Estudio de marcadores de enfermedad mínima residual en neuroblastoma y de su posible aplicación clínica

El neuroblastoma es el tumor sólido extracraneal más frecuente en la infancia y el cuarto en frecuencia en el conjunto global de neoplasias infantiles. Su incidencia en nuestro país, según el RNTI oscila entre 8-10 casos por millón de niños y año, por lo que su frecuencia supone alrededor de un 8-10% de todos los tumores en niños. Sin embargo, es el responsable de aproximadamente un 15% del total de muertes provocadas por cáncer pediátrico. La edad media del diagnóstico es de 22 meses, dos tercios de los casos se presentan antes de los 5 años de edad y en un 97% los pacientes tienen menos de 10 años. El tumor es más común en niños que en niñas, siendo el ratio niño/niña aproximadamente 1,3/1. La etiología de este tumor, como en la mayoría de los tumores infantiles, sigue siendo desconocida, sin embargo, en el 1-2% de casos se puede observar una asociación familiar de la enfermedad atribuida a mutaciones germinales en los genes PHOX2B y ALK. En el momento del diagnóstico aproximadamente un 50% de los pacientes debutan con metástasis, siendo las más frecuentes las de la médula ósea. De acuerdo con las recomendaciones del INSS, el estudio de la médula ósea mediante citomorfología convencional es el método aceptado para la detección de células tumorales de neuroblastoma diseminadas. Desde hace unos años se ha estado trabajando en el desarrollo de nuevas aproximaciones más sensibles y específicas para la detección de la Enfermedad Mínima Residual (EMR) y así como garantizar el correcto estadiaje y asesoramiento del riesgo al diagnóstico. Estos métodos se pueden aplicar también para la monitorización de la terapia durante el tratamiento y la detección de las recaídas antes de que las metástasis sean evidentes, pudiendo así intervenir de manera más temprana. Además, el estudio de los productos de leucaféresis para trasplante, podría ser crucial para evitar la reinfusión de células madre contaminadas con células tumorales que pueden iniciar una recaída. Atendiendo a los antecedentes, el presente trabajo se ha centrado en: 1. Desarrollar nuevos marcadores de enfermedad mínima residual específicos para el neuroblastoma que permitan aumentar la sensibilidad y salvar la heterogeneidad tumoral. 2. Evaluar la sensibilidad y especificidad de diferentes marcadores de enfermedad mínima residual. 3. Valorar la utilidad predictiva de la expresión de los diferentes marcadores empleados al diagnóstico en la muestra tumoral. 4. Evaluar del impacto sobre la supervivencia de la detección de los diferentes marcadores en los distintos tipos de tejidos estudiados y momentos de la enfermedad, tanto en pacientes de alto riesgo, como en tumores localizados. Los estudios de detección de EMR se han realizado en muestras de médula ósea, sangre periférica, aféresis y tumores de pacientes de neuroblastoma en todos los estadios de la enfermedad. Las técnicas utilizadas han sido la RT-PCR/Southern Blot para los marcadores MAGE-A1, MAGE-A3, TH y GAGE, la Inmunocitología en el caso de GD2 y la RT-PCR cuantitativa en tiempo real en el caso de TH y DCX. La validación de las diferentes dianas analizadas durante el estudio nos ha permitido proponer la detección de la expresión de DCX como nuevo marcador óptimo para la detección de enfermedad mínima residual en neuroblastoma. Esto se debe a su patrón de expresión específico en neuronas en migración del sistema nervioso central y periférico, junto con su elevada expresión en la práctica totalidad de los tumores estudiados y la ausencia de la misma en muestras de sangre periférica y médula ósea de donantes sanos. Por otra parte, en el caso de la expresión de los genes de la familia GAGE, la expresión observada en una proporción importante de muestras de donantes sanos, junto con los resultados obtenidos en las diferentes muestras y grupos de pacientes con neuroblastoma, nos permite afirmar que estos genes no son útiles para la detección de micrometástasis en este tumor. El análisis de los datos obtenidos mediante las diferentes técnicas y marcadores, han demostrado que es importante utilizar más de un marcador en la detección de células tumorales metastáticas, por la posible heterogeneidad tumoral. En este sentido, aunque la inmunocitología es la única técnica que nos permite el contaje de células tumorales, los resultados obtenidos en los estudios de validación de la técnica de la PCR cuantitativa en tiempo real, junto con la mayor sensibilidad demostrada frente al resto de técnicas utilizadas y el coste efectividad de la misma, nos permiten proponer a la QF-PCR como técnica óptima. Así, proponemos la detección de la expresión de TH y DCX como una combinación adecuada para la detección de EMR en neuroblastoma. Los estudios realizados en tumor, nos revelan que la expresión del gen MAGE-A1 se asocia de forma significativa a una mayor supervivencia y supervivencia libre de eventos de los pacientes, siendo un predictor independiente de otros, como la amplificación del gen NMYC, pero no del estadio tumoral, dada su mayor frecuencia en tumores localizados. El análisis de los datos en pacientes con enfermedad localizada ha permitido demostrar la existencia de células tumorales en médula ósea y en sangre periférica. En estos casos, la detección de enfermedad mínima residual, especialmente la expresión de MAGE-A1 en pacientes estadio 3, podría tener un valor pronóstico adverso. Por otra parte, la detección de la expresión de DCX en el momento de la recaída en este grupo de pacientes, se correlaciona con una menor supervivencia de los mismos. Este fenómeno podría estar relacionado con una mayor agresividad de las células tumorales que expresan este gen, por lo que su valoración en muestras de médula ósea y de sangre periférica podría indicar un subgrupo de pacientes con peor pronóstico que se podrían beneficiar de terapias más intensivas en el tratamiento de dicha recaída. En el caso de los pacientes estadio 4 y alto riesgo, el estudio de EMR nos permitió concluir que la detección de células tumorales mediante inmunocitología con Anti-GD2 en sangre periférica al diagnóstico de este grupo de pacientes se asocia con una menor supervivencia y supervivencia libre de eventos. Por otra parte, la expresión de DCX en MO tras quimioterapia de inducción en pacientes de alto riesgo se asocia significativamente con una peor supervivencia. En el caso de pacientes estadio 4, dicha asociación se observa tanto en la supervivencia global como en la supervivencia libre de eventos. Finalmente, la detección de la expresión de TH y del conjunto de marcadores en médula ósea en la recaída, tanto en el grupo de alto riesgo como en los pacientes estadio 4, se asocia de forma significativa con el fallecimiento de los pacientes. En sangre periférica se observan resultados similares, sin alcanzarse la significatividad, por lo que sería importante confirmar este resultado para un posible protocolo de seguimiento más exhaustivo de la enfermedad mínima residual tras del final del tratamiento, evitando la utilización de técnicas invasivas. En el caso de las aféresis, a pesar del escaso número de muestras analizadas, la detección de células tumorales no parece estar relacionada con una mayor tasa de recaída, por lo que no parece ser un factor determinante de recaída. Como resumen final, en los estudios de EMR en neuroblastoma, sería necesario un esfuerzo coordinado de grupos internacionales, para poder establecer conclusiones más robustas sobre el posible valor del estudio de micrometástasis o la detección de células tumorales en MO, SP o aféresis y de su aplicación en la práctica clínica. De los resultados obtenidos, se podrían beneficiar directamente los pacientes, ya que se podrían establecer grupos de mayor riesgo en función los resultados obtenidos al diagnóstico de la enfermedad, monitorizar y cuantificar la respuesta al tratamiento sobre la enfermedad metastática, detectar aféresis contaminadas con células tumorales o predecir una posible recaída antes de la recaída clínica. En todos los casos, se podrían diseñar protocolos alternativos de tratamiento para intentar aumentar la supervivencia en estos casos

