Esterase profile in the postembryonic development of Rhipicephalus microplus

O objetivo deste trabalho foi analisar o padrão de atividade da esterase nos estágios de desenvolvimento de Rhipicephalus microplus por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida não desnaturante, com uso de coloração específica para esterase. Observou-se a presença de nove regiões com atividade esterásica, coradas tanto pelo alfa-naftil acetato como pelo beta-naftil acetato, e definidas como alfa-beta-esterases. Foram detectadas esterases estágio-específicas, e os estágios de ninfa de primeiro estádio e de larva foram os que mostraram maior atividade esterásica durante todo o desenvolvimento. A esterase EST-4 foi detectada apenas em machos e considerada sexo-específica. Existem diferenças quanto ao perfil esterásico nos diferentes estágios de desenvolvimento pós-embrionário de R. microplus.The objective of this work was to analyze the pattern of esterase activity in the development stages of Rhipicephalus microplus by nondenaturing polyacrylamide gel electrophoresis using specific staining for esterase. The electrophoretical results revealed the presence of nine regions displaying esterase activity, stained with both alpha-naphthyl acetate and beta-naphthyl acetate, and classified as alpha-beta-esterase. Stage-specific esterases were found, with the first nymphal and larval stages showing the greatest esterase activity throughout the development. An esterase called EST-4 was detected only in males and was considered sex-specific. There are differences in the esterase profile among the different postembryonic development stages of R. microplus

Molecular and biochemical analysis of Boophilus microplus (acari.ixodidae) resistance to cypermethrin

The cattle tick (Boophilus microplus) is one of the most important ectoparasites for Brazilian agriculture and other tropical and subtropical regions, being responsible for significant economic losses. It is estimated that this parasite causes 65% direct damage and 35% indirect damage to cattle raising, leading to losses in milk production, birth, weight gain, increased mortality and tick consumption, and damage to the leather industry. . Among the various control methods, we highlight the use of pyrethroid-based ticks that exert a neurotoxic effect on the parasite's sodium channel, gradually promoting its inactivation. Some mutations in the teleogen sodium channel gene of this tick have been described, conferring insensitivity sites to the neurotoxic effect of pyrethroids. Resistance to this group of ticks may also be mediated by esterases such as acetylcholinesterase (AchE), in which high levels of resistance were evidenced by the combination of several mutations in the active site of this enzyme. Testing with esterase inhibitors indicated the presence of an esterase in this AchE group of B microplus associated with resistance to cypermethrin (pyrethroid). Preliminary data with Single strand conformation polymorphism (LIS-SSCP) showed a difference in the migration of 337 bp fragments of the sodium channel domain IIIS6 from sensitive and resistant teleogens. A new method for detection of mutations in gene products, called LSART (low stringency asymmetric RT-PCR), was performed. LSART data also suggested the presence of other mutations in the sodium channel of B. microplus2 teleogens. polymorphic bands, when resistant to cypermethrin-resistant teleogins, in a population of Uberlandia, Minas Gerais.Tese (Doutorado)O carrapato bovino {Boophilus microplus) é um dos ectoparasitos mais importantes para a agropecuária brasileira e demais regiões tropicais e subtropicais, sendo responsável por perdas econômicas significativas. Estima-se que este parasita cause 65% de prejuízos diretos e 35% de prejuízos indiretos à bovinocultura, gerando perdas na produção de leite, natalidade, ganho de peso, aumento da mortalidade e consumo de carrapaticidas, além dos prejuísos causados à indústria do couro. Dentre os vários métodos de controle, destaca-se o uso de carrapaticidas à base de piretróides que exercem um efeito neurotóxico no canal de sódio do parasita promovendo de forma gradual sua inatívação. Algumas mutações no gene do canal de sódio de teleógenas desse carrapato têm sido descritas conferindo sítios de insensibilidade ao efeito neurotóxico dos piretróides. A resistência a este grupo de carrapaticidas pode ser também mediada por esterases como a acetilcolinesterase (AchE), na qual altos níveis de resistência foram evidenciados pela combinação de várias mutações no sítio ativo desta enzima. Testes com inibidores para esterase indicaram a presença de uma esterase, nesta população de B microplus, pertencente ao grupo das AchE, associada à resistência a cipermetrina (piretróide). Dados preliminares com Single strand conformation polymorfhism (LIS-SSCP) mostraram uma diferença na migração de fragmentos de 337pb do domínio IIIS6 do canal de sódio de teleógenas sensíveis e resistentes. Um novo método para detecção de mutações em produtos gênicos, chamado de LSART (RT-PCR assimétrico de baixa estringência), foi realizado. Dados obtidos por LSART, também sugeriram a presença de outras mutações no canal de sódio de teleógenas de B. microplus2 por meio detecção de bandas polimórficas, quando comparadas teleóginas resistentes e sensíveis à cipermetrina, numa população de carrapatos de Uberlândia, Minas Gerais

