Prestarea serviciilor de prevenire a infecției cu HIV în rândul persoanelor din grupa cu risc înalt de infectare

IMSP Spitalul de Dermatologie și Maladii Comunicabile, Congresul al VIII-lea al specialiștilor din domeniul sănătății publice și managementului sanitar 24-25 octombrie 2019 Chișinău, Republica MoldovaInfecția cu HIV reprezintă o problemă stringentă de sănătate publică la nivel global și la nivel național. În Republica Moldova se înregistrează o epidemie de infecție HIV concentrată în grupele cu risc sporit de infectare (GRSI): utilizatorii de droguri injectabile (UDI), lucrătorii sexului comercial (LSC), bărbații care practică sex cu bărbați (BSB), precum și partenerii sexuali și clienții acestor grupe. Prevenirea infecției HIV în mediul populației-cheie este bazată pe programele de reducere a riscurilor, care sunt specifice pentru fiecare grupă de risc și sunt desfășurate de către organizații neguvernamentale (ONG). În R. Moldova, prestarea serviciilor de prevenire în rândul persoanelor din GRSI se efectuează din anul 1997. Conform datelor estimative, în anul 2017 au fost înregistrate 36.900 persoane UDI, 26.100 LSC și 17.100 BSB. În Republica Moldova se implementează al VI-lea program în acest domeniu – Programul Național de prevenire și control al infecției HIV/SIDA și al infecțiilor cu transmitere sexuală pentru anii 2016- 2020, aprobat prin HG nr. 1164 din 22.10.2016, care este axat pe trei componente de bază, una dintre care este prevenirea transmiterii HIV și a infecțiilor cu transmitere sexuală (ITS), în special în populațiilecheie. În țara noastră, serviciile de prevenire sunt inteligibile, asigură abordarea multifactorială a vulnerabilității acestora și răspund specificului epidemiei HIV. La furnizarea serviciilor de prevenire se ține cont de specificul fiecărei GRSI, de resursele disponibile, de prezența și capacitatea instituțiilor publice și a ONG-lor active în prevenirea infecției cu HIV în GRSI. Pachetele inteligibile de servicii de prevenire pentru fiecare GRSI au fost elaborate în conformitate cu recomandările UNAIDS, OMS și UNODC, inclusiv prestarea serviciilor prin intermediul echipelor mobile multidisciplinare. Serviciile de prevenire se acordă pe întreg teritoriul țării și sunt disponibile pentru beneficiarii din sectorul civil și pentru cei din instituțiile penitenciare. În Republica Moldova este implementată acordarea serviciilor de prevenire a HIV prin intermediul farmaciilor comerciale. Până în 2017, serviciile respective erau finanțate exclusiv din sursele Fondului Global de Combatere a HIV, Tuberculozei și Malariei (GFTAM). Pentru prima dată în Moldova, începând cu 2017, două proiecte de reducere a riscurilor au fost finanțate din fondurile de profilaxie ale CNAM cu suma totală de finanțare de 2 milioane lei. O parte componentă a serviciilor de prevenire a HIV este tratamentul de substituție cu metadonă (TSO), care este disponibil în 8 localități din țară și în 13 instituții penitenciare

Implementation of modern methods of diagnosis of HIV infection in the Republic of Moldova

IMSP Spitalul de Dermatologie și Maladii ComunicabileÎn Republica Moldova, epidemia de infecție cu HIV continuă să fie concentrată în grupele cu risc sporit de infectare: utilizatorii de droguri intravenoase, persoanele ce practică sexul comercial și bărbații homosexuali. Eforturile depuse au drept scop reducerea transmiterii infecției cu HIV și a impactului negativ al epidemiei, mai ales în rândul populației cu risc sporit de contaminare. În anul 2018 a fost implementat noul algoritm de testare a infecției cu HIV la nivel național. Au fost modificate metodele de screening și de confirmare a infecției respective conform ultimelor recomandări ale Organizației Mondiale a Sănătății, fiind expuse în noul Ghid Național de diagnostic de laborator al infecției cu HIV, conform căruia ONG-urile ce activează în domeniul prevenirii HIV efectuează screeningul în fiecare instituție medicală prin utilizarea testelor rapide de diagnostic HIV ½ (TRD), iar confirmarea diagnosticului în centrele de tratament antiretroviral din Chișinău, Cahul, Bălți și în sistemul penitenciar are loc prin utilizarea unui TRD de alternativă și a testării molecular genetice (platforma GeneXpert). Materiale și metode Informația prezentată a avut drept sursă Registrul de evidență a persoanelor diagnosticate cu HIV din cadrul Spitalului de Dermatologie și Maladii Comunicabile, Registrul de evidență a serviciilor prestate în cadrul consilierii și testării voluntare la HIV de către instituțiile din sistemul medical și din cadrul ONGurilor ce activează în domeniul prevenirii HIV. Rezultate obținute În anul 2018 a fost modificat algoritmul de testare – de la screeningul prin metoda ELISA la utilizarea testelor rapide de diagnostic. Pe parcursul anului 2018 au fost efectuate în total 240.847 de testări la infecția cu HIV, dintre care circa 20% – cu utilizarea testelor rapide de diagnostic HIV ½. Confirmarea infecției cu HIV a crescut cu circa 9% în 2018, comparativ cu 2017 (905 versus 835 cazuri). Discuții Testele rapide de screening HIV ½ sunt procurate din sursele bugetului de stat și oferite gratuit tuturor instituțiilor ce efectuează testarea. Testarea la infecția cu HIV este precedată de consiliere efectuată de persoana care a inițiat procedura, în cadrul căreia este semnat acordul informat cu privire la testarea HIV (decizia privind testarea la HIV îi aparține persoanei testate). În anul 2018, din numărul total de persoane diagnosticate cu HIV, peste 90% au fost luate în evidență medicală și au început tratamentul antiretroviral, comparativ cu anii precedenți, în care această cifră nu depășea 60%. Acest fapt se explică prin micșorarea considerabilă a perioadei de confirmare a infecției de la 2-3 luni până la 2-3 ore. Concluzii Actualizarea, optimizarea și decentralizarea diagnosticului de laborator al infecției cu HIV au condus la sporirea accesului populației la testare, inclusiv al grupelor cu risc sporit de infectare, totodată favorizând implementarea strategiei OMS/UNAIDS Testează și tratează