Enrichment of ultraconserved elements among genomic imbalances causing mental delay and congenital anomalies

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>The ultraconserved elements (UCEs) are defined as stretches of at least 200 base pairs of human DNA that match identically with corresponding regions in the mouse and rat genomes, albeit their real significance remains an intriguing issue. These elements are most often located either overlapping exons in genes involved in RNA processing or in introns or nearby genes involved in the regulation of transcription and development. Interestingly, human UCEs have been reported to be strongly depleted among segmental duplications and benign copy number variants (CNVs). However no comprehensive survey of a putative enrichment of these elements among pathogenic dose variants has yet been reported.</p> <p>Results</p> <p>A survey for UCEs was performed among the 26 cryptic genomic rearrangements detected in our series of 200 patients with idiopathic neurodevelopmental disorders associated to congenital anomalies. A total of 29 elements, out of the 481 described UCEs, were contained in 13 of the 26 pathogenic gains or losses detected in our series, what represents a highly significant enrichment of ultraconserved elements. In addition, here we show that these elements are preferentially found in pathogenic deletions (enrichment ratio 3.6 vs. 0.5 in duplications), and that this association is not related with a higher content of genes. In contrast, pathogenic CNVs lacking UCEs showed almost a threefold higher content in genes.</p> <p>Conclusions</p> <p>We propose that these elements may be interpreted as hallmarks for dose-sensitive genes, particularly for those genes whose gain or loss may be directly implied in neurodevelopmental disorders. Therefore, their presence in genomic imbalances of unknown effect might be suggestive of a clinically relevant condition.</p

