Evaluation of specific protective immune response with different immunological parameters in tuberculosis pleurisy

TB plörezili olguların plevra sıvıları ve periferik kanlarında, lenfosit grup ve alt grupları, aktive lenfositlerin oran ve MS ile TNF-a, İL- 1(5 ve IL-6 düzeylerinin saptanması amacıyla yapılan çalışmada; 1. TB plörezili olguların plevra sıvısı lökosit formüllerindeki lenfosit oranı ( %97.5 + %2.3), TB-dışı plörezili olgulann plevra sıvısındaki ile karşılaştırıldığında (%72.5 ± %15.6), anlamlı olarak yüksek bulundu.. TB plörezili olgularda plevra sıvısı MLS ortalamasının (3250/mm3), aynı olgulann periferik kan (1961/mm3) ve TB- dışı plörezili olgulann periferik kan (2381/mm3) ve plevra sıvısı (1958/mm3) MLS'na göre istatistiki olarak anlamlı olmasa da daha yüksek olduğu saptandı. Bu bulgular literatür verileri ile uyumludur (85-87). 2. TB plörezili hastaların plevra sıvısında CD3+, CD4+ T lenfosit oranlarının arttığı, CD8+ T lenfosit oranlarının TB-dışı plöerizili gruba göre farklılık göstermediği ve dolayısıyla CD4/CD8 oranının artmış olduğu saptandı. Bu veriler diğer araştırmacılar tarafından yapılan çalışmaların verileriyle uyumludur. Buna karşılık, başka çalışmalarda TB plörezili veya menenjitli hastaların periferik kan CD4+ T lenfositlerinde saptanan azalma, bizim çalışmamızda gösterilemedi. 3. Çalışmaya alman gruplar arasında B lenfosit oranlan ve mutlak sayılan arasında bir fark bulunmadı. Bu da literatür verileri ile uyumlu olup TB'a karşı koruyucu immün yanıtta hücresel immünitenin rolü olduğunu kanıtlamaktadır. 4. TB plörezili olgulann plevra sıvısındaki NK hücre ve y8+ T lenfosit oranlan, periferik kan değerleri ile karşılaştırdığında; anlamlı olarak azalmış bulundu. NK hücrelerinin azalması; bu bölgede immünsüpresyonun olaylanamadığını ve yerine 57JL2 ve IL-2r artışı ile karakterize güçlü koruyucu bir immün yanıtın ortaya çıktığını düşündürmektedir. Nitekim bu görüş, IL-2r+ lenfosit oranının TB plörezili hastaların plevra sıvısında artmış olarak bulunmasıyla bir ölçüde kanıtlanmış oldu. y8+ T lenfosit oranlan ve mutlak sayılan yönünden çalışma gruplan arasında bir fark saptanamamasına rağmen, bu olgulardan elde edilecek yS+ T lenfositlerin canlı MTB ile stimülasyonu suretiyle daha sağlıklı sonuçlar alınabileceği görüşündeyiz. 5. Çalışmaya alınan hasta gruplannın plevra sıvısı ve serumlarında, proenflamatuvar sitokinlerden bazılarının düzeyleri araştırıldığında; özellikle IL-6'nın TB plörezili hastalann serumunda TB-dışı plörezili olgulara göre daha yüksek konsantrasyonlarda bulunduğu saptandı. Diğer sitokinler yönünden anlamlı bir fark bulunduğu gösterilemedi. 6. Bütün bu verilerin ışığı altında, TB'daki koruyucu immünitede hücresel immünitenin primer yanıt olduğu; T lenfositlerin ve özellikle CD4+ (helper- endüktör) T hücrelerinin regülasyonu sağlayan temel hücreler olduğu; lezyon bölgesinde IL-2r ekspresyonunun artması ile karakterize bir lenfosit aktivasyonunun söz konusu olduğu ve bunun plevrada aderan süpresör monositlerin ve NK hücrelerinin azlığı veya yokluğu ile açıklanabileceği ortaya konulmuştur. y8+ T lenfositlerinin ve sitokinlerin rolleri açısından kesin veriler elde edilmemiş olmakla birlikte ilerideki çahşmalanmızda bu komponentlerin rollerinin araştırılması için başka birtakım stratejilerin (y5+ T lenfositlerin rolü için in vitro stimülasyon deneyleri; sitokinler yönünden reseptör ve reseptör antagonist ölçümlerinin yanısıra hücreiçi sitokin ölçümleri,.vb) uygulanması gerektiği mesajım vermiştir

Altered Expressions of miR-1238-3p, miR-494, miR-6069, and miR-139-3p in the Formation of Chronic Brucellosis

