Antimicrobial activity of centaurea solstitialis and centaurea calcitrapa

Centaurea solstitialis y Centaurea calcitrapa (Asteraceae), son plantas conocidas vulgarmente como Abrepuño amarillo y Abrepuño colorado respectivamente. Son malezas que se desarrollan en la región pampeana, siendo la primera de ellas la más abundante. Investigaciones realizadas en otros países han demostrado que el género Centaurea posee propiedades antimicrobianas. El objetivo de este trabajo fue comprobar si esta actividad biológica se encuentra presente en las malezas que crecen en la provincia de La Pampa (Argentina). Se evaluó la Concentración Inhibitoria Mínima y la Concentración Bactericida Mínima mediante el método de dilución en caldo de extractos metanólicos de capítulos secos de ambas especies. Los resultados obtenidos demuestran que Centaurea calcitrapa, bajo nuestras condiciones de trabajo, presenta actividad antimicrobiana en cuatro de las diez cepas ensayadas (Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae y Salmonella typhimurium), mientras que Centaurea solstitialis muestra menor actividad antibacteriana inhibiendo sólo a dos cepas (Streptococcus agalactiae y Staphylococcus aureus).Centaurea solstitialis and Centaurea calcitrapa (Asteraceae), commonly known as Abrepuño amarillo and Abrepuño colorado respectively, are weeds that grow in the Province of Pampea Argentina, the former of which being the most abundantly encountered species. Research carried out in other countries has demonstrated that the genus Centaurea possesses antimicrobial properties. The objective of this work was to ascertain the extent to which such a biological activity may be present in these species, found growing in this particular Argentinian Province. Minimum Inhibitory Concentration and Minimum Bactericide Concentration was evaluated by means of the dilution method, in broth of methanolic extracts of dry heads of both species. The results obtained, under the working conditions of this study, demonstrated that Centaurea calcitrapa, presents antimicrobial activity against four of the ten assayed strains: Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae and Salmonella typhimurium, while Centaurea solstitialis shows antibacterial activity to a lesser extent, with inhibitory activity only being found against two strains: Streptococcus agalactiae and Staphylococcus aureus

Elaboración y prueba de potencia de sensitinas correspondientes a Mycobaterium phlei y Micobacterium fortuitum aisladas de suelos pampeanos en la República Argentina

In countries that have managed to eradicate bovine tuberculosis, has been shown to interfere with certain MNT tuberculosis diagnosis, when applied to the intradermal purified protein derivative Mycobacterium bovis PPD. It has also been established that some species can invade and replicate MNT inside Acanthamoeba parasites such as Dictyostelium discoideum, these protozoa may act as reservoirs of MNT mammals parasitized. Exist in mammals in the natural environment of lakes, sewage, soil, environmental dust,etc.,and manmade artificial enviroments such as drinking water, aquariums, plactonica and biofilms. The objectives of the proyect were to develop the sensitines (PPD) from the isolates of NTM isolated from soils of the province of La Pampa and check possible cross-reaction with PPD bovine.Two sensitines series of Mycobacterium fortuitum corresponding to and another Mycobacterium phlei, with protein concentration of 1.5 mg/mL. Guinea pigs were sensitized with Mycobacterum phlei, Mycobacterium fortuitum and Mycobacterium bovis power with sterile vaseline and pumice. After 120 days tests potency were carried out on the flanks of guinea pigs. The relative activity in guinea pigs sensitized with Mycobacterium bovis was of 2.18% with M.phlei and of 0.4% for the PPD Mycobacterium fortuitum ,wich shows that the environmental mycobacteria had no relevant actions in guinea pigs tuberculin intradermal reactionEn países que han logrado erradicar la tuberculosis bovina, se ha comprobado que ciertas MNT interfieren en el diagnóstico de la tuberculosis, cuando se aplica la intradermorreacción con el derivado proteico purificado de Mycobacterium bovis (PPD). Además se ha establecido que algunas especies de MNT pueden invadir y replicar en el interior de parásitos tales como Acanthamoeba y Dictyostelium discoideum pudiendo actuar estos protozoarios como reservorios de MNT en los mamíferos parasitados. Existen MNT en el ambiente natural de lagos, aguas de alcantarillas, suelos, polvo ambiental, étc y en los ambientes artificiales construídos por el hombre tales como : agua potable, acuarios, ya sea en forma planctónica o formando biofilm. Los objetivos del proyecto consistieron en elaborar las sensitinas (PPD) a partir de las cepas de MNT aisladas de los suelos de la provincia de La Pampa y comprobar la posible reacción cruzada con el PPD bovino. Se elaboraron dos series de sensitinas una correspondiente a M. fortuitum y otra a M. phlei, con una concentración de proteína en ambas de 1.5mg/mL. Se sensibilizaron cobayos con polvo de M. phlei, M.fortuitum y M. bovis juntamente con vaselina estéril y piedra pómez. A los 120 días se efectuaron las pruebas de potencia en los flancos de los cobayos. La actividad relativa en cobayos sensibilizados con M.bovis fue de 2.18% con el PPD de M.phlei y de 0.4% para el PPD de M.fortuitum lo cual demuestra que las micobacterias ambientales no presentaron un accionar relevante en la reacción intradérmica tuberculínica en cobayos

