Análise morfológica e morfométrica de hemoparasitos em répteis de vida livre e cativeiro

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorCNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e TecnológicoFAPEMIG - Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas GeraisTrabalho de Conclusão de Curso (Graduação)Dentre o grupo de hemogregarinas, Haemogregarina sp. é o gênero mais observado em répteis. Este protozoário é, aparentemente, bem adaptado, causando pouco ou nenhuma alteração clínico-patológica em seus hospedeiros, porém, há casos de anemia hemolítica e infecção crônica relatados. O presente estudo teve como objetivo analisar por morfologia e morfometria os hemoparasitos dos gêneros Haemogregarina, Plasmodium e Trypanosoma em répteis de vida livre e cativeiro. Um número de 222 répteis (58 crocodilianos, 78 testudines e 86 serpentes) foram utilizados neste estudo. Amostras de sangue foram coletadas nos estados de Mato Grosso, Goiás e Minas Gerais. Após a coleta, três extensões sanguíneas de cada indivíduo foram feitas, fixadas com metanol absoluto e corados pelo método Giemsa (10%). As análises morfológicas foram realizadas por microscopia convencional com uma ampliação de 100x. Os parâmetros morfométricos calculados, o comprimento (C), a largura (L) e a área (A) foram realizados com o software ImageJ. A média e o desvio padrão foram calculados usando o software Excel. Neste trabalho, foi concluído que dentre os gêneros de hemoparasitos em répteis apresentados, as hemogragarinas foram mais prevalentes. No grupo das hemogragarinas, Haemogregarina sp. foi observado em testudines e o gênero Hepatozoon em crocodilianos e serpentes. A identificação do gênero Haemogregarina foi possível através da análise morfológica e morfométrica, das formas evolutivas sanguíneas em testudines. A diversidade morfológica e morfométrica foi verificada em gametócitos de Hepatozoon sp. em serpentes

Concomitant infection of Haemogregarina sp. and Staphylococcus aureus in free-living yellow-spotted river turtle (Podocnemis unifilis): case report.

A male adult yellow-spotted river turtle Podocnemis unifilis (Chordata: Testudines: Podocnemididae) was captured during field collections. Blood sample was collected for haemoparasite screening by conventional light microscopy. Morphometric and morphological analyzes of the parasite developmental stages were performed in the blood extensions, as well as the parasitemia intensity. Gametocytes of hemogregarines and innumerable bacterial cells were observed. To identify the bacteria present, a culture was performed and the presence of Staphylococcus aureus was observed. It was concluded that a co-infection of Staphylococcus aureus (Firmicutes: Bacillales: Staphylococcaceae) and Haemogregarina sp. (Apicomplexa: Adeleina: Haemogregarinidae) was observed in this free-living yellow-spotted river turtle Podocnemis unifilis.

IgY technology applied in the immunodiagnosis of human neurocysticercosis using Taenia crassiceps fraction obtained by hydrophobicity

Human neurocysticercosis (NCC) is a worldwide neglected disease caused by the metacestode of Taenia solium and responsible for various complications and neurological disorders. The aim of this study was to use specific IgY antibodies produced by laying hens immunized with hydrophobic fraction of Taenia crassiceps metacestodes (hFTc), for application in immunodiagnosis of human NCC. Antibodies obtained from chicken egg yolk were fractionated, purified and evaluated for potential production and antigen recognition (anti-hFTc). Indirect ELISA and Western blotting assays were carried out to evaluate the kinetics of production and avidity of maturation of IgY antibodies anti-hFTc throughout the experimental activity. The purified and specific IgY antibodies anti-hFTc were applied in an indirect immunofluorescence assay for detection of parasitic antigens in histological sections of Taenia crassiceps metacestodes. Sandwich ELISA assays were performed to detect circulating immune complexes formed by IgG and parasitic antigens in human sera. A total of 114 serum samples were selected and divided into three groups: Group 1 (n = 44), composed by individuals with confirmed NCC and subdivided into active NCC (n = 22) and inactive NCC (n = 22); Group 2 (n = 35), by healthy individuals for NCC; and Group 3 (n = 35), by individuals who presented other parasitic diseases based on parasitological exams. The results revealed a diagnostic performance of 93.2 % sensitivity and 94.3 % specificity for detection of immunocomplexes in human sera with confirmed NCC. In conclusion, specific IgY antibodies produced from immunization of hens with hFTc antigens were able to detect T. solium immune complexes in human sera, being an efficient tool for NCC immunodiagnosis.CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorCNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e TecnológicoDissertação (Mestrado)A neurocisticercose humana (NCC) é uma doença mundialmente negligenciada causada pelo metacestódeo de Taenia solium e responsável por diversas complicações e desordens neurológicas. O objetivo deste estudo foi utilizar anticorpos IgY específicos produzidos por galinhas de postura imunizadas com antígenos da fração hidrofóbica de metacestódeos de Taenia crassiceps (FhTc) no imunodiagnóstico da NCC humana. Anticorpos obtidos a partir da gema de ovos de galinhas foram fracionados, purificados e avaliados quanto ao potencial de produção e reconhecimento antigênico (anti-FhTc). Ensaios ELISA indireto e Western blotting foram realizados para avaliação da cinética de produção e maturação da avidez dos anticorpos IgY anti-FhTc ao longo da atividade experimental. Os anticorpos IgY que apresentaram índices de avidez superiores a 85 % foram purificados e aplicados no imunodiagnóstico da NCC. Os anticorpos IgY específicos anti-FhTc purificados foram testados em reação de imunofluorescência indireta e reconheceram antígenos parasitários extra e intrategumentares em cortes histológicos de metacestódeos de Taenia solium e Taenia crassiceps. Ensaios ELISA sanduíche foram realizados para detecção de imunocomplexos circulantes formados por IgG e antígenos de T. solium em soros humanos. Um total de 114 amostras de soro foram selecionadas e divididas em três grupos: Grupo 1 (n = 44), composto por indivíduos com NCC confirmada, subdivididos em NCC ativa (n = 22) e inativa (n = 22); Grupo 2 (n = 35), por indivíduos saudáveis; e Grupo 3 (n = 35), por indivíduos que apresentavam outras parasitoses. Os resultados revelaram um desempenho diagnóstico de 93,2 % de sensibilidade e 94.3 % de especificidade para detecção de imunocomplexos em soros humanos com NCC confirmada. Os anticorpos IgY específicos produzidos a partir da imunização de galinhas com antígenos de FhTc apresentaram alto rendimento e reconhecimento antigênico, sendo capazes de detectar imunocomplexos em soros humanos. A aplicação inédita de anticorpos IgY específicos anti-FhTc no presente estudo mostrou-se eficiente no imunodiagnóstico da NCC