Hepatic and intestinal biotransformation and transport of xenobiotics during pregnancy and lactation

The liver is the main place for phase II metabolism and transport of xenobiotics mediated by Mrp2, leading to elimination of conjugated metabolites into bile. In the gastrointestinal tract, phase II enzymes and Mrp2 are preferentially localized in the proximal region of the small intestine, particularly at the tip of the villus. In pregnant rats, conjugating enzymes (e.g. UGT and GST) and Mrp2-mediated transport of xenobiotics are decreased when compared to normal females, whereas these systems are preserved in small intestine, suggesting a complementary role for this tissue. After delivery, these same enzymes increase their expression and activity, being maximal during the last week of lactation. Mrp2 protein in liver also recovers and reaches the control level by the end of the lactation period. Post-partum rats exhibit a significant increase in development of the digestive tract in association with induction of phase II enzymes and Mrp2 expression and activity. Although the factors involved in regulation of protein expression may not be the same for conjugating enzymes and Mrp2 in the different experimental situations or tissues studied, their common localization and co-regulation provide evidence that they may work in cooperation. This is not surprising if we consider that most of the substrates for MRPs are the products that result from phase II reactions. Here, we provide a brief description of regulation of major phase II enzymes and Mrp2 during pregnancy and lactation, as particularly seen in the rat.Fil: Arana, Maite Rocío. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); ArgentinaFil: Arias, Agostina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); ArgentinaFil: Villanueva, Silvina Stella Maris. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); ArgentinaFil: Mottino, Aldo Domingo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); Argentin

Induction of hepatic multidrug resistance-associated protein 3 by ethynylestradiol is independent of cholestasis and mediated by estrogen receptor

Multidrug resistance–associated protein 3 (Mrp3; Abcc3) expression and activity are up-regulated in rat liver after in vivo repeated administration of ethynylestradiol (EE), a cholestatic synthetic estrogen, whereas multidrug resistance-associated protein 2 (Mrp2) is down-regulated. This study was undertaken to determine whether Mrp3 induction results from a direct effect of EE, independent of accumulation of any endogenous common Mrp2/Mrp3 substrates resulting from cholestasis and the potential mediation of estrogen receptor (ER). In in vivo studies, male rats were given a single, noncholestatic dose of EE (5 mg/kg s.c.), and basal bile flow and the biliary excretion rate of bile salts and glutathione were measured 5 hours later. This treatment increased Mrp3 mRNA by 4-fold, detected by real-time polymerase chain reaction, despite the absence of cholestasis. Primary culture of rat hepatocytes incubated with EE (1–10 µM) for 5 hours exhibited a 3-fold increase in Mrp3 mRNA (10 µM), consistent with in vivo findings. The increase in Mrp3 mRNA by EE was prevented by actinomycin D, indicating transcriptional regulation. When hepatocytes were incubated with an ER antagonist [7α,17β-[9-[(4,4,5,5,5-Pentafluoropentyl)sulfinyl]nonyl]estra-1,3,5(10)-triene-3,17-diol (ICI182/780), 1 µM], in addition to EE, induction of Mrp3 mRNA was abolished, implicating ER as a key mediator. EE induced an increase in ER-α phosphorylation at 30 minutes and expression of c-Jun, a well-known ER target gene, at 60 minutes, as detected by Western blotting of nuclear extracts. These increases were prevented by ICI182/780. In summary, EE increased the expression of hepatic Mrp3 transcriptionally and independently of any cholestatic manifestation and required participation of an ER, most likely ER-α, through its phosphorylation.Fil: Ruiz, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); ArgentinaFil: Rigalli, Juan Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); ArgentinaFil: Arias, Agostina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); ArgentinaFil: Villanueva, Silvina Stella Maris. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); ArgentinaFil: Banchio, Claudia Elena. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; ArgentinaFil: Vore, Mary. University Of Kentucky; Estados UnidosFil: Mottino, Aldo Domingo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); ArgentinaFil: Catania, Viviana Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); Argentin

Biphasic modulation of cAMP levels by the contraceptive nomegestrol acetate. Impact on P-glycoprotein expression and activity in hepatic cells