Reacción en cadena de la polimerasa (RCP) como herramienta diagnóstica de leucosis enzoótica bovina

he possible utilization of PCR as a diagnostic tool for enzootic bovine leukosis, comparing its use to traditional serologic techniques such as immunodiffusion agar assay (IDGA) and enzyme-linked immunoabsorbent assay (ELISA) under epidemiological conditions present in Argentina, is analized. Further the use of alternative strategies associated with PCR will be reviewed in order to evaluate the use of PCR as a routine technique in modrately sophisticated laboratories. It is concluded that PCR becomes important under situaations of low prevalence, in cases where it becomes necessary to define specific epidemiological circunstancesSe analiza la posibilidad de utilizacion de RCP como herramienta diagnóstica de Leucosis Enzootica Bovina, comparándola con las técnicas serológicas tradicionales como inmunodifusión en gel de agar (IDGA) e inmunoensayo enzimático (ELISA), en las condicones epidemiológicas presentes en Argentina con respecto a dicha enfermedad. Se discuten además las alternativas de distintas estrategias asociadas a RCP, de tal manera de que la misma constituya una técnica de uso rutinario en laboratos de mediana complejidad. Se concluye que esta técnica adquiere importancia para condiciones de prevalencias muy bajas, en casos puntuales, donde sea necesario definir situaciones epidemiológicas específicas

Estudios de la actividad antimicrobiana de cuatro especies del género Baccharis

Four species from Baccharis genus (Compositae) are assessed due to antimicrobial activity against eight bacterial species. The modified Kirby Bauer method was used in the assay. The methalonic extracts from B. articulata, B. soliafolia, B. pingraea showed an inhibitory halo in comparison with Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Staphylococcus epidermidis. None of the studied species showed activity against Gram negative bacteria. B. spartioides displayed no antimicrobial activity against none of the investigated bacterial species.El presente estudio evaluó en cuatro especies del género Baccharis (Compositae) la presencia de actividad antimicrobiana frente a ocho especies bacterianas. El método utilizado en el ensayo fue el Kirby Bauer modificado. Los extractos metanólicos de B. articulata, B. soliafolia, B. pingraea presentaron halo de inhibición frente a Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae y Staphylococcus epidermidis. Ninguna de las especies investigadas presento actividad frente a bacterias Gram negativo. B. spartioides no demostró actividad antimicrobiana frente a ninguna de las especies bacterianas investigadas

