Implementación del estudio farmacogenético de hipersensibilidad al abacavir HLA-B*5701 en Argentina

Introducción: El abacavir (ABC) es un antirretroviral inhibidor de la transcriptasa reversa del virus HIV-1 que está fuertemente asociado al desarrollo de reacciones de hipersensibilidad en individuos portadores del alelo HLA-B*5701. Objetivos: determinar la prevalencia del alelo HLA-B*5701 en pacientes HIV-1 positivos y en una población control de Argentina. Materiales y métodos: desde enero de 2012 hasta octubre de 2013 se estudiaron 869 pacientes HIV-1 positivos y 63 individuos no infectados con HIV-1. La detección del alelo HLA-B*5701 se realizó mediante un ensayo in house basado en la técnica de PCR en tiempo real, diseñado en nuestro laboratorio y validado según guías internacionales. Resultados: el primero de enero de 2012 se implementó el estudio farmacogenético para la detección de hipersensibilidad al ABC en los pacientes incluidos en el Programa VIH/sida de la Dirección de SIDA y ETS, y en los niños infectados con HIV-1 del Hospital Garrahan. Para ello se adoptó un protocolo de envío, recepción y procesado de las muestras, con un informe detallado de los resultados. El alelo HLA-B*5701 se detectó en 42 individuos infectados con HIV-1 y en 3 individuos no infectados. Conclusiones: La prevalencia del alelo HLA-B*5701 en la población de pacientes infectados con HIV-1 y la población control fue similar (4,8 %), lo cual sugiere que la presencia de este alelo no influye en la infección por HIV-1. Esta prevalencia fue similar a la reportada para otras poblaciones de origen caucásico.Fil: Moragas, Matías. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría ; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Gurevich Messina, Juan Manuel. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría ; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Aulicino, Paula. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría ; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Mecikovsky, Debora. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría ; ArgentinaFil: Bologna, Rosa. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría ; ArgentinaFil: Bissio, Emiliano. Ministerio de Salud de la Nación; ArgentinaFil: Falistoco, Carlos. Ministerio de Salud de la Nación; ArgentinaFil: Sen, Luisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría ; ArgentinaFil: Mangano, Andrea María Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría ; Argentin

Identification of Factors Affecting Tacrolimus Trough Levels in Latin American Pediatric Liver Transplant Patients

Tacrolimus is the cornerstone in pediatric liver transplant immunosuppression. Despite close monitoring, fluctuations in tacrolimus blood levels affect safety and efficacy of immunosuppressive treatments. Identifying the factors related to the variability in tacrolimus exposure may be helpful in tailoring the dose. The aim of the present study was to characterize the clinical, pharmacological, and genetic variables associated with systemic tacrolimus exposure in pediatric liver transplant patients. De novo transplant patients with a survival of more than 1 month were considered for inclusion and were genotyped for cytochrome P450 3A5 (CYP3A5). Peritransplant clinical factors and laboratory covariates were recorded retrospectively between 1 month and 2 years after transplant, including alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase, hematocrit, and tacrolimus predose steady-state blood concentrations collected 12 hours after tacrolimus dosing. A linear mixed effect (LME) model was used to assess the association of these factors and the log-transformed tacrolimus dose-normalized trough concentration (logC0/D) levels. Bootstrapping was used to internally validate the final model. External validation was performed in an independent group of patients who matched the original population. The developed LME model described that logC0/D increases with increases in time after transplant (β = 0.019, 95% confidence interval [CI], 0.010-0.028) and ALT values (β = 0.00030, 95% CI, 0.00002-0.00056), whereas logC0/D is significantly lower in graft CYP3A5 expressers compared with nonexpressers (β = −0.349, 95% CI, −0.631 to −0.062). In conclusion, donor CYP3A5 genotype, time after transplant, and ALT values are associated with tacrolimus disposition between 1 month and 2 years after transplant. A better understanding of tacrolimus exposure is essential to minimize the occurrence of an out-of-range therapeutic window that may lead to adverse drug reactions or acute rejection.Fil: Riva, Natalia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan"; ArgentinaFil: Woillard, Jean Baptiste. Inserm; FranciaFil: Distefano, Maximiliano. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan"; ArgentinaFil: Moragas, Matías. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Dip, Marcelo Fabian. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan"; ArgentinaFil: Halac, Esteban Tomas. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan"; ArgentinaFil: Cáceres Guido, Paulo. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan"; ArgentinaFil: Licciardone, Nieves. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan"; ArgentinaFil: Mangano, Andrea María Mercedes. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Bosaleh, Andrea. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan"; ArgentinaFil: de Davila, María Teresa. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan"; ArgentinaFil: Schaiquevich, Paula Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan"; ArgentinaFil: Imventarza, Oscar Cesar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan"; Argentin

