Standardization of a method to study angiogenesis in a mouse model

In the adult organism, angiogenesis is restricted to a few physiological conditions. On the other hand, uncontrolled angiogenesis have often been associated to angiogenesis-dependent pathologies. A variety of animal models have been described to provide more quantitative analysis of in vivo angiogenesis and to characterize pro- and antiangiogenic molecules. However, it is still necessary to establish a quantitative, reproducible and specific method for studies of angiogenesis factors and inhibitors. This work aimed to standardize a method for the study of angiogenesis and to investigate the effects of thalidomide on angiogenesis. Sponges of 0.5 x 0.5 x 0.5 cm were implanted in the back of mice groups, control and experimental (thalidomide 200 mg/K/day by gavage). After seven days, the sponges were removed. The dosage of hemoglobin in sponge and in circulation was performed and the ratio between the values was tested using nonparametric Mann-Whitney test. Results have shown that sponge-induced angiogenesis quantitated by ratio between hemoglobin content in serum and in sponge is a helpful model for in vivo studies on angiogenesis. Moreover, it was observed that sponge-induced angiogenesis can be suppressed by thalidomide, corroborating to the validity of the standardized method.No adulto, a angiogênese é restrita a poucas condições fisiológicas. Ao contrário, a angiogênese descontrolada frequentemente está associada a patologias dependentes de angiogênese. Vários modelos animais foram descritos para ajudar na análise quantitativa da angiogênese in vivo e caracterizar moléculas pró e antiangiogênicas. Porém, ainda é necessário estabelecer um método quantitativo, reproduzível e específico para estudar os fatores pró e antiangiogênicos. Os objetivos deste trabalho foram padronizar um método para estudar angiogênese e investigar os efeitos da talidomida na angiogênese. Esponjas de 0,5 x 0,5 x 0,5 cm foram implantadas no dorso de camundongos controles e tratados (talidomida 200 mg/K/dia, por gavagem). Após sete dias, as esponjas foram retiradas. Avaliou-se a quantidade de hemoglobina na esponja e na circulação. A razão obtida entre esses valores foi testada por meio do teste não paramétrico Mann-Whitney. Os resultados mostraram que a angiogênese induzida pela esponja e quantificada por meio da razão hemoglobina esponja/circulação é um modelo útil para estudos in vivo de angiogênese. Além disso, observou-se que a angiogênese induzida pela esponja diminui na presença de talidomida, corroborando para a validação do método padronizado.Faculdade de Medicina do ABC Departamento de Morfologia e Fisiologia Disciplina de FarmacologiaUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Quimicas e Farmaceuticas Instituto de Ciencias AmbientaisUNIFESP, Quimicas e Farmaceuticas Instituto de Ciencias AmbientaisSciEL