ABC transporters are key players in drug excretion with alterations in their expression and activity by therapeutic agents potentially leading to drug-drug interactions. The interaction potential of nomegestrol acetate (NMGA), a synthetic progestogen increasingly used as oral contraceptive, had never been explored. In this work we evaluated (1) the effect of NMGA on ABC transporters in the human hepatic cell line HepG2 and (2) the underlying molecular mechanism. NMGA (5, 50 and 500 nM) increased P-glycoprotein (P-gp) expression at both protein and mRNA levels and reduced intracellular calcein accumulation, indicating an increase also in transporter activity. This up-regulation of P-gp was corroborated in Huh7 cells and was independent of the classical progesterone receptor. Instead, using a siRNA-mediated silencing approach, we demonstrated the involvement of membrane progesterone receptor α. Moreover, we found that the activation of this receptor by NMGA led to a falling-rising profile in intracellular cAMP levels and protein kinase A activity over time, ultimately leading to transcriptional P-gp up-regulation. Finally, we identified inhibitory G protein and phosphodiesterases as mediators of this novel biphasic modulation. These results demonstrate the ability of NMGA to selectively up-regulate hepatic P-gp expression and activity and constitute the first report of ABC transporter modulation by membrane progesterone receptor α. If a similar regulation took place in vivo, decreased bioavailability and therapeutic efficacy of NMGA-coadministered P-gp substrates could be expected. This holds special importance considering long-term administration of NMGA and broad substrate specificity of P-gp.Fil: Tocchetti, Guillermo Nicolás. University of Heidelberg; Alemania. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Dominguez, Camila Juliana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Zecchinati, Felipe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Arana, Maite Rocío. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Ruiz, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Villanueva, Silvina Stella Maris. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Weiss, Johanna. University of Heidelberg; AlemaniaFil: Mottino, Aldo Domingo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Rigalli, Juan Pablo. University of Heidelberg; Alemania. Radboud Universiteit Nijmegen; Países Bajos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Regulation of biotransformation systems and ABC transporters by Benznidazole in HepG2 cells: involvement of Pregnane X-Receptor

Background: Benznidazole (BZL) is the only antichagasic drug available in most endemic countries. Its effect on the expression and activity of drug-metabolizing and transporter proteins has not been studied yet. Methodology/Principal Findings: Expression and activity of P-glycoprotein (P-gp), Multidrug resistance-associated protein 2 (MRP2), Cytochrome P450 3A4 (CYP3A4), and Glutathione S-transferase (GST) were evaluated in HepG2 cells after treatment with BZL. Expression was estimated by immunoblotting and real time PCR. P-gp and MRP2 activities were estimated using model substrates rhodamine 123 and dinitrophenyl-S-glutathione (DNP-SG), respectively. CYP3A4 and GST activities were evaluated through their abilities to convert proluciferin into luciferin and 1-chloro-2,4-dinitrobenzene into DNP-SG, respectively. BZL (200 µM) increased the expression (protein and mRNA) of P-gp, MRP2, CYP3A4, and GSTπ class. A concomitant enhancement of activity was observed for all these proteins, except for CYP3A4, which exhibited a decreased activity. To elucidate if pregnane X receptor (PXR) mediates BZL response, its expression was knocked down with a specific siRNA. In this condition, the effect of BZL on P-gp, MRP2, CYP3A4, and GSTπ protein up-regulation was completely abolished. Consistent with this, BZL was able to activate PXR, as detected by reporter gene assay. Additional studies, using transporter inhibitors and P-gp-knock down cells, demonstrated that P-gp is involved in BZL extrusion. Pre-treatment of HepG2 cells with BZL increased its own efflux, as a consequence of P-gp up-regulation. Conclusions/Significance: Modifications in the activity of biotransformation and transport systems by BZL may alter the pharmacokinetics and efficiency of drugs that are substrates of these systems, including BZL itself.Fil: Rigalli, Juan Pablo. Universität Heidelberg; Alemania. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; ArgentinaFil: Perdomo, Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; ArgentinaFil: Luquita, Marcelo Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; ArgentinaFil: Villanueva, Silvina Stella Maris. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; ArgentinaFil: Arias, Agostina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; ArgentinaFil: Theile, Dirk. Universität Heidelberg; AlemaniaFil: Weiss, Johanna. Universität Heidelberg; AlemaniaFil: Mottino, Aldo Domingo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; ArgentinaFil: Ruiz, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; ArgentinaFil: Catania, Viviana Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; Argentin

Reversion of down-regulation of intestinal multidrug resistance-associated protein 2 in fructose-fed rats by geraniol and vitamin C: Potential role of inflammatory response and oxidative stress