Estudio de los reservorios virales en la infección por HIV-1 en pediatría : caracterización de las formas virales latentes y su comportamiento durante el tratamiento antirretroviral combinado

Fil: Moragas, Matías. Hospital de Pediatría "Prof. Dr. Juan P. Garrahan"; Argentina.Fil: Moragas, Matías. Fundación Huesped; Argentina.Desde el inicio de la epidemia del virus de inmunodeficiencia humana (HIV-1, del inglés human immunodeficiency virus type 1), aproximadamente 75 millones de personas contrajeron la infección y 32 millones murieron por causas asociadas a la misma. En 1997, con el advenimiento de la terapia antirretroviral combinada (TARVc) contra el HIV-1, se logró por primera vez controlar significativamente y de forma sostenida la replicación del virus, llevando sus niveles en plasma a valores inferiores al límite de detección de los ensayos moleculares disponibles. A este hecho se suma que entre 2005 y 2010 se reunió evidencia suficiente para demostrar que el inicio temprano del TARVc mejora considerablemente la morbi-mortalidad de las personas que viven con HIV-1. No obstante estos grandes avances, la erradicación del HIV-1 aún no se ha logrado. Esto se debe principalmente a que luego de la infección, el virus se establece muy tempranamente en células de larga vida, principalmente células T CD4+ de memoria, y puede permanecer indefinidamente en un estado de silenciamiento, evadiendo su reconocimiento por parte del sistema inmune y de las drogas antirretrovirales. Estas células que albergan variantes latentes, pero funcionales del HIV-1, se denominan reservorios virales, y constituyen una fracción muy pequeña del total de células infectadas, la cual se estima que es 1,5 - 5 años y >5 años, respectivamente). Luego de los dos años de SV el ADN-HIV total alcanzó un estado de equilibrio y permaneció constante, independientemente de la edad de inicio de la SV. Esta dinámica no se vio afectada por la edad de inicio de TARVc, en contra de lo esperado, pero justificada en buena parte por el hecho de que un inicio temprano no necesariamente va acompañado de una buena adherencia, y por ende de una SV temprana. Finalmente, en la búsqueda de mecanismos de persistencia del reservorio de HIV-1 en circulación, no se encontraron evidencias de evolución viral, ni de trazas de intermediarios de replicación viral (círculos de 2-LTR) durante 6 a 15 años de SV, en pacientes que alcanzaron dicha SV antes del año de vida. Sumado a ello se encontró que una proporción mayoritaria de las variantes virales en SV (>70%) estaba presente previo al inicio del TARVc (6 a 15 años antes). Estos resultados sugieren que la proliferación de las células infectadas previo al inicio del TARVc -fenómeno de expansión clonal- es el principal mecanismo de mantenimiento del reservorio del HIV-1. Los resultados del presente trabajo de tesis aportan una mayor comprensión de los mecanismos y la dinámica de persistencia del reservorio en la infección perinatal por HIV-1, los cuales resultan relevantes para avanzar en la búsqueda de los factores determinantes del éxito de la remisión virológica en ausencia de TARVc y la investigación de enfoques tendientes hacia la cura del HIV-1

Impact of the time to achieve viral control on the dynamics of circulating HIV-1 reservoir in vertically infected children with long-term sustained virological suppression: A longitudinal study.

OBJECTIVE:Determine the decay rate of HIV-1 DNA reservoir in vertically infected children during sustained viral suppression (VS) and how it is affected by the age at VS. METHODS:This study included 37 HIV-1 vertically infected children on suppressive antiretroviral therapy for at least 4 years. Children were grouped according to the age of antiretroviral therapy initiation (≤0.5 or >0.5 yrs) and to the age at VS (≤1.5, between >1.5 and 4, and >4 years). Decay of cell-associated HIV-1 DNA (CA-HIV-DNA) level and 2-long terminal repeats (2-LTR) circles frequency were analyzed over 4 years of viral suppression using piecewise linear mixed-effects model with two splines and logistic regression, respectively. RESULTS:CA-HIV-DNA in peripheral blood mononuclear cells had a significant decay during the first two years of VS [-0.26 (95% CI: -0.43, -0.09) log10 copies per one million cells (cpm)/year], and subsequently reached a plateau [-0.06 (95% CI: -0.15, 0.55) log10 cpm/year]. The initial decay was higher in children who achieved VS by 1.5 years of age compared to those who achieved VS between >1.5 and 4 years and those after 4 years of age: -0.51 (95% CI:-0.94, -0.07), -0.35 (95% CI:-0.83, 0.14), and -0.21 (95% CI:-0.39, -0.02) log10cpm PBMC/year, respectively. The 2-LTR circles frequency decayed significantly, from 82.9% at pre-VS to 37.5% and 28.1% at 2 and 4 years of VS, respectively (P = .0009). CONCLUSIONS:These data highlight that achieving VS during the first 18 months of life limit the establishment of HIV-1 reservoirs, reinforcing the clinical benefit of very early effective therapy in children

