host cells. In the present study, the in vivo role of TLR2 in systemic infections caused by S. suis ST1 or ST7 strains using TLR2 deficient (TLR2−/−) mice was evaluated. TLR2-mediated recognition significantly contributes to the acute disease caused by the highly virulent S. suis ST1 strain, since the TLR2−/− mice remained unaffected when compared to wild type (WT) mice. The lack of mortality could not be associated with a lower bacterial burden; however, a significant decrease in the induction of pro-inflammatory mediators, as evaluated by microarray, real-time PCR and protein assays, was observed. On the other hand, TLR2−/− mice infected with the epidemic ST7 strain presented no significant differences regarding survival and expression of pro-inflammatory mediators when compared to the WT mice. Together, these results show a TLR2-independent host innate immune response to S. suis that depends on the strain.Fil: Lachance, Claude. University Of Montreal. Faculty of Veterinary Medicine; Canadá;Fil: Segura, Mariela. University Of Montreal. Faculty of Veterinary Medicine; Canadá;Fil: Pereyra Gerber, Federico Pehuén. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología; Argentina; University Of Montreal. Faculty of Veterinary Medicine; Canadá; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentina;Fil: Xu, Jianguo. Chinese Center for Disease Control and Prevention. National Institute for Communicable Disease Control and Prevention. State Key Laboratory for Infectious Disease Prevention and Control; China;Fil: Gottschalk, Marcelo. University Of Montreal. Faculty of Veterinary Medicine; Canadá

Low pH impairs complement-dependent cytotoxicity against IgG-coated target cells

Local acidosis is a common feature of allergic, vascular, autoimmune, and cancer diseases. However, few studies have addressed the effect of extracellular pH on the immune response. Here, we analyzed whether low pH could modulate complementdependent cytotoxicity (CDC) against IgG-coated cells. Using human serum as a complement source, we found that extracellular pH values of 5.5 and 6.0 strongly inhibit CDC against either B lymphoblast cell lines coated with the chimeric anti-CD20 mAb rituximab or PBMCs coated with the humanized anti-CD52 mAb alemtuzumab. Suppression of CDC by low pH was observed either in cells suspended in culture medium or in whole blood assays. Interestingly, not only CDC against IgG-coated cells, but also the activation of the complement system induced by the alternative and lectin pathways was prevented by low pH. Tumor-targeting mAbs represent one of the most successful tools for cancer therapy, however, the use of mAb monotherapy has only modest effects on solid tumors. Our present results suggest that severe acidosis, a hallmark of solid tumors, might impair complement-mediated tumor destruction directed by mAb.Fil: Dantas, Ezequiel Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Erra Diaz, Fernando Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Pereyra Gerber, Federico Pehuén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Merlotti Ippólito, Antonela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Varese, Augusto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Ostrowski, Matias. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Sabatte, Juan Atilio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Geffner, Jorge Raúl. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; Argentin

High salt induced a delayed activation of human neutrophils

High salt (NaCl) concentrations are found in a number of tissues under physiological and pathological conditions. Here, we analyzed the effects induced by high salt on the function of human neutrophils. The culture of neutrophils in medium supplemented with high salt (50 mM NaCl) for short periods (30-120 min) inhibited the ability of conventional agonists to induce the production of IL-8 and the activation of respiratory burst. By contrast, exposure to high salt for longer periods (6-18 h) resulted in the activation of neutrophils revealed by the production of high levels of IL-8, the activation of the respiratory burst, and a marked synergistic effect on the production of TNF-α induced by LPS. Increasing osmolarity of the culture medium by the addition of sorbitol or mannitol (100 mM) was shown to be completely unable to stimulate neutrophil responses, suggesting that high sodium but not an increased osmolarity mediates the activation on neutrophils responses. A similar biphasic effect was observed when the function of monocytes was analyzed. Short term exposure to high salt suppressed IL-8 and TNF-α production induced by LPS while culture for longer periods triggered the production of IL-8 but not TNF-α in the absence of LPS stimulation. Contradictory results have been published regarding how high salt modulates neutrophil function. Our results suggest that the modulation of neutrophil function by high salt is strongly dependent on the exposure time.Fil: Mazzitelli, Ignacio Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Bleichmar, Lucia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Melucci Ganzarain, Claudia del Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Pereyra Gerber, Federico Pehuén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Toscanini, María Agustina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Cuestas, María Luján. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Erra Diaz, Fernando Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Geffner, Jorge Raúl. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; Argentin

