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Avaliação do mecanismo de ação tipo ansiolítica do óleo essencial de Citrus sinensis (Laranja doce) em modelos animais
Orientador : Prof. Dr. Roberto AndreatiniTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa: Curitiba, 30/03/2017Inclui referênciasResumo: A ansiedade está relacionada a alteração nas vias de neurotransmissão. Tem-se que substâncias disponíveis para o tratamento apresentam múltiplos efeitos adversos. Assim, busca-se alternativas para o tratamento. Destacando os óleos essenciais do gênero Citrus, como o óleo de Citrus sinensis. O objetivo deste estudo foi examinar o efeito ansiolítico da inalação do óleo essencial de laranja doce (Citrus sinensis) em modelos de ansiedade. Bem como, a relação deste efeito com os sistemas de neurotransmissão. Foram utilizados camundongos machos Swiss. Os animais foram submetidos a 15 minutos de inalação, com óleo essencial (Citrus sinensis), antes dos testes Esconder Esferas, Hipofagia Induzida por Neofobia, Caixa Claro-Escuro, Labirinto em Cruz Elevado, Campo Aberto e Caixa de Movimentação Espontânea. Posteriormente, foram realizados desafios farmacológicos para testar a influência dos sistemas de neurotransmissão (noradrenérgico, gabaérgico, canabinóide, serotonérgico e nitrinérgico) no efeito tipo ansiolítico do óleo essencial. Adicionalmente foi realizada a análise NADPH-diaforase, no córtex cerebral dos animais. As conclusões acerca do estudo demonstram que o óleo essencial de Citrus sinensis apresentou efeito ansiolítico, no modelo de Esconder Esferas, na concentração de 5% e 10%. O teste da Caixa Claro-Escuro indicou que o tratamento com o óleo essencial aumentou significativamente o tempo de permanência no lado claro. Parâmetro consistentemente relacionado, neste modelo, a um efeito tipo ansiolítico. O teste de Hipofagia Induzida por Neofobia demonstrou uma diminuição do tempo de latência para iniciar a ingesta, sendo este um indicativo de efeito ansiolítico. No teste do Campo Aberto os animais, não apresentaram alteração da atividade locomotora, sendo, entretanto, observada alteração da emocionalidade (diminuição significativa do número de bolos fecais). Sugerindo um efeito tipo ansiolítico do óleo essencial de C. sinensis no campo aberto. E no teste do Labirinto em Cruz Elevado os animais demonstraram um aumento do número de entradas e da porcentagem de entradas nos braços abertos. Novamente, não foi observada alteração da atividade locomotora na caixa de movimentação o que é coerente com ausência de alteração do número de entradas nos braços fechados neste modelo, parâmetro considerado índice de atividade locomotora no modelo. Neste modelo, este perfil é condizente com um efeito tipo ansiolítico. O pré-tratamento com picrotoxina não influenciou o efeito do óleo essencial de C. sinensis no modelo esconder esferas, indicando a não participação GABAérgica neste efeito. O resultado do sistema noradrenérgico pode ser considerado inconclusivo. O pré-tratamento com WAY100635 bloqueou o efeito tipo ansiolítico apresentado pelo óleo essencial de C. sinensis, indicando que o sistema serotonérgico mediaria o efeito ansiolítico do óleo essencial de C. sinensis. O antagonista AM251 reverteu o efeito tipo ansiolítico do óleo essencial. Este resultado sugere que o sistema canabinóide participe do efeito tipo ansiolítico do óleo essencial de C. sinensis. Novamente, o óleo essencial de C. sinensis a 5% e o 7-NI apresentaram efeito tipo ansiolítico no modelo esconder esferas, sem alterar significativamente a atividade locomotora. Observou-se que camundongos que receberam inalação de óleo essencial de C. sinensis apresentaram menor expressão de NADPH-diaforase no córtex cerebral. Este resultado é coerente com os resultados encontrados no modelo esconder esferas. Finalmente, a compilação de todos os resultados deste estudo permite sugerir que o óleo essencial de Citrus sinensis (laranja doce), administrado por via inalatória, apresentou efeito tipo ansiolítico em vários modelos de ansiedade, e tal efeito, possivelmente, parece estar sendo mediado pelos sistemas de neurotransmissão nitrinérgico, serotonérgico e canabinóide. Palavras-chave: Ansiedade. Óleo essencial. Citrus sinensis. Esconder Esferas.Abstract: Anxiety is related to changes in neurotransmission pathways. It has been found that substances available for treatment have multiple adverse effects. Thus, alternatives to treatment are sought. Highlighting the essential oils of the genus Citrus, such as Citrus sinensis oil. The objective of this study was to examine the anxiolytic effect of inhalation of sweet orange essential oil (Citrus sinensis) on anxiety models. As well, the relationship of this effect with neurotransmission systems. Swiss male mice were used. The animals were submitted to 15 minutes of inhalation with essential oil (Citrus sinensis), before the tests Marble burying, Neophobia-Induced Hypophagia, Light-Dark Box, Elevated plus maze, Open Field and Spontaneous Movement Box. Subsequently, pharmacological challenges were performed to test the influence of neurotransmission systems (noradrenergic, gabaergic, cannabinoid, serotonergic