Esterase profile in the postembryonic development of Rhipicephalusmicroplus

O objetivo deste trabalho foi analisar o padrão de atividade da esterase nos estágios de desenvolvimento de Rhipicephalus microplus por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida não desnaturante, com uso de coloração específica para esterase. Observou-se a presença de nove regiões com atividade esterásica, coradas tanto pelo alfa-naftil acetato como pelo beta-naftil acetato, e definidas como alfa-beta-esterases. Foram detectadas esterases estágio-específicas, e os estágios de ninfa de primeiro estádio e de larva foram os que mostraram maior atividade esterásica durante todo o desenvolvimento. A esterase EST-4 foi detectada apenas em machos e considerada sexo-específica. Existem diferenças quanto ao perfil esterásico nos diferentes estágios de desenvolvimento pós-embrionário de R. microplus.The objective of this work was to analyze the pattern of esterase activity in the development stages of Rhipicephalus microplus by nondenaturing polyacrylamide gel electrophoresis using specific staining for esterase. The electrophoretical results revealed the presence of nine regions displaying esterase activity, stained with both alpha-naphthyl acetate and beta-naphthyl acetate, and classified as alpha-beta-esterase. Stage-specific esterases were found, with the first nymphal and larval stages showing the greatest esterase activity throughout the development. An esterase called EST-4 was detected only in males and was considered sex-specific. There are differences in the esterase profile among the different postembryonic development stages of R. microplus.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES

Esterase profile in a pyrethroid-resistant Brazilian strain of the cattle tick Boophilus microplus (Acari, Ixodidae)

The cattle tick Boophilus microplus causes great damage in livestock and is considered one of the most important tropical ectoparasites. The traditional method of control is based on the intensive use of pesticides, however the indiscriminate use of these compounds over the years has led to the selection of resistant ticks. Hydrolases, particularly esterases (EST), have been reported to be associated with acaricide resistance in B. microplus. We compared the esterase profile of susceptible and cypermethrin-resistant strains of adult B. microplus and a pyrethroid susceptible reference strain (the Mozzo strain) using polyacrylamide gel electrophoresis and specific staining. The electrophoretic profiles of protein extracts revealed the presence of four regions with esterase activity in the cypermethrin-resistant strain and three of these regions in the susceptible strains. The bands were numbered EST-1 to EST-4 in sequence (starting from the anode) according to their decrease in negative charge. The EST-1A and EST-1B enzymes were detected only in the resistant strain. The inhibition studies with eserine sulfate, copper sulfate, p- p-chloromercuribenzoate (pCMB), malathion and phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF) indicated that the EST-1A and EST-1B enzymes belong to the acetylcholinesterase class and are probably associated with resistance to acaricides in this Brazilian resistant strain of B. microplus

Biotecnologia: estado da arte e aplicações na agropecuária

730 p., il. colorNeste livro, várias técnicas relacionada a biotecnologia são discutidas por vários especialistas da Embrapa Cerrados e instituições parceiras, sendo um material didático importante para dar uma idéia geral da área, incluindo aspectos conceituais, sua importância histórica e atual e também sua importância futura, considerando toda sua potencialidade e o que ainda vai ser descoberto