Intestinal multidrug resistance-associated protein 2 is an ABC transporter that limits the absorption of xenobiotics ingested orally, thus acting as essential component of the intestinal biochemical barrier. Metabolic Syndrome (MetS) is a pathological condition characterized by dyslipidemia, hyperinsulinemia, insulin resistance, chronic inflammation, and oxidative stress (OS). In a previous study we demonstrated that MetS-like conditions induced by fructose in drinking water (10% v/v, during 21 days), significantly reduced the expression and activity of intestinal Mrp2 in rats. We here evaluated the potential beneficial effect of geraniol or vitamin C supplementation, natural compounds with anti-inflammatory and anti-oxidant properties, in reverse fructose-induced Mrp2 alterations. After MetS-like conditions were induced (21 days), animals were cotreated with geraniol or vitamin C or vehicle for another 14 days. Decreased expression of Mrp2 protein and mRNA due to fructose administration was reversed by geraniol and by vitamin C, consistent with restoration of Mrp2 activity evaluated in everted intestinal sacs. Concomitantly, increased intestinal IL-1β and IL-6 levels induced by fructose were totally and partially counterbalanced, respectively, by geraniol administration. The intestinal redox unbalance generated by fructose was improved by geraniol and vitamin C, as evidenced by decreasing lipid peroxidation products and activity of Superoxide Dismutase and by normalizing glutathione reduced/oxidized glutathione ratio. The restoration effects exhibited by geraniol and vitamin C suggest that local inflammatory response and OS generated under MetS-like conditions represent important mediators of the intestinal Mrp2 down-regulation. Additionally, both agents could be considered of potential therapeutic value to preserve Mrp2 function under MetS conditions.Fil: Zecchinati, Felipe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Barranco, Maria Manuela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario; Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Médicas. Escuela de Ciencias Médicas. Laboratorio de Fisiología Metabólica; ArgentinaFil: Arana, Maite Rocío. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Tocchetti, Guillermo Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Dominguez, Camila Juliana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Perdomo, Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Ruiz, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Mottino, Aldo Domingo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Garcia, Fabiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario; Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Médicas. Escuela de Ciencias Médicas. Laboratorio de Fisiología Metabólica; ArgentinaFil: Villanueva, Silvina Stella Maris. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; Argentin

Sirtuin 1 and 2 inhibitors enhance the inhibitory effect of sorafenib in hepatocellular carcinoma cells

Multidrug resistance (MDR) counteracts the efficiency of sorafenib, an important first-line therapy for hepatocellular carcinoma (HCC). Sirtuins (SIRTs) 1 and 2 are associated with tumor progression and MDR. We treated 2D and 3D cultures (which mimic the features of in vivo tumors) from HCC cells with sorafenib alone or in the presence of SIRTs 1 and 2 inhibitors (cambinol or EX-527; combined treatments). Cultures subjected to combined treatments showed a greater fall in cellular viability, proliferation (PCNA, cyclin D1 and Ki-67 expression and cell cycle analysis), migration and invasion when compared with cultures treated only with sorafenib. Similarly, combined treatments produced more apoptosis (annexin V/PI, caspase-3/7 activity) than sorafenib alone. Since cell cycle dysregulation and apoptotic blockage are reported mechanisms of MDR, the modulation found in PCNA, cyclin D1, Ki-67 and caspase-3/7 proteins by cambinol and EX-527 are probably playing a role in enhancing the sensitivity of HCC cell lines to sorafenib. EX-527 reduced MRP3 and BCRP expression in sorafenib-treated HCC cells. Since ABC transporters contribute to MDR, MRP3 and BCRP could be also influencing in the response of HCC cells to sorafenib. Overall, 2D and 3D cultures behave similarly except that 3D cultures were less sensitive to treatments, reinforcing the clinical relevance of the current study. Findings presented in this manuscript support a potential application for SIRTs 1 and 2 inhibitors since we demonstrated that these compounds enhance the inhibitory effect of sorafenib upon treatment of hepatocellular carcinoma cells lines.Fil: Ceballos Mancini, María Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Angel, Antonella. Universidad Nacional de Rosario; ArgentinaFil: Delprato, Carla Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Livore, Veronica Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Ferretti, Anabela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Departamento de Ciencias Fisiológicas. Área Morfología; ArgentinaFil: Lucci, Alvaro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Departamento de Ciencias Fisiológicas. Área Morfología; ArgentinaFil: Comanzo, Carla Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Alvarez, María de Luján. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Quiroga, Ariel Dario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Mottino, Aldo Domingo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; ArgentinaFil: Carrillo, Maria Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Fisiología Experimental. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental; Argentin

Estrogen receptor- mediates human multidrug resistance associated protein 3 induction by 17-ethynylestradiol. Role of activator protein-1

