Expressão e funcionalidade da histona H2A2C no epitélio mamário

Mestrado em Bioquímica - Bioquímica ClínicaO cancro de mama é o tipo de cancro mais comumente diagnosticado entre as mulheres e também uma das primeiras causas de morte. Os mecanismos subjacentes ao desenvolvimento do cancro de mama são complexos e variam de individuo para individuo. Esta diversidade manifesta-se em alterações genéticas e/ou epigenéticas, tais como diferenças de padrões de expressão génica, aberrações cromossómicas, modificações de histonas e expressão diferencial de proteínas. Novos alvos e putativos biomarcadores para os tumores de mama invasivos são extremamente necessários e, uma vez que os padrões de expressão da histona H2A2C foram encontrados desregulados em células indiferenciadas este pode ser um bom objeto de estudo. Assim sendo, foram estudadas as diferenças de expressão de mRNA da histona H2A2C nos diferentes estados de diferenciação da linha celular epitelial mamária HC11 (proliferativa/ indiferenciadas, pre-diferenciado/competente e diferenciada/funcional) e de expressão de proteína por imunofluorescência. Para analisar a expressão de histona H2A2C na diferenciação da glândula mamária foi utilizada a técnica imunohistoquímica Além disso, para determinar se a expressão da H2A2C está associada a células em proliferação, utilizou-se a co-imunolocalização. A sequenciação por bissulfito foi utilizada para avaliar se a perda de expressão H2A2C nas células mais diferenciadas da linha celular HC11 estaria associada à metilação do promotor da histona H2A2C. E a técnica de ChIP ajudou-nos a estudar a interação das modificações pos-translaccionais das histonas (marcas activadoras: H3K36me2 e H3K79me3; marcas repressoras: H3K9me3 e H3K27me3) na região promotora da HistH2A2C. Uma vez que as células HC11 num estado mais indiferenciado são cultivadas em meio contendo EGF, com o intuito de verificar se as vias de sinalização Ras/Raf/MAPK e/ou PI3K/AKT/mTOR seriam responsáveis pela regulação da expressão da H2A2C, inibimos estas vias na linha celular HC11 e analisamos a sua expressão de mRNA e proteína por qRT-PCR e imunofluorescência, respectivamente. Adicionalmente, foram analisados os níveis de expressão da H2A2C numa série de casos de cancro da mama humano por qRT-PCR. Finalmente, estudou-se os efeitos fenotípicos do silenciamento da histona H2A2C nas linhas celulares HC11 e MC4L2 (carcinoma da mama). Foi observado que a expressão da histona H2A2C está relacionada com as células em estado estaminal da linha celular HC11 e a um estado de gravidez da diferenciação da glândula mamária de ratinho. Ao mesmo tempo, correlacionamos a expressão da histona H2A2C com a expressão do CD44 e do c - myc e a uma baixa expressão de E-caderina membranar, o que sugere que a histona H2A2C está relacionada não só com a indução da estaminalidade e proliferação, mas também com a repressão da diferenciação epitelial em células HC11. Esta última também foi confirmada por silenciamento do gene HIST2H2AC nas células HC11. O mecanismo de regulação da expressão da H2A2C ainda está por descobrir. No entanto, deixamos de lado a metilação do DNA como um evento putativo que poderia regular a expressão do gene que codifica a histona. Também, o papel da via PI3K/AKT na regulação da expressão H2A2C foi estabelecido. Finalmente, a expressão de H2A2C nos cancros da mama humanos foi confirmada. Em resumo, neste estudo, foram descritos pela primeira vez, a expressão e o papel da histona H2A2C quer no epitélio mamário quer no cancro da mama.Breast cancer is the most common type of cancer diagnosed among women and also a leading cause of death. The mechanisms underlying the development of breast cancer are complex and vary between individual tumours. The diversity is manifested at either genetic and/or epigenetic alterations, such as differences in patterns of gene expression, chromosomal aberrations, modifications of histones and differential expression of proteins. New targets and putative biomarkers for invasive breast tumours are extremely needed and once that the expression of H2A2C has been found deregulated in undifferentiated cells this is thought to be a good study object. Therefore, we studied the differences of H2A2C mRNA expression in HC11 mammary epithelial cell line throughout differentiation (proliferative/undifferentiated, pre-differentiated/competent and functionally differentiated stages) by qRT-PCR and the protein levels by immunofluorescence. In order to study the expression of histone H2A2C in mammary gland differentiation we used immunohistochemistry. Furthermore, to establish if H2A2C expression is associated to cells undergoing mitosis/proliferation, we used co-immunolocalization. Bisulphite sequencing PCR was used to evaluate if loss of H2A2C expression in differentiated HC11 cells was associated to H2A2C promoter methylation. And ChIP helped us to study the interaction of post-translational histone modifications (activating marks: H3K36me2 and H3K79me3; repressive marks: H3K9me1 and H3K27me3) at the promoter region of HistH2A2C. Since HC11 cells in more undifferentiated stage are grown in medium containing EGF, with the intention to verify if the Ras/Raf/MAPK and/or PI3K/AKT/mTOR pathways were responsible for regulation of H2A2C expression we inhibited these pathways in HC11 cell line and analysed their mRNA and protein expression by qRT-PCR and immunofluorescence, respectively. In addition, we analysed the expression levels of H2A2C in a series of cases of human breast cancers by qRT-PCR. Finally, we studied the phenotypic effects of H2A2C silencing in HC11 and MC4L2 (mammary carcinoma) cell lines. Herein, we demonstrate that the histone H2A2C expression is related to stem-cell like stage in HC11 cells and to a pregnant state of mouse mammary gland differentiation. At the same time, we correlated the H2A2C expression to CD44 and c-myc expression and to a down-expression of membranous E-cadherin, suggesting that the histone H2A2C is related not only to the induction of steamness and proliferation but also to the repression of differentiation in HC11 cells. Latter, this was also confirmed by silencing HIST2H2AC in HC11 cells. The regulation of expression of H2A2C is still to be discovered. However, we were able to rule out DNA methylation as a putative event that could regulate the HIST2H2AC expression. Also, the role of PI3K/AKT pathway in regulating H2A2C expression was established. Finally, the expression of H2A2C in human breast cancers was confirmed. In summary, in this study, we report for the first time the expression and the role of the histone H2A2C in mammary epithelium and in breast cancer