Impact of the 'comunicat' methodology on the improvement of the 'effective oral communication' student outcome of the students of the master in food safety and quality management

During academic course 2017-2018 the Comunica't methodology was created to help students to selflearn all the skills needed to master the areas of domain of the general student outcome "effective oral communication". After two academic years of implementation, the goal of this work is to analyse the degree of contribution of this methodology to development of the 'Effective Oral Communication" students' outcome of students that followed the methodology during the subject Audits of Food Safety and Quality Systems, belonging to the Master in Food Safety and Quality Management. To this end, at the beginning of the subject, students were asked to present a topic related to the subject and evaluated with respect to the six areas in which the project has defined the development of the outcome following a rubric. Then the methodology was presented, and at the end of the teaching period the procedure was repeated. Finally, marks obtained before and after the learning intervention were compared. Results showed that the methodology contributed in a great extent to improve the ordering of ideas in the presentation, the non-verbal communication and the design of the slides. Therefore, although there are fields where the methodology contributed to a lower percentage, it can be concluded that the methodology is very effective in improving effective oral communication student outcome

Satisfaction analysis of 'food safety and quality management' master degree's students with the 'comunicat' methodology for the enhancement of the 'effective oral comunication' student outcome

The main goal of the present study is to analyze the satisfaction level of the students from the master degree "Food Safety and Quality Management" with the "ComunicaT" methodology, which was applied to improve the mastery level of the "Effective Oral Communication" student outcome. This methodology is being developed under an innovative and educational improvement research project funded by the Universitat Politècnica de València, and the general idea behind it is that the student, after performing an auto-diagnosis test, becomes capable to autonomously improve its oral communication skills. Thereby, the student, starting from his initial mastery level on this student outcome, follows a selfformative, adapted learning itinerary with proper learning activities for him/her to enhance his masterliness on this topic. The methodology has been carefully designed by several university lecturers coming from different universities, with a wide range of different profiles. It is mandatory to retrieve feedback from the students that participated in this methodology, in order to make it better, simpler and more efficient in further applications. With the results obtained in this work we assess the satisfaction level of the students with the "ComunicaT" methodology, and we identify improvement opportunities that can be exploited in the future

Analysis of the main weaknesses of university students regarding the 'effective oral communication' student outcome

The 'Effective oral communication' is one of the most demanded student outcomes in the workplace, since being a good communicator is essential in any field. Inefficient communication can lead to misinterpretations and erroneous conclusions. Therefore, it is a very important student outcome both in the university and in the workplace. The student or graduate must know how to communicate effectively, both orally and in writing, appropriately using the necessary resources and adapting to the characteristics of the situation and the audience. However, despite its importance, the disparity in the mastery level of the oral communication student outcome by students makes it difficult to work this ability in the classroom through collective activities. For this reason, to properly develop this student outcome in a subject, it is important to have an idea of the main weaknesses that students have in terms of effective oral communication, to be able to establish and carry out actions and training activities that can improve that transversal student outcome. This article presents the analysis of the main weaknesses that students of a university subject have. This analysis is made based on a self-assessment survey, a self-diagnosis, which allows the student to detect their weaknesses and strengths in the domain of effective oral communication, and at the same time, gives information to the teacher about the main deficiencies of their students, so the teacher can devise and launch training activities appropriate to the level of their student

Self learning itinerary as a tool to improve effective communication. a qualitative analysis of a pilot experience