Estudios microbiológicos y toxicológicos de mitracarpus megapotamicus

Objetivo: evaluar la actividad antimicrobiana y la toxicidad de extractos obtenidos de la especie vegetal Mitracarpus megapotamicus. Material y Métodos: se determinó la concentración inhibitoria mínima mediante el método de dilución en agar del extracto metanólico. Se utilizó la técnica de difusión en agar para comprobar la persistencia de la actividad antimicrobiana en extracciones acetónicas y clorofórmicas. Los ensayos de toxicidad aguda y subaguda se llevaron a cabo en ratones utilizando una dosis única de 5.000 mg/kg y una dosis diaria durante 14 días de 1.250 mg/kg de extracto hidroalcohólico, respectivamente. Resultados: La concentración inhibitoria mínima del extracto metanólico fue de 0,48 mg/ml para Streptococcus equi, Proteus mirabilis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis y de 0,96 mg/ml para Escherichia coli. La actividad antimicrobiana se manifestó también en las fracciones extractadas con acetona y cloroformo, frente a Staphylococcus aureus. El extracto hidroalcohólico no produjo cambios funcionales ni alteraciones histopatológicas en estudios de toxicidad aguda y subaguda en ratones. Conclusión: Los resultados obtenidos permitirán proyectar estudios de identificación de compuestos y establecer futuros protocolos para determinar la eficacia en modelos in vivo.Aim: To evaluate the antimicrobial activity and toxicity of extracts obtained from the plant species Mitracarpus megapotamicus. Material and Methods: The minimum inhibitory concentration by agar dilution method of the methanolic extract was determined. The agar diffusion method to check the persistence of antimicrobial activity in chloroform and acetone extractions were used. Acute and subacute toxicity assays in mice were carried out using a single dose of 5,000 mg / kg and a daily dose for 14 days of 1,250 mg / kg of hydroalcoholic extract, respectively. Results: The minimum inhibitory concentration of the methanol extract was 0.48 mg / ml for Streptococcus equi, Proteus mirabilis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and 0.96 mg / ml for Escherichia coli. Antimicrobial activity was also expressed in fractions excerpted with acetone and chloroform, against Staphylococcus aureus. The hydroalcoholic extract produced neither functional changes nor histopathological alterations in studies of acute and subacute toxicity in mice. Conclusion: The results obtained will allow to design compound identification studies and establish future protocols to determine effectiveness in models in vivo.Financiado por la Universidad Nacional de La Pampa, Argentina

Estudios microbiológicos y toxicológicos de Mitracarpus megapotamicus

Aim: To evaluate the antimicrobial activity and toxicity of extracts obtained from the plant species Mitracarpus megapotamicus.Material and Methods: The minimum inhibitory concentration by agar dilution method of the methanolic extract was determined. The agar diffusion method to check the persistence of antimicrobial activity in chloroform and acetone extractions were used. Acute and subacute toxicity assays in mice were carried out using a single dose of 5,000 mg / kg and a daily dose for 14 days of 1,250 mg / kg of hydroalcoholic extract, respectively.Results: The minimum inhibitory concentration of the methanol extract was 0.48 mg / ml for Streptococcus equi, Proteus mirabilis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and 0.96 mg / ml for Escherichia coli. Antimicrobial activity was also expressed in fractions excerpted with acetone and chloroform, against Staphylococcus aureus. The hydroalcoholic extract produced neither functional changes nor histopathological alterations in studies of acute and subacute toxicity in mice.Conclusion: The results obtained will allow to design compound identification studies and establish future protocols to determine effectiveness in models in vivo.Objetivo: evaluar la actividad antimicrobiana y la toxicidad de extractos obtenidos de la especie vegetal Mitracarpus megapotamicus.Material y Métodos: se determinó la concentración inhibitoria mínima mediante el método de dilución en agar del extracto metanólico. Se utilizó la técnica de difusión en agar para comprobar la persistencia de la actividad antimicrobiana en extracciones acetónicas y clorofórmicas. Los ensayos de toxicidad aguda y subaguda se llevaron a cabo en ratones utilizando una dosis única de 5.000 mg/kg y una dosis diaria durante 14 días de 1.250 mg/kg de extracto hidroalcohólico, respectivamente.Resultados: La concentración inhibitoria mínima del extracto metanólico fue de 0,48 mg/ml para Streptococcus equi, Proteus mirabilis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis y de 0,96 mg/ml para Escherichia coli. La actividad antimicrobiana se manifestó también en las fracciones extractadas con acetona y cloroformo, frente a Staphylococcus aureus. El extracto hidroalcohólico no produjo cambios funcionales ni alteraciones histopatológicas en estudios de toxicidad aguda y subaguda en ratones.Conclusión: Los resultados obtenidos permitirán proyectar estudios de identificación de compuestos y establecer futuros protocolos para determinar la eficacia en modelos in vivo

