Estudo de dois genes da imunidade inata (MBL 2 e o receptor CCR5) na transmissão materno infantil do HIV-1

A Síndrome da Imunodeficiência adquirida (AIDS) é uma doença causada pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV), e é caracterizada pela destruição de células pertencentes ao sistema imunológico, tais como, macrófagos e linfócitos T CD4+. Segundo as estatísticas da Junta das Nações Unidas sobre o HIV/AIDS (UNAIDS) aproximadamente 42 milhões de pessoas no mundo estão infectadas pelo HIV-1, e somente no Brasil aproximadamente 600 mil pessoas são portadores do vírus. O entendimento dos mecanismos da imunidade natural é de fundamental importância no controle da infecção e replicação. Este trabalho teve como objetivo propor uma metodologia simples, rápida e eficaz para correlacionar através da genotipagem de dois genes relacionados com a resposta imune inata (CCR5 e MBL-2), a susceptibilidade ou resistência à infecção pelo HIV, e o risco de transmissão materno infantil do vírus, utilizando os pares mães e filhos brasileiros, infectados pelo HIV-1, através da metodologia da PCR em tempo real, baseado na técnica de melting temperature assay . Nossos resultados para genotipagem do gene MBL-2 estão de acordo com os dados da literatura que indicam que a presença do alelo 0 confere risco relativo de 1,37 para infecção através da transmissão vertical. Neste trabalho, nós também analisamos a freqüência de quatro polimorfismos dentro da região promotora e um dentro da região codificadora do gene CCR5. Os polimorfismos foram detectados por amplificações por PCR e posteriormente confirmados por sequenciamento. Observamos que, embora não houvesse diferença significativa entre os polimorfismos CCR5-Δ32, CCR5- 59356-C/T e CCR5-59653 C/T, as freqüências dos genótipos CCR5-59353 C/T e CCR5-59402-A/G diferem entre crianças HIV +, HIV - e saudáveis. A presença do genótipo CCR5-59353-TT indicou uma tendência ao aumento do risco da transmissão vertical da infecção do HIV-1 em crianças brasileiras, enquanto a presença do genótipo CCR5-59402-AA é sugestiva para um efeito protetor contra a transmissão vertical do HIV-

MYD88, IRAK3 and Rheumatoid Arthritis pathogenesis: Analysis of differential gene expression in CD14 + monocytes and the inflammatory cytokine levels.

Rheumatoid arthritis (RA) is a well-known chronic inflammatory disorder. Two molecular players act in the inflammation balance of the disease: MyD88 (Myeloid differentiation primary response 88) is related to TLR (Toll-like receptors) response and promotes the formation of myddosome complex resulting in increased inflammation; IRAK3 (Interleukin-1 receptor associated kinase 3) acts suppressing the myddosome complex thus decreasing inflammation. In this scenario, MYD88 and IRAK3 gene expression profile in RA patients and its correlation with clinical features is still partially known. So, we evaluated the MYD88 and IRAK3 gene expressions in CD14 + monocytes from RA patients and healthy controls and its relation with patients' clinical features and cytokine plasma levels. CD14 + monocytes were isolated using positive selection by magnetic cell separation. The MYD88 and IRAK3 gene expressions were measured through real time relative quantitative PCR with specific primers; relative quantification was normalized to ACTB, GAPDH, 18S and RPLP0 reference genes. Cytokine levels were analyzed by CBA (cytokine beads assays). CD14 + monocytes from RA patients showed lower IRAK3 expression level compared to controls although with a borderline statistical significance (Fold change (FC) = -1.63; p = 0.054). Furthermore, RA patients with high disease activity had lower levels of IRAK3 when compared to patients with low/moderate activity measured by the CDAI index (FC = -1.78; p = 0.030). No significant differences were observed for MYD88 gene expression (FC = 1.20; p = 0.294) between patients and controls analyzed. Additionally, we did not we did not observe correlation between IRAK3 and MYD88 gene expression and TNF-α, IL-6, IL-2 and IL-10 levels. We suggested that IRAK3 gene expression in CD14 + monocytes appears to be relevant to the RA etiology and clinical activity, whereas, in this study, MYD88 does not play a role in RA onset and development