[EN] PIMECOE is an Innovation and Educational Improvement Project that aims to work on the student outcome "Effective Communication". Its main objective is to design a methodology that promotes the autonomous improvement of oral communication skills. In order to do so, students can assess their initial level of proficiency of oral communication through the self-diagnosis tools proposed. Once weaknesses and strengths have been detected, they are encouraged to enrol a suggested selfformative itinerary which includes learning activities that may improve their mastery of this student outcome. As part of the design process of this PIMECOE methodology, a preliminary test has been carried out with students of the subject Introduction to Architecture (Fundaments of Architecture Degree) during the first semester of the 2017/2018 academic year. This experimental implementation, called IARexp, aims to evaluate the success of the methodology and to get feedback from the students that will be thoroughly analysed in order to develop an upgraded ulterior version. The present paper firstly presents an introduction to the PIMECOE methodology (context, objectives and specific tools associated). Secondly, the academic context for the IARexp and the chronogram for its implementation is set. Finally, the quantitative and qualitative analysis carried out from the results obtained so far will be exposed.The present research has been developed within the research project called "Autodiagnóstico del nivel de dominio inicial de la competencia transversal "Comunicación Efectiva" y su mejora a través de un itinerario autoformativo" (Ref.: PIME/2017/B/025-14) funded by the Vice-Rectorate for Studies, Quality and Acreditation at Universitat Politècnica de València. The PIMECOE project members would also like to express their gratitude to the students that have been part of this studyBas Cerdá, MDC.; Lerma-García, MJ.; Matarredona Desantes, N.; Oltra Badenes, RF.; Pérez-Esteve, É.; Silvestre Cerdà, JA. (2018). Self learning itinerary as a tool to improve effective communication. a qualitative analysis of a pilot experience. EDULEARN Proceedings (Internet). 4049-4056. https://doi.org/10.21125/edulearn.2018.1027S4049405

Development of a self-diagnosis guide to assess the initial proficiency level of the student outcome "Effective oral communication"

[EN] Among the different student outcomes that scholars should achieve during their University studies, ¿Effective Oral Communication¿ is one of the most important ones since being an excellent communicator is essential not only for their professional careers but also for their social life. However, the different provenance of students when arrived at University results in most cases in a huge disparity in the mastery of the outcome, which makes it difficult to work in class through collective activities. In order to solve this problem, in this work, the development of a self-diagnosis guide to assess the initial mastery level of the ¿Effective Oral Communication¿ student outcome is proposed. With this tool, both students and teachers will have a complete knowledge of the initial level of the outcome in order to detect the weaknesses and strengths in its mastery outcome. Therefore, the proposed self-diagnosis guide will permit teachers to adapt the activities to work the outcome in class to the actual level of their students which will result in a higher improve of the mastery level of the outcomeThis work has been developed within the research project called "Autodiagnóstico del nivel de dominio inicial de la competencia transversal "Comunicación Efectiva" y su mejora a través de un itinerario autoformativo" (Ref.: PIME/2017/B/025-14) funded by the Vice-Rectorate for Studies, Quality and Acreditation of the Universitat Politècnica de ValènciaLerma-García, MJ.; Matarredona Desantes, N.; Oltra Badenes, RF.; Pérez-Esteve, É.; Silvestre Cerdà, JA.; Bas Cerdá, MDC. (2018). Development of a self-diagnosis guide to assess the initial proficiency level of the student outcome "Effective oral communication". EDULEARN Proceedings (Internet). 4020-4025. https://doi.org/10.21125/edulearn.2018.1021S4020402

Application of a self-learning methodology for the enhancement of the oral communication student outcome in International Business studies

Effective oral communication is one of the most demanded student outcomes in the labour market, especially for degree students on International Business. Although this outcome is usually evaluated in several subjects along the curriculum, it is barely worked neither inside nor outside the classroom, mainly due to lack of time and to unavailability of proper learning methodologies. The PIMECOE project, an innovation and educational improvement project on this matter, has developed a self-learning methodology on the Effective Oral Communication student outcome, in which auto-diagnosis tests, selflearning tools and peer assessments are conveniently combined to enhance the proficiency level of the students in an autonomous way. As part of this project, and after some previous successful pilot studies, we have run this methodology with International Bussiness' students within the "Learning instruments and techniques" subject during the first semester of the 2018/2019 academic year at the Universitat de València. After carrying out a quantitative analysis of the results, we have found generalised improvements on the proficiency level of the oral communication outcome of the participant students. Satisfaction surveys suggest that the application of this methodology has really helped the student to become conscious of unrealised weaknesses and therefore to boost their oral skills