Microbiological and toxicological studies of Mitracarpus megapotamicus

Objetivo: evaluar la actividad antimicrobiana y la toxicidad de extractos obtenidos de la especie vegetal Mitracarpus megapotamicus.Material y Métodos: se determinó la concentración inhibitoria mínima mediante el método de dilución en agar del extracto metanólico. Se utilizó la técnica de difusión en agar para comprobar la persistencia de la actividad antimicrobiana en extracciones acetónicas y clorofórmicas. Los ensayos de toxicidad aguda y subaguda se llevaron a cabo en ratones utilizando una dosis única de 5.000 mg/kg y una dosis diaria durante 14 días de 1.250 mg/kg de extracto hidroalcohólico, respectivamente.Resultados: La concentración inhibitoria mínima del extracto metanólico fue de 0,48 mg/ml para Streptococcus equi, Proteus mirabilis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis y de 0,96 mg/ml para Escherichia coli. La actividad antimicrobiana se manifestó también en las fracciones extractadas con acetona y cloroformo, frente a Staphylococcus aureus. El extracto hidroalcohólico no produjo cambios funcionales ni alteraciones histopatológicas en estudios de toxicidad aguda y subaguda en ratones.Conclusión: Los resultados obtenidos permitirán proyectar estudios de identificación de compuestos y establecer futuros protocolos para determinar la eficacia en modelos in vivo.Aim: To evaluate the antimicrobial activity and toxicity of extracts obtained from the plant species Mitracarpus megapotamicus.Material and Methods: The minimum inhibitory concentration by agar dilution method of the methanolic extract was determined. The agar diffusion method to check the persistence of antimicrobial activity in chloroform and acetone extractions were used. Acute and subacute toxicity assays in mice were carried out using a single dose of 5,000 mg / kg and a daily dose for 14 days of 1,250 mg / kg of hydroalcoholic extract, respectively.Results: The minimum inhibitory concentration of the methanol extract was 0.48 mg / ml for Streptococcus equi, Proteus mirabilis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and 0.96 mg / ml for Escherichia coli. Antimicrobial activity was also expressed in fractions excerpted with acetone and chloroform, against Staphylococcus aureus. The hydroalcoholic extract produced neither functional changes nor histopathological alterations in studies of acute and subacute toxicity in mice.Conclusion: The results obtained will allow to design compound identification studies and establish future protocols to determine effectiveness in models in vivo

Survey of sheep antibodies of smooth and rough strains of brucella in the north patagonic area of La Pampa

Brucellosis is an infectious disease that affects domestic animals, producing heavily losses through abortions, and infertility in rams.The flock epidemiology situation in the north Patagonic area of Argentina (La Pampa) to the present disease is unknown; consequently the objective was to determine the prevalence of the disease. Out of 10.000 sheep, there were sampled 1.800 animals according to the application of the minimum sample size for estimating a rate with specified degree of precision in the Departments of Mara-co, Chapaleufu, Realico, Rancul, Conhelo and Quemu-Quemu representing an area of 22.072 km2, in the frame of reintroduction of sheep production in the province. Independently of the number of sheep per farm, 20- 30% of the flock was sampled, that represent 15% (270) rams and 85% (1.530) ewes. After collecting serum from jugular blood, the samples were analysed either for the presence of antibodies against smooth strain through Buffer Plate Agglutination Test (BPA); or antibodies against rough strain of brucella through Agar Gel Immuno-diffusion Test (AGID). Bewilderment of all the animals was negative to both tests. Despite brucellosis is a high prevalent infectious di-sease in other part of the country, these results emphasise the condition of free areas of the disease

Evaluación de la capacidad de formar biofilm de micobacterias ambientales aisladas de agua de natatorios públicos y de agua de lluvia de la ciudad de General Pico