Histidine-Rich Glycoprotein Inhibits HIV-1 Infection in a pH-Dependent Manner

Histidine-rich glycoprotein (HRG) is an abundant plasma protein with a multidomain structure, allowing its interaction with many ligands, including phospholipids, plasminogen, fibrinogen, IgG antibodies, and heparan sulfate. HRG has been shown to regulate different biological responses, such as angiogenesis, coagulation, and fibrinolysis. Here, we found that HRG almost completely abrogated the infection of Ghost cells, Jurkat cells, CD4+ T cells, and macrophages by HIV-1 at a low pH (range, 6.5 to 5.5) but not at a neutral pH. HRG was shown to interact with the heparan sulfate expressed by target cells, inhibiting an early postbinding step associated with HIV-1 infection. More importantly, by acting on the viral particle itself, HRG induced a deleterious effect, which reduces viral infectivity. Because cervicovaginal secretions in healthy women show low pH values, even after semen deposition, our observations suggest that HRG might represent a constitutive defense mechanism in the vaginal mucosa. Of note, low pH also enabled HRG to inhibit the infection of HEp-2 cells and Vero cells by respiratory syncytial virus (RSV) and herpes simplex virus 2 (HSV-2), respectively, suggesting that HRG might display broad antiviral activity under acidic conditions.Fil: Dantas, Ezequiel Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Díaz, Fernando Erra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Pereyra Gerber, Federico Pehuén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Varese, Augusto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Jerusalinsky, Diana Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; ArgentinaFil: Epstein, Alberto Luis. Université de Versailles Saint-quentin-en-yvelines.; Francia. Inserm; FranciaFil: García Rivello, Hernán J.. Hospital Italiano. Instituto Universitario. Escuela de Medicina; ArgentinaFil: del Valle Jaén, Ana. Hospital Italiano. Instituto Universitario. Escuela de Medicina; ArgentinaFil: Pandolfi, Julieta Belen. Hospital Italiano. Instituto Universitario. Escuela de Medicina; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ceballos, Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Ostrowski, Matias. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Sabatté, Juan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Geffner, Jorge Raúl. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; Argentin

A Dynamic Interplay of Circulating Extracellular Vesicles and Galectin-1 Reprograms Viral Latency during HIV-1 Infection

Combined Antiretroviral therapy (cART) suppresses HIV replication but fails to eradicate the virus, which persists in a small pool of long-lived latently infected cells. Immune activation and residual inflammation during cART are considered to contribute to viral persistence. Galectins, a family of b-galactoside-binding proteins, play central roles in host-pathogen interactions and inflammatory responses. Depending on their structure, glycan binding specificities and/or formation of distinct multivalent signaling complexes, different members of this family can complement, synergize, or oppose the function of others. Here, we identify a regulatory circuit, mediated by galectin-1 (Gal-1)–glycan interactions, that promotes reversal of HIV-1 latency in infected T cells. We found elevated levels of circulating Gal-1 in plasma from HIV-1-infected individuals, which correlated both with inflammatory markers and the transcriptional activity of the reservoir, as determined by unspliced-RNA (US-RNA) copy number. Proinflammatory extracellular vesicles (EVs) isolated from the plasma of HIV-infected individuals induced Gal-1 secretion by macrophages. Extracellularly, Gal-1 interacted with latently infected resting primary CD41 T cells and J-LAT cells in a glycan-dependent manner and reversed HIV latency via activation of the nuclear factor kB (NF-kB). Furthermore, CD41 T cells isolated from HIV-infected individuals showed increased HIV-1 transcriptional activity when exposed to Gal-1. Thus, by modulating reservoir dynamics, EV-driven Gal-1 secretion by macrophages links inflammation with HIV-1 persistence in cART-treated individuals. IMPORTANCE Antiretroviral therapy has led to a dramatic reduction in HIV-related morbidity and mortality. However, cART does not eradicate the virus, which persists in resting CD41 T cells as the main viral reservoir, consequently requiring lifelong treatment. A major question is how the functional status of the immune system during antiretroviral therapy determines the activity and size of the viral reservoir. In this study, we identified a central role for galectin-1 (Gal-1), a glycan-binding protein released in response to extracellular vesicles (EVs), in modulating the activity of HIV reservoir, thus shaping chronic immune activation in HIV-infected patients. Our work unveils a central role of Gal-1 in linking chronic immune activation and reservoir dynamics, highlighting new therapeutic opportunities in HIV infection.Fil: Rubione, Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Pérez, Paula Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Czernikier, Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Duette, Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Pereyra Gerber, Federico Pehuén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Salido, Jimena Patricia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Fabiano, Martina P.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Ghiglione, Yanina Alexandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Turk, Gabriela Julia Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Laufer, Natalia Lorna. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Cagnoni, Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Pérez Sáez, Juan Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Merlo, Joaquín Pedro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Pascuale, Carla Antonela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Stupirski, Juan Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Sued, Omar Gustavo. Fundación Huésped; ArgentinaFil: Varas Godoy, Manuel. Universidad San Sebastián; ChileFil: Lewin, Sharon R.. Monash University; Australia. University of Melbourne; AustraliaFil: Mariño, Karina Valeria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Rabinovich, Gabriel Adrián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Ostrowski, Matias. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; Argentin