and nitrinergic) on the anxiolytic of essential oil. In addition, NADPH-diaphorase analysis was performed in the cerebral cortex of the animals. The conclusions about the study showed that the essential oil of Citrus sinensis showed an anxiolytic effect, in the test of Hide Spheres, in the concentration of 5% and 10%. The Light-Dark Box test indicated that the treatment with the essential oil significantly increased the residence time on the light side. Parameter more consistently related to an anxiolytic effect. The Neophobia-Induced Hypophagia test demonstrated a decrease in the latency time to start the intake, which is indicative of an anxiolytic effect. In the open field test, the animals showed no alteration of the locomotor activity, but an alteration on emotional (significant decrease in the number of stool) was observed. Suggesting an anxiolytic effect of C. sinensis essential oil in the open field. And in the Elevated plus maze test the animals showed an increase in the number of entries and the percentage of entries in the open arms. Again, no change in the locomotor activity was observed in the movement box, which is consistent with the absence of a change in the number of entries in the closed arms in this model, a parameter considered as an index of locomotor activity in the model. In this model, this profile is consistent with an anxiolytic effect. Pretreatment with picrotoxin did not influence the effect of the essential oil of C. sinensis on the test of Marble burying, indicating the GABAergic non-participation in this effect. The outcome of the noradrenergic system may be considered inconclusive. Pre-treatment with WAY100635 blocked the anxiolytic effect of C. sinensis essential oil, indicating that the serotonergic system would mediate the anxiolytic effect of the essential oil of C. sinensis. The AM251 antagonist reversed the anxiolytic effect of the essential oil. This result suggests that the cannabinoid system participates in the anxiolytic effect of the essential oil of C. sinensis. Again, the essential oil of 5% C. sinensis and 7-NI presented an anxiolytic effect in the test of Marble burying, without significantly altering the locomotor activity. It was observed that mice receiving inhalation of C. sinensis essential oil showed lower expression of NADPH-diaphorase in the cerebral cortex. This result is consistent with the results found in the test of Marble burying. Finally, the compilation of all the results of this study suggests that the essential oil of Citrus sinensis (sweet orange), inhalation, presented an anxiolytic effect in several anxiety models, and this effect possibly seems to be mediated by Nitrinergic, serotonergic and cannabinoid neurotransmission. Key words: Anxiety. Essential oil. Citrus sinensis. Marble burying
Efeito da Administração Oral do Extrato de Baccharis dracunculifolia na obesidade induzida por Glutamato Monossódico (MSG)
In recent years diabetes has been gaining huge proportions, due to changes in the habits of life, poor diet and physical inactivity are key factors in disease development. To this end, various species of plants have been used etnofarmacologicamente or in clinical trials or to treat and combat the symptoms of Diabetes Mellitus. The present
study used the methanol extract of the plant Bracharis dracunculifolia (rosemary field) belonging to the Asteraceae family, with the objective of evaluating the effect of
his administration on hypothalamic obesity in animal model of MSG. The methodology was based on the preparation of the extract metabolic B. dracunculifolia by means of drying processes, spraying, orbital agitation of the extract in methanol, filtration and addition of rotaevaporação toxicity test of the extract in the brine shrimp. To obtain MSG animals, were used in newborn animals still injection of monosodium glutamate (MSG) for five consecutive days at a dose of 4 mg / g body weight to induce obesity. Treatment with methanol extract was carried out on animals at 180
days of life, for 30 days. Weight was evaluated, consumption of water and feed throughout the experiment. And after the animals have been sacrificed held in the isolation of pancreatic islets which were incubated with increasing concentrations of glucose (5.6 mM, 8.3 mM, 16.7 mM). The results obtained in the study demonstrated low toxicity of the extract of B. dracunculifolia. The MSG animals had proven by
induction of obesity increased Lee index, and higher levels of visceral and subcutaneous fat compared to controls. The MSG animals weighed less, consumed less water and less food and had impaired glucose tolerance. The biochemical parameters did not obtain significant differences, except for triglycerides which showed to be higher in MSG animals, not having succeeded in restoring the extract this parameter. In the isolation of pancreatic islets, MSG animals that received the
extract of B. dracunculifolia showed a significant secretion of insulin by the islets isolated, noting that the concentration of 8.3 mM and 16.7 mM was obtained increased secretion of insulin. It is concluded that the methanol extract of B.