Prevalence of HLA-B*57:01 allele in Argentinean HIV-1 infected patients

Hypersensitivity reaction to abacavir (ABC hypersensitivity syndrome, AHS) is strongly associated with the presence of the HLA-B*57:01 allele. This study was designed to estimate the prevalence of HLA-B*57:01 allele in Argentinean HIV-1 infected patients. We analyzed the presence of HLA-B*57:01 allele in 1646 HIV-1 infected patients from different regions of Argentina. This allele was detected in 81 patients; most of them corresponded to patients living in the central region of the country. The prevalence of HLA-B*57:01 was 4.9%, similar to other Caucasian populations and higher than other data reported for South American populations. This strongly supports screening for the presence of HLA-B*57:01 in abacavir treatment of HIV-1 in our country.Fil: Moragas, Matías. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan". Laboratorio de Biología Celular y Retrovirus; ArgentinaFil: Belloso, Waldo Horacio. Hospital Italiano. Instituto de Ciencias Básicas y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Baquedano, María Sonia. Centro de Diagnóstico Médico de Alta Complejidad Cibic; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Gutierrez, M. I.. Laboratorio Stamboulian; ArgentinaFil: Bissio, E.. Ministerio de Salud de la Nación; ArgentinaFil: Larriba, J. M.. Hospital Italiano. Instituto de Ciencias Básicas y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Fay, F.. Centro de Diagnóstico Médico de Alta Complejidad; ArgentinaFil: Aulicino, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan". Laboratorio de Biología Celular y Retrovirus; ArgentinaFil: Gurevich Messina, Juan Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan". Laboratorio de Biología Celular y Retrovirus; ArgentinaFil: Yaunguzian, M. F.. Laboratorio Stamboulian; ArgentinaFil: Maldonado, A. C.. Laboratorio Stamboulian; ArgentinaFil: Falistocco, C.. Ministerio de Salud de la Nación; ArgentinaFil: Sen, L.. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan". Laboratorio de Biología Celular y Retrovirus; ArgentinaFil: Mangano, Andrea María Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan". Laboratorio de Biología Celular y Retrovirus; Argentin

Antiviral effect of high-dose ivermectin in adults with COVID-19: A proof-of-concept randomized trial

Background: There are limited antiviral options for the treatment of patients with COVID-19. Ivermectin (IVM), a macrocyclic lactone with a wide anti-parasitary spectrum, has shown potent activity against SARS-CoV-2 in vitro. This study aimed at assessing the antiviral effect of IVM on viral load of respiratory secretions and its relationship with drug concentrations in plasma. Methods: Proof-of-concept, pilot, randomized, controlled, outcome-assessor blinded trial to evaluate antiviral activity of high-dose IVM in 45 COVID-19 hospitalized patients randomized in a 2:1 ratio to standard of care plus oral IVM at 0·6 mg/kg/day for 5 days versus standard of care in 4 hospitals in Argentina. Eligible patients were adults with RT-PCR confirmed SARS-CoV-2 infection within 5 days of symptoms onset. The primary endpoint was the difference in viral load in respiratory secretions between baseline and day-5, by quantitative RT-PCR. Concentrations of IVM in plasma were measured. Study registered at ClinicalTrials.gov: NCT04381884. Findings: 45 participants were recruited (30 to IVM and 15 controls) between May 18 and September 9, 2020. There was no difference in viral load reduction between groups but a significant difference was found in patients with higher median plasma IVM levels (72% IQR 59–77) versus untreated controls (42% IQR 31–73) (p = 0·004). Mean ivermectin plasma concentration levels correlated with viral decay rate (r: 0·47, p = 0·02). Adverse events were similar between groups. No differences in clinical evolution at day-7 and day-30 between groups were observed. Interpretation: A concentration dependent antiviral activity of oral high-dose IVM was identified at a dosing regimen that was well tolerated. Large trials with clinical endpoints are necessary to determine the clinical utility of IVM in COVID-19. Funding: This work was supported by grant IP-COVID-19-625, Agencia Nacional de Promoción de la Investigación, el Desarrollo Tecnológico y la Innovación, Argentina and Laboratorio ELEA/Phoenix, Argentina