Brucellosis is a zoonotic disease that is still endemic in developing countries. Despite early diagnosis and treatment of patients, chronic infections are seen in 10–30% of patients. In this study, we aimed to investigate the immunological factors that play roles in the transition of brucellosis from acute infection into chronic infection. Here, more than 2000 miRNAs were screened in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of patients with acute or chronic brucellosis and healthy controls by using miRNA array, and the results of the miRNA array were validated through qRT-PCR. Findings were evaluated using GeneSpring GX (Agilent) 13.0 software and KEGG pathway analysis. Four miRNAs were expressed in the chronic group but were not expressed in acute and control groups. Among these miRNAs, the expression level of miR-1238-3p was increased while miR-494, miR-6069, and miR-139-3p were decreased (p<0.05, fold change > 2). These miRNAs have the potential to be markers for chronic cases. The differentially expressed miRNAs and their predicted target genes involved in endocytosis, regulation of actin cytoskeleton, MAPK signaling pathway, and cytokine-cytokine receptor interaction and its chemokine signaling pathway indicate their potential roles in chronic brucellosis and its progression. It is the first study of miRNA expression analysis of human PBMC to clarify the mechanism of inveteracy in brucellosis

The microRNA expression signature of CD4+ T cells in the transition of brucellosis into chronicity.

Brucellosis is a serious infectious disease that continues to be a significant cause of morbidity worldwide and across all ages. Despite early diagnosis and treatment, 10-30% of patients develop chronic brucellosis. Although there have been recent advances in our knowledge of Brucella virulence factors and hosts' immune response to the infection, there is a lack of clear data regarding how the infection bypasses the immune system and becomes chronic. The present study investigated immunological factors and their roles in the transition of brucellosis from an acute to a chronic infection in CD4+ T cells. CD4+ T cells sorted from peripheral blood samples of patients with acute or chronic brucellosis and healthy controls using flow cytometry as well as more than 2000 miRNAs were screened using the GeneSpring GX (Agilent) 13.0 miRNA microarray software and were validated using reverse transcription polymerase chain reaction (RT-qPCR). Compared to acute cases, the expression levels of 28 miRNAs were significantly altered in chronic cases. Apart from one miRNA (miR-4649-3p), 27 miRNAs were not expressed in the acute cases (p 2). According to KEGG pathway analysis, these miRNAs are involved in the regulation of target genes that were previously involved in the MAPK signalling pathway, regulation of the actin cytoskeleton, endocytosis, and protein processing in the endoplasmic reticulum. This indicates the potential role of these miRNAs in the development of chronic brucellosis. We suggest that these miRNAs can be used as markers to determine the transition of the disease into chronicity. This is the first study of miRNA expression that analyses human CD4+ T cells to clarify the mechanism of chronicity in brucellosis

Immune checkpoint status and exhaustion‐related phenotypes of CD8+ T cells from the tumor‐draining regional lymph nodes in breast cancer

Abstract Background Functional status of T cells determines the responsiveness of cancer patients to immunotherapeutic interventions. Even though T cell‐mediated immunity is inaugurated in the tumor‐adjacent lymph nodes, peripheral blood has been routinely sampled for testing the immunological assays. The purpose of this study is to determine the immune checkpoint molecule expression and the exhaustion‐related phenotype of cytotoxic T cells in the regional lymph nodes from breast cancer patients. Patients and methods Multicolor immunophenotyping was used to determine the expression of PD‐1, TIM‐3, LAG3, CTLA‐4, CCR7, CD45RO, CD127, CD25, CXCR5, and ICOS molecules on CD3+CD4−CD56−CD8+ cytotoxic T cells freshly obtained from the lymph nodes and the peripheral blood samples of the breast cancer patients. The results were assessed together with the clinical data. Results A population of cytotoxic T cells was noted with high PD‐1 and CXCR5 expression in the lymph nodes of the breast cancer patients. Co‐expression of PD‐1, CXCR5, TIM‐3, and ICOS indicated a follicular helper T cell (Tfh)‐like, exhaustion‐related immunophenotype in these cytotoxic T cells. Only a minor population with CTLA‐4 and LAG3 expression was noted. The PD‐1+CXCR5+ cytotoxic T cells largely displayed CD45RO+CCR7+ central memory markers. The amount of CXCR5‐expressing PD‐1− cytotoxic T cells was elevated in the lymph nodes of the patients. Conclusion The regional lymph nodes of breast cancer patients harbor Tfh‐like exhausted cytotoxic T lymphocytes with high PD‐1 and TIM‐3 checkpoint molecule expression. The immunological conditions in the regional lymph nodes should be implicated for immune checkpoint immunotherapy (ICI) of cancer