Retinoblastoma and mosaic 13q deletion: a case report

Patients with 13q-syndrome are at risk of retinoblastoma when the RB1 gene, located in the chromosomal band 13q14.2, is deleted. This syndrome is frequently associated with congenital malformations and developmental delay, although these signs could be mild. Mosaic 13q-deletion patients have been previously reported in the literature; their phenotype is variable, and they may not be recognized. CASE PRESENTATION: Retinoblastoma diagnosed in a child with 13q-mosaicism confirmed in blood, oral mucosa, healthy retina and retinoblastoma. A second RB1 hit is present exclusively in the retinoblastoma sample (RB1 c.958C>T p.Arg320Ter). Other detected molecular events in retinoblastoma are 6p12.3pter gain and 6q25.3qter loss. Clinical examination is unremarkable except for clinodactyly of the right fifth finger. DISCUSSION AND CONCLUSIONS: We describe a case of mosaic 13q deletion syndrome affected by retinoblastoma. Molecular data obtained from the tumor analysis are similar to previous data available about this malignancy. High clinical suspicion is essential for an adequate diagnosis of mosaic cases

Diseño e implementación de una metodología autoformativa para la mejora de la “Comunicación Oral Efectiva” en el ámbito universitario

[EN] The student outcome "Effective Communication" is one of the most studied competence in subjects of different degrees. An inefficient communication can lead to misinterpretations and wrong conclusions. Therefore, it is a very important competence both in the university and in the business field, since the student/graduate must know how to communicate effectively, both orally and in writing, using appropriately the necessary resources and adapting to the characteristics of the situation and the audience. Despite its importance, the disparity in the mastery of the competence between the students makes it difficult to work in the classroom through collective activities. The objective of this study is to design a self-formative methodology that allows the student to detect their weaknesses and strengths in the competence domain and propose teaching-learning formative activities according to their initial level of mastery to improve the acquisition of this transversal competence. The designed methodology has been implemented in a group of students of first course of the Degree in Fundamentals of Architecture obtaining relevant results that indicate an improvement in the domain of the competence.[ES] La competencia transversal “Comunicación Efectiva” es una de las más trabajadas en asignaturas de diferentes materias y ciclos. Una comunicación ineficiente puede llevar a malas interpretaciones y equivocadas conclusiones. Por tanto, se trata de una competencia muy importante tanto en el ámbito universitario como en el ámbito empresarial, ya que el alumno/egresado debe saber comunicarse de manera efectiva, tanto de forma oral como escrita, utilizando adecuadamente los recursos necesarios y adaptándose a las características de la situación y de la audiencia. Pese a su importancia, la disparidad en el dominio de la competencia por parte del alumnado hace difícil su trabajo en el aula a través de actividades colectivas. El objetivo de este estudio es diseñar una metodología autoformativa que permitan al alumno detectar sus debilidades y fortalezas en el dominio de la competencia y proponer actividades formativas de enseñanza-aprendizaje según su nivel inicial de dominio para la mejora de la adquisición de la competencia transversal. La metodología diseñada se ha implantado en un grupo de alumnos de primero en el Grado en Fundamentos de la Arquitectura obteniendo resultados relevantes que indican una mejora en el dominio de la competencia.El presente trabajo ha sido desarrollado en el marco del Proyecto de Innovación y Mejora Docente “Autodiagnóstico del nivel de dominio inicial de la competencia transversal “Comunicación Efectiva” y su mejora a través de un itinerario autoformativo” (Ref.: PIME/2017/B/025-14) financiado por el Vicerrectorado de Estudios, Calidad y Acreditación de la Universitat Politècnica de València a quien los autores agradecen expresamente este apoyo. Asimismo, el equipo PIMECOE agradece a los estudiantes de la asignatura Introducción a la Arquitectura su participación en esta experiencia. Su contribución ha resultado fundamental para desarrollar una metodología con mayores garantías de éxito entre el alumnado.Matarredona Desantes, N.; Oltra Badenes, RF.; Pérez Esteve, E.; Silvestre Cerdà, JA.; Bas, M.; Lerma García, MJ. (2018). Diseño e implementación de una metodología autoformativa para la mejora de la “Comunicación Oral Efectiva” en el ámbito universitario. En IN-RED 2018. IV Congreso Nacional de Innovación Educativa y Docencia en Red. Editorial Universitat Politècnica de València. 1413-1427. https://doi.org/10.4995/INRED2018.2018.8712OCS1413142