Tuberculosis, HIV, and viral hepatitis diagnostics in eastern Europe and central Asia: high time for integrated and people-centred services

Globally, high rates (and in the WHO European region an increasing prevalence) of co-infection with tuberculosis and HIV and HIV and hepatitis C virus exist. In eastern European and central Asian countries, the tuberculosis, HIV, and viral hepatitis programmes, including diagnostic services, are separate vertical structures. In this Personal View, we consider underlying reasons for the poor integration for these diseases, particularly in the WHO European region, and how to address this with an initial focus on diagnostic services. In part, this low integration has reflected different diagnostic development histories, global funding sources, and sample types used for diagnosis (eg, typically sputum for tuberculosis and blood for HIV and hepatitis C). Cooperation between services improved as patients with tuberculosis needed routine testing for HIV and vice versa, but financial, infection control, and logistical barriers remain. Multidisease diagnostic platforms exist, but to be used optimally, appropriate staff training and sensible understanding of different laboratory and infection control risks needs rapid implementation. Technically these ideas are all feasible. Poor coordination between these vertical systems remains unhelpful. There is a need to increase political and operational integration of diagnostic and treatment services and bring them closer to patients

Detection of Low-Level Mixed-Population Drug Resistance in Mycobacterium tuberculosis Using High Fidelity Amplicon Sequencing.

Undetected and untreated, low-levels of drug resistant (DR) subpopulations in clinical Mycobacterium tuberculosis (Mtb) infections may lead to development of DR-tuberculosis, potentially resulting in treatment failure. Current phenotypic DR susceptibility testing has a theoretical potential for 1% sensitivity, is not quantitative, and requires several weeks to complete. The use of "single molecule-overlapping reads" (SMOR) analysis with next generation DNA sequencing for determination of ultra-rare target alleles in complex mixtures provides increased sensitivity over standard DNA sequencing. Ligation free amplicon sequencing with SMOR analysis enables the detection of resistant allele subpopulations at ≥0.1% of the total Mtb population in near real-time analysis. We describe the method using standardized mixtures of DNA from resistant and susceptible Mtb isolates and the assay's performance for detecting ultra-rare DR subpopulations in DNA extracted directly from clinical sputum samples. SMOR analysis enables rapid near real-time detection and tracking of previously undetectable DR sub-populations in clinical samples allowing for the evaluation of the clinical relevance of low-level DR subpopulations. This will provide insights into interventions aimed at suppressing minor DR subpopulations before they become clinically significant

Comparison of standard sequencing and SMOR analysis.

<p>The percentage of base calls for the resistant allele compared to the erroneous alleles at six resistant SNP loci in five different genes, five replicates each, is shown. All 36 SNP loci were examined; however most SNP loci are consistent between the resistant and susceptible strains used in the mixtures. The seven different mixtures contain six known allelic differences in resistant conferring loci. Each circle represents the percent of calls for a particular allele for each replicate and the color represents the type of allele. The pure control was the pan susceptible isolate DNA 2–0112. A. Results from standard sequencing analysis, ignoring read pair information. B. Results from SMOR analysis. For the means and standard deviations see <a href="http://www.plosone.org/article/info:doi/10.1371/journal.pone.0126626#pone.0126626.s009" target="_blank">S6 Table</a>.</p

Illustration of universal tail approach.

<p>In a multiplex PCR, all <i>M</i>. <i>tuberculosis</i> gene specific targets are amplified with universal tailed primers. A second PCR extends the amplicon with a sample specific index that allows for several samples to be pooled together for sequencing. GS: gene specific primer; UT: universal tail sequence; Index A: Primer that includes the UT1 sequence and Illumina index sequence; Index. B: primer that includes the UT2 sequence and the Illumina sequence to bind to the flowcell.</p

SMOR minor subpopulation examination of a single replicate of 7 mixtures at six known differing resistance SNP loci.

<p>Each circle represents the percent SMOR call, where color represents allele state, for a single sample at the six resistant SNP loci. All 36 SNP loci were examined; however the seven different mixtures contain six known allelic differences in resistant conferring SNP loci.</p

Variation of erroneous alleles.

<p>Average frequency (five replicates) of the resistant allele compared to the erroneous alleles at six specific SNP loci from the 0.05:99.95 XDR:Pan-susceptible mixture. Each error bar is constructed using 1 standard deviation from the mean.</p