Caracterizacion de las vías de tráfico intracelular dependientes de RabGTPasas involucradas en la replicación de VIH-1 en linfocitos T CD4+

Durante las últimas etapas del ciclo de replicación del VIH-1, la poliproteína viral Pr55Gag es reclutada a la membrana plasmática, donde se une el fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato [PI(4,5)P2] para iniciar el ensamblado de VIH-1. Las vías de tráfico intracelular requeridas para llevar adelante este proceso son poco conocidas, principalmente en Linfocitos T CD4+. En esta tesis doctoral nos propusimos estudiar el papel desempeñado en este proceso por las proteínas RabGTPasa, reguladoras centrales de las vías de tráfico intracelular. A través de un tamizaje con ARN de interferencias, demostramos que al menos 10 miembros de esta familia de proteínas son necesarios para la replicación viral. Mediante un minucioso estudio de biología celular, demostramos que la proteína Rab27a participa en la formación de un dominio de la membrana plasmática que funciona como plataforma para el ensamblado viral en linfocitos T CD4+. En efecto, Rab27a promueve la llegada de la enzima fosfatidilinositol 4-quinasa tipo 2 α (PI4KIIα) desde los endosomas tardíos hasta la membrana plasmática. En consecuencia, se produce un incremento localizado de los niveles de fosfatidilinositol 4-fosfato y subsiguientemente de PI(4,5)P2. Estos dominios ricos en PI(4,5)P2 son utilizados como sitio de reclutamiento de Pr55Gag, dando inicio de esta manera al ensamblado viral. A fin de adentrarnos aún más en el mecanismo responsable de la formación de la plataforma viral, investigamos e identificamos que tres efectores de Rab27a (Slac2-b, Slp3 y Slp2-a) son reclutados por esta GTPasa para llevar a cabo esta vía de tráfico.Fil: Pereyra Gerber, Federico Pehuén. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; Argentin

Caracterización de las vías de tráfico intracelular dependientes de RabGTPasas involucradas en la replicación de VHI-1 en Linfocitos T CD4+

Fil: Pereyra Gerber, Federico Pehuén. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Buenos Aires, ArgentinaDurante las últimas etapas del ciclo de replicación del VIH-1, la poliproteína viral Gag es reclutada a un dominio particular de la membrana plasmática, denominado plataforma de ensamblado viral. Allí, Gag interactúa con el fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato [PI(4,5)P2] para iniciar el ensamblado de VIH-1. Las vías de tráfico intracelular implicadas en el tráfico de Gag hacia el sitio de ensamblado viral, así como aquellas requeridas para la formación de este particular dominio de la membrana son poco conocidas, principalmente en Linfocitos T CD4+. En esta tesis doctoral nos propusimos estudiar el papel desempeñado por las proteínas RabGTPasa, reguladoras centrales de las vías de tráfico intracelular, en el proceso de ensamblado del VIH-1. A través de un tamizaje con ARN de interferencias, demostramos que 12 miembros de esta familia de proteínas son necesarios para la replicación viral. Mediante un minucioso estudio de biología celular, demostramos que la proteína Rab27a participa en la formación de un dominio de la membrana plasmática que funciona como plataforma para el ensamblado viral en linfocitos T CD4+. En efecto, Rab27a promueve la llegada de la enzima fosfatidilinositol 4-quinasa tipo 2 ? (PI4KII?) desde los endosomas tardíos hasta la membrana plasmática. En consecuencia, se produce un incremento localizado de los niveles de fosfatidilinositol 4-fosfato y subsiguientemente de PI(4,5)P2. Estos dominios ricos en PI(4,5)P2 son utilizados como sitio de reclutamiento de Gag, dando inicio de esta manera al ensamblado viral. A fin de adentrarnos aún más en el mecanismo responsable de la formación de la plataforma viral, investigamos e identificamos que tres efectores de Rab27a (Slac2-b, Slp3 y Slp2-a) son reclutados por esta GTPasa para llevar a cabo esta vía de tráfico. Concluimos que, al dirigir el tráfico de los endosomas tardíos que cargan la PI4KIIa hacia la membrana plasmática, Rab27a controla la síntesis localizada de PI(4,5)P2 y la replicación de VIH1