La persistencia de micobacterias ambientales (MA) en los hábitats modificados por el hombre, entre los cuales se encuentran los natatorios de uso recreacional y/o terapeúticos se debe a su oligotrofia, diversidad nutricional, resistencia a los desinfectantes y fundamentalmente a la formación de biofilm. Estos factores actuarían como agentes selectivos, favoreciendo la proliferación y dominio final de las MA en estos hábitats respecto a otros microorganismos presentes en el agua. Este incremento de micobacterias constituye una potencial fuente de infección principalmente para los individuos inmunocomprometidos. Es sabido que las bacterias se hallan en la naturaleza en dos formas o estados: creciendo en biofilms (99%) y en forma planctónica o de libre flotación (1%). Es clara la ventaja que significa para las micobacterias, ya sean patógenas o ambientales, la capacidad para colonizar superficies (animadas o inanimadas) mediante la formación de biofilm, debido a que éste les brinda mayor disponibilidad de nutrientes y protección contra factores ambientales naturales y artificiales. Teniendo en cuenta este concepto se formuló la 2º hipótesis del proyecto que tiene como objetivo: Evaluar la capacidad de formar biofilm in vitro de las cepas de MA aisladas de distintas fuentes de agua. Para valorar la capacidad de formar biofilm se sembraron inóculos estandarizados de las MA en policubetas estériles de PVC de 96 pocillos (BectonDickinson). Se incubaron a temperatura ambiente durante 30 minutos. Luego se adicionó el medio de cultivo Middlebrook 7H9 (MB) con glicerol. Las policubetas se taparon y se incubaron a 30 °C por 20 días. Para medir la formación del biofilm, los pocillos se lavaron con agua estéril, se tiñeron con cristal violeta al 1% y se incubaron 30 minutos a temperatura ambiente. Posteriormente se lavaron con agua y se secaron sobre papel secante. El colorante incorporado al biofilm se resuspendió en etanol:acetona (70:30). La cuantificación se realizó midiendo densidad óptica en un lector de microplacas (Kayto RT-2100C) a 630 nm. Se destinaron pocillos con el medio de cultivo MB con glicerol sin suspensión bacteriana como control negativo. Se utilizó a Mycobacterium smegmatis (cepa patrón) como control positivo. Los resultados mostraron que tanto los aislamientos de MA en agua de natatorios (9 cepas ensayadas de 16 aislamientos totales) como los correspondientes al agua de lluvia (4 cepas ensayadas de 7 aislamientos) mostraron capacidad para desarrollar biofilm in vitro. Las MA de agua de natatorio: Mycobacterium gordonae, Mycobacterium houstonense, Mycobacterium fortuitum y Mycobacterium mucogenicum (pertenecientes a los clados M. gordonae, M. fortuitum y M. mucogenicum, respectivamente) formaron biofilm mostrando consistencia débil a moderada (rango de absorbancias: 0,035 - 0,556). El biofilm formado por las MA ensayadas del agua de lluvia: Mycobacterium frederikbergense y Mycobacterium holsaticum (pertenecientes a los clados M. neoaurum y M. komossense) y dos cepas no tipificadas, varió desde consistencia débil a moderada-fuerte (rango de absorbancias: 0,160 - 0,738). Los resultados obtenidos hasta la fecha guían a concluir que la persistencia de las MA en los natatorios desinfectados con altas concentraciones de cloro podría asociarse a la capacidad de las mismas para formar biofil

Microscopía electrónica en el género Mycobacterium

In the present work the importance of electronic microscopy is analyzed as a tool in the study of microorganisms.Besides, an analysis of different working methods on bacteriologic samples is done in transmission microscope preparing a work protocol adjusted to the structural characteristics of the environmental mycobacteriaEn el presente trabajo se analiza la importancia de la microscopía electrónica como herramienta en el estudio de microorganismos.Se realiza además un análisis de los distintos métodos de trabajo en muestras bacteriológicas en microscopio de transmisión confeccionando un protocolo de trabajo adaptado a las características estructurales de las micobacterias ambientales