Previously, we have demonstrated that 17α-ethynylestradiol (EE) induces rat multidrug-resistance associated protein 3 (Mrp3, Abcc3) expression transcriptionally through estrogen receptor-α (ER-α) activation. We explored the effect of EE on MRP3 expression of human origin. HepG2 cells were transfected with ER-α and incubated with EE (1–10–50 μM) for 48 h. MRP3 protein and mRNA levels were measured by Western blotting and Real time PCR, respectively. EE up-regulated MRP3 protein and mRNA at 50 μM only in ER-α(+)-HepG2 cells. The in silico analysis of mrp3 promoter region demonstrated absence of estrogen response elements, but showed several Ap-1 binding sites. We further evaluated the potential involvement of the transcription factors c-JUN and c-FOS (members of Ap-1) in MRP3 up-regulation. ER-α(+) HepG2 cells were incubated with EE and c-FOS and c-JUN levels measured by Western blotting in nuclear extracts. EE up-regulated only c-JUN. Experiments of overexpression and knock-down of c-JUN by siRNA further demonstrated that this transcription factor is indeed implicated in MRP3 upregulation by EE. Co-immunoprecipitation assay demonstrated that EE induces c-JUN/ER-α interaction, and chromatin immunoprecipitation assay showed that this complex is recruited to the AP-1 binding consensus element present at the position (−1300/−1078 bp) of human mrp3 promoter. We conclude that EE induces MRP3 expression through ER-α, with recruitment of ER-α in complex with c-JUN to the human mrp3 promoter.Fil: Ruiz, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); ArgentinaFil: Rigalli, Juan Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); ArgentinaFil: Arias, Agostina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); ArgentinaFil: Villanueva, Silvina Stella Maris. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); ArgentinaFil: Banchio, Claudia Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Vore, Mary. University Of Kentucky; Estados UnidosFil: Mottino, Aldo Domingo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); ArgentinaFil: Catania, Viviana Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Fisiología Experimental (i); Argentin

Asteroid Photometry and Lightcurve Analysis at Gora's Observatories - Part II

Synodic rotation periods and amplitudes are reported for 414 Liriope, 949 Hel, 952 Caia, and 1145 Robelmonte.Fil: Colazo, Milagros Rita. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Astronomía Teórica y Experimental. Universidad Nacional de Córdoba. Observatorio Astronómico de Córdoba. Instituto de Astronomía Teórica y Experimental; ArgentinaFil: Fornari, César. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Santucho, Marcos Ariel. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Mottino, Aldo Domingo. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Colazo, Carlos Roberto. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Melia, Raúl. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Suarez, Nestor Eduardo. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: VasconI, Nicolás. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Arias, Daniela. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Stechina, Ariel. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Scotta, Damián. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: García, José. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Pittari, Claudio. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Ferrero, Guillermo Oscar. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; Argentin

Asteroid photometry and lightcurve analysis at Gora's Observatories, Part IV

Synodic rotation periods and amplitudes are reported for: 424 Gratia, 579 Sidonia, 589 Croatia, 693 Zerbinetta, 791 Ani, 824 Anastasia, 858 El Djezair, 1024 Hale, 1271 Isergina, 1663 van den Bos.Fil: Colazo, Milagros Rita. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Astronomía Teórica y Experimental. Universidad Nacional de Córdoba. Observatorio Astronómico de Córdoba. Instituto de Astronomía Teórica y Experimental; Argentina. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Stechina, Ariel. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Fornari, César. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Suarez, Néstor. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Melia, Raúl. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Morales, Mario. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Bellocchio, Ezequiel. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Pulver, Eduardo. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Speranza, Tiago. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Scotta, Damián. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Wilberger, Aldo. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Mottino, Aldo Domingo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Meza, Erick. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Romero, Fabricio. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Tourne Passarino, Patricio. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Suligoy, Matias. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Llanos, Ricardo. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Chapman, Andrés. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Martini, Matias. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Colazo, Carlos. Grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; Argentin

Asteroid photometry and lightcurve analysis at Gora's Observatories

Synodic rotation periods and amplitudes are reported for 179 Klytaemnestra, 372 Palma, 504 Cora, 739 Mandeville, 749 Malzovia, 925 Alphonsina, 1015 Christa, 1086 Nata, and 1794 Finsen.Fil: Colazo, Milagros Rita. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Astronomía Teórica y Experimental. Universidad Nacional de Córdoba. Observatorio Astronómico de Córdoba. Instituto de Astronomía Teórica y Experimental; ArgentinaFil: Fornari, César. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Santucho, Marcos Ariel. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Mottino, Aldo Domingo. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; Argentina. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Colazo, Carlos Roberto. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Melia, Raúl. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Vasconi, Nicolás. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Arias, Daniela. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Pittari, Claudio. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Suarez, Nestor Eduardo. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Pulver, Eduardo. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Ferrero, Guillermo Oscar. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Chapman, Andrés. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Girardini, Carla. Universidad Nacional de Córdoba. Observatorio Astronómico de Córdoba; Argentina. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Rodríguez, Elisa. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Amilibia, Guillermo. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Anzola, Marcos. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Tornatore, Marina. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Nolte, Ricardo. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Morero, Sergio. Gora-grupo de Observadores de Rotaciones de Asteroides; ArgentinaFil: Oey, Julián. Blue Mountains Observatory; Australi