Exacerbated Type II Interferon Response Drives Hypervirulence and Toxic Shock by an Emergent Epidemic Strain of Streptococcus suis

Streptococcus suis, a major porcine pathogen, can be transmitted to humans and cause severe symptoms. A large human outbreak associated with an unusual streptococcal toxic shock-like syndrome (STSLS) was described in China. Albeit an early burst of proinflammatory cytokines following Chinese S. suis infection was suggested to be responsible for STSLS case severity, the mechanisms involved are still poorly understood. Using a mouse model, the host response to S. suis infection with a North American intermediately pathogenic strain, a European highly pathogenic strain, and the Chinese epidemic strain was investigated by a whole-genome microarray approach. Proinflammatory genes were expressed at higher levels in mice infected with the Chinese strain than those infected with the European strain. The Chinese strain induced a fast and strong gamma interferon (IFN-γ) response by natural killer (NK) cells. In fact, IFN-γ-knockout mice infected with the Chinese strain showed significantly better survival than wild-type mice. Conversely, infection with the less virulent North American strain resulted in an IFN-β-subjugated, low inflammatory response that might be beneficial for the host to clear the infection. Overall, our data suggest that a highly virulent epidemic strain has evolved to massively activate IFN-γ production, mainly by NK cells, leading to a rapid and lethal STSLS.Fil: Lachance, Claude. University Of Montreal; CanadáFil: Gottschalk, Marcelo. University Of Montreal; CanadáFil: Pereyra Gerber, Federico Pehuén. University Of Montreal; Canadá. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Lemire, Paul. University Of Montreal; CanadáFil: Xu, Jianguo. Chinese Center For Disease Control And Prevention; ChinaFil: Segura, Mariela. University Of Montreal; Canad

Extracellular vesicles containing the transferrin receptor as nanocarriers of apotransferrin

Previous work by our group has shown the pro-differentiating effects of apotransferrin (aTf) on oligodendroglial cells in vivo and in vitro. Further studies showed the remyelinating effect of aTf in animal demyelination models such as hypoxia/ischemia, where the intranasal administration of human aTf provided brain neuroprotection and reduced white matter damage, neuronal loss, and astrogliosis in different brain regions. These data led us to search for a less invasive and controlled technique to deliver aTf to the CNS. To such end, we isolated extracellular vesicles (EVs) from human and mouse plasma and different neuron and glia conditioned media and characterized them based on their quality, quantity, identity, and structural integrity by western blot, dynamic light scattering, and scanning electron microscopy. All sources yielded highly pure vesicles whose size and structures were in keeping with previous literary evidence. Given that, remarkably, EVs from all sources analyzed contained Tf receptor 1 (TfR1) in their composition, we employed two passive cargo-loading strategies which rendered successful EV loading with aTf, specifically through binding to TfR1. These results unveil EVs as potential nanovehicles of aTf to be delivered into the CNS parenchyma, and pave the way for further studies into their possible clinical application in the treatment of demyelinating diseases.Fil: Mattera, Vanesa Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; ArgentinaFil: Pereyra Gerber, Federico Pehuén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Glisoni, Romina Julieta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Ostrowski, Matias. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Verstraeten, Sandra Viviana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; ArgentinaFil: Pasquini, Juana Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; ArgentinaFil: Correale, Jorge. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; Argentin