dracunculifolia obtained significant effect on insulin secretion in pancreatic islet cell isolation, noting the results obtained in the group MSG (MP), which were hyperinsulinemia because of a possible enhancement of oxidative stress, especially
the high antioxidant content present in the extract B. dracunculifolia used in the study.Nos últimos anos o Diabetes vem ganhando grandes proporções, devido a mudanças nos hábitos de vida das pessoas, má alimentação e sedentarismo, que são fatores centrais no desenvolvimento da doença. Para tanto, várias espécies de plantas vêm sendo utilizadas etnofarmacologicamente ou em ensaios clínicos para
tratar e ou combater os sintomas do Diabetes Mellitus. O presente estudo utilizou o extrato metanólico da planta Bracharis dracunculifolia (alecrim do campo), pertencente a família Asteraceae, com o objetivo de avaliar o efeito de sua
administração na obesidade hipotalâmica em modelo de animais MSG. A metodologia se baseou na preparação do extrato metabólico de B. dracunculifolia, por meio de processos de secagem, pulverização, agitação orbital do extrato em metanol, filtragem e rotaevaporação além do teste de toxicidade do extrato frente a Artemia salina. Para a obtenção de animais MSG, foram aplicados nos animais
ainda neonatos injeção de glutamato monossódico (MSG), durante cinco dias consecutivos, na dose de 4mg/g de peso corporal, para indução da obesidade. O tratamento com o extrato metanólico foi realizado nos animais aos 180 dias de vida, durante 30 dias. Foi avaliado o peso, consumo de água e ração durante todo o experimento. E após os animais terem sido sacrificados realizou-se o isolamento de ilhotas pancreáticas, que foram incubadas em concentrações crescentes de glicose (5,6mM; 8,3mM; 16,7mM). Os resultados obtidos no estudo demonstraram baixa toxicidade do extrato de B. dracunculifolia. Os animais MSG obtiveram indução da obesidade comprovada pelo aumento do Índice de Lee, e maior teor de gorduras viscerais e subcutânea em relação aos controles. Os animais MSG apresentaram
menor peso, consumiram menos água e menos ração e apresentaram intolerância a glicose. Os parâmetros bioquímicos não obtiveram diferenças significativas, com
exceção dos triglicerídeos que apresentou-se maior nos animais MSG, não tendo o extrato conseguido restaurar este parâmetro. No isolamento de ilhotas pancreáticas, os animais MSG que receberam o extrato de B. dracunculifolia apresentaram uma secreção significativa de insulina pelas ilhotas isoladas, ressaltando que na concentração de 8,3mM e 16,7mM foi obtida maior secreção de insulina. Conclui-se
que o extrato metanólico de B. dracunculifolia obteve efeito significativo da secreção de insulina, no isolamento de ilhotas pancreáticas, ressaltando os resultados obtidos no grupo MSG (MP), que se apresentaram hiperinsulinêmicos, devido a uma
possível melhora do stress oxidativo, destacando-se o alto teor antioxidante presente no extrato de B. dracunculifolia utilizado no estudo
A Systematic Review of the Anxiolytic-Like Effects of Essential Oils in Animal Models
The clinical efficacy of standardized essential oils (such as Lavender officinalis), in treating anxiety disorders strongly suggests that these natural products are an important candidate source for new anxiolytic drugs. A systematic review of essential oils, their bioactive constituents, and anxiolytic-like activity is conducted. The essential oil with the best profile is Lavendula angustifolia, which has already been tested in controlled clinical trials with positive results. Citrus aurantium using different routes of administration also showed significant effects in several animal models, and was corroborated by different research groups. Other promising essential oils are Citrus sinensis and bergamot oil, which showed certain clinical anxiolytic actions; along with Achillea wilhemsii, Alpinia zerumbet, Citrus aurantium, and Spiranthera odoratissima, which, like Lavendula angustifolia, appear to exert anxiolytic-like effects without GABA/benzodiazepine activity, thus differing in their mechanisms of action from the benzodiazepines. The anxiolytic activity of 25 compounds commonly found in essential oils is also discussed