HISTOLOGICAL FEATURES OF EOSINOPHILIC ESOPHAGITIS IN CHILDREN AND ADOLESCENTS

ABSTRACT BACKGROUND: Eosinophilic esophagitis is an emerging disease featured by eosinophilic esophageal infiltrate not responsive to proton pump inhibitors. OBJECTIVE: To characterize histological features of children and adolescents with eosinophilic esophagitis. METHODS: Cross-sectional study in a tertiary hospital. Biopsies from each esophageal third from 14 patients (median age 7 years) with eosinophilic esophagitis were evaluated. Histological features evaluated included morphometry of esophageal epithelium, esophageal density (per high power field), extracellular eosinophilic granules, eosinophilic microabscesses, surface disposition of eosinophils, epithelial desquamation, peripapillary eosinophilia, basal layer hyperplasia and papillary elongation. RESULTS: Several patients presented a normal esophageal macroscopy in the upper digestive endoscopy (6, 42.8%), and the most common abnormality were vertical lines (7, 50%) and whitish spots over esophageal mucosa (7, 50%). Basal layer hyperplasia was observed in 88.8%, 100% e 80% of biopsies from proximal, middle and lower esophagus, respectively (P=0.22). Esophageal density ranges from 0 to more than 50 per hpf. Extracellular eosinophilic granules (70%-100%), surface disposition of eosinophils (60%-93%), epithelial desquamation (60%-100%), peripapillary eosinophilia (70%-80%) were common, but evenly distributed among each esophageal third. Just one patient did not present eosinophils in the lower third, four in the middle third and four in the upper esophageal third. CONCLUSION: In the absence of hypereosinophilia, other histological features are present in eosinophilic esophagitis and may contribute to diagnosis. Eosinophilic infiltrate is focal, therefore multiple biopsies are needed for diagnosis

Anti-tissue transglutaminase antibodies (IgA and IgG) in both Crohn's disease and autoimmune diabetes

Objective: a strong association has been observed between celiac disease, generally its silent clinical form, and autoimmune disorders. A potential correlation with inflammatory bowel disease has also been suggested. Anti-tissue transglutaminase antibodies have been detected in Crohn's disease. We investigated the prevalence of celiac disease in patients with autoimmune diabetes and in Crohn's disease patients and also evaluated the correlation between anti-transglutaminase antibody positivity and the clinical status of these diseases. Methods: anti-tissue transglutaminase and anti-endomysium antibodies were assessed by enzyme-linked immunosorbent assay and indirect immunofluorescence, respectively. Upper digestive endoscopy and duodenal biopsy were indicated for cases with positive serology. Results: anti-transglutaminase antibodies were detected in five diabetic patients (prevalence of 11.1%), only one serum sample was positive for IgG isotypes. Nine of thirty-three patients with Crohn's disease had low positive levels for IgA anti-transglutaminase. Anti-endomysium antibodies were detected only in celiac patients. Celiac disease was confirmed in all diabetic patients submitted to duodenal biopsies who presented both anti-transglutaminase and anti-endomisyum antibodies positivity. In Crohn's disease, its clinical status and the diagnosis of celiac disease were not associated with positive anti-transglutaminase result. Conclusions: the prevalence of celiac disease was high in diabetic patients. Anti-tissue transglutaminase antibodies were sensitive and specific markers of celiac disease in this diabetic group, while these antibodies were of limited value for celiac disease screening in patients with Crohn's disease

Abordagem citogenética e molecular em material de abortos espontâneos

OBJETIVOS: avaliar o desempenho da citogenética e das técnicas de hibridização in situ fluorescente (FISH) e reação em cadeia da polimerase (PCR) no estudo das aneuploidias cromossômicas numéricas e na determinação do sexo fetal em amostras de abortos espontâneos. MÉTODOS: duzentos e dezenove amostras de produtos de abortos espontâneos foram submetidas a estudo citogenético. Deste total, 40 amostras foram também submetidas à técnica de PCR-nested para a determinação do sexo fetal: 32 foram selecionadas devido à falha de crescimento no estudo citogenético e oito foram escolhidas ao acaso. Vinte amostras foram selecionadas para detecção de aneuploidias cromossômicas pela técnica de FISH, utilizando-se sondas para os cromossomos 13, 18, 21, X e Y: 13 casos foram submetidos a FISH devido à falha de crescimento no estudo citogenético e sete foram escolhidos ao acaso. Foi calculada a taxa de sucesso (obtenção de cariótipo) de cada técnica. Para comparação das taxas de sucesso foi utilizado o teste de chi2, sendo considerados significantes resultados com p<0,05. Foi avaliado o índice de acerto entre os resultados das amostras submetidas a mais de um exame, tomando-se como padrão-ouro o resultado do estudo citogenético. RESULTADOS: houve crescimento celular em 84,9% das amostras submetidas a análise citogenética. Em 51,1% dos casos foram encontradas alterações cromossômicas: 65,2% trissomias, 17,9% triploidias, 9,4% tetraploidias, 4,2% monossomia do cromossomo X e 1,1% trissomia dupla, tetrassomia e alteração estrutural. A trissomia mais freqüente foi a do cromossomo 16 (39%). FISH e PCR tiveram taxa de sucesso de 90%, não diferindo significativamente do exame citogenético. Em todos os casos submetidos a mais de um exame os resultados foram concordantes. Nas amostras com falha de crescimento celular no exame citogenético e submetidas a outra técnica, a PCR obteve sucesso em 87,5% e a FISH em 84,6%. CONCLUSÃO: o estudo citogenético de restos ovulares de abortamentos espontâneos teve elevada taxa de sucesso e evidenciou anomalias cromossômicas em mais da metade dos casos. As técnicas de biologia molecular (PCR-nested e FISH) complementaram o estudo citogenético e permitiram a obtenção de resultados seguros na detecção de alterações cromossômicas numéricas e na determinação do sexo fetal

Avaliação de um modelo experimental de enterocolite necrosante neonatal em ratos Evaluation of an experimental model of necrotizing enterocolitis in rats

OBJETIVO: Avaliar um modelo experimental de enterocolite necrosante em ratos proposto por Okur e colaboradores em 1995. MÉTODOS: Utilizou-se 28 ratos da raça EPM-Wistar no primeiro dia de vida, com peso entre 4 a 6 gramas. Os animais foram submetidos a hipóxia (H) colocando os filhotes em uma câmara de gás CO2 para sacrifício de roedores onde receberam um fluxo de ar contendo 100% de CO2 durante 5 minutos. Após a hipóxia os animais foram reanimados (R) com fluxo de ar contendo O2 a 100%, também durante 5 minutos. Os animais divididos em dois grupos: G1: controle (n=12): ratos não submetidos a H-R; G2: (n=16): ratos submetidos a H-R. Segmentos de intestino delgado e cólon foram preparados para análise histológica. O restante do intestino foi utilizado para dosagem de malondialdeído tecidual. RESULTADOS: Dosagem de malondialdeído do G1 foi em média 1,05 (0,44-2,03) e do G2 foi em média 2,60 (0,59- 6,4) nmol MDA/mg proteína. O G2 teve média significativamente maior do que a do grupo controle (p<0,002). Foi encontrada diferença estatisticamente significante entre os grupos de estudo quanto à distribuição do grau de lesão onde o grupo G1 apresentou graus significantemente menores do que o grupo G2. CONCLUSÕES: O modelo mostrou que a hipóxia neonatal em ratos provoca lesões na parede intestinal.. Apesar das lesões histológicas discretas é um bom método para avaliação da liberação de radicais livres teciduais.<br>OBJECTIVE: To evaluate an experimental model of necrotizing enterocolitis in rats proposed by OKUR e col. in 1995. METHODS: On their first day of life, 28 EPM-Wistar rats weighing between 4 and 6 grams were submitted to hypoxia (H) by placing them in a CO2 gas chamber for rodents' sacrifice, where they received a 100% CO2 air flow for 5 minutes. After the hypoxia the animals were reanimated (R) with a 100% O2 air flow, also for 5 minutes. The animals were allocated in two groups: G1: control (n=12): rats not submitted to H-R; G2: (n=16): rats submitted to H-R. Segments of the small intestine and colon were prepared for histological analysis. The remaining intestine was used to measure tissular malondialdehyde. RESULTS: Mean malondialdehyde dosages were 1.05 (0.44-2.03) and 2.60 (0.59- 6.4) nmol MDA/mg protein for G1 and G2, respectively. G2's mean value was significantly higher than in the control group (p<0.002). Significant statistical difference between the studied groups was found in relation the level of injury, with G1 presenting significantly lower levels than G2. CONCLUSIONS: The model showed that neonatal hypoxia may cause intestinal wall injury in rats. Despite the discreet histological injuries found, the method is suitable for evaluation of tissular free radicals