Nutritinal status and social resources of an old population in the Northeast of Trás-os-Montes

Portugal shows a very pronounced aging population. It lost population in every quinquennial age group between 0-29 years. To ages over 70 years the growth was about 26%. The total of old people living in Alto Trás-os-Montes is of 56966 and in the region of Alfândega da Fé is of 1660 (INE, 2011). To assess nutritional status of people with 75 years or more in the municipality of Alfândega da Fé; To know social resources and to check if there are correlations between nutritional status of the elderly and clinical and characterization variables of the studied population. A proportional and probabilistic sample of 109 old people of a total of 487, mainly female (62.4%; 68) was gathered from the database of users registered at the Health Centre of Alfândega da Fé. A Correlational and cross-sectional study was designed. It was applied the Mini Nutritional Assessment (MNA) and also the Scale of Social Resources (OARS). From the total of 109 old people 28, 4% (31) are at risk of malnutrition and 71, 6% (78) present a normal nutritional status. From the total of subjects who participated in the study 40.4% (44) have adequate social resources, while more than a half 59.6% (65) have impaired social resources. We also concluded that social resources are independent from the nutritional statu

Doente sedado, consciente e ventilado invasivamente: terapêuticas de enfermagem

Background: the sedation of patients under invasive ventilation has undergone a paradigm shift, translated into the use of light sedation protocols, wich allows them to be aware, whenever possible. Nurses, through the implementation of appropriate nursing therapies, play na important role in the ocurrencce of this health-disease transition. Objectives: to identify nursing therapies valued by Intensive Care nurses in caring for patients with invasive ventilation sedated and conscious.  Methodology: qualitative, exploratory study, starting a focus group meeting, using content  analysis according to Bardin. The sample consisted of six expert nurses, specialists in medical surgical nursing, working in Intensive Care Services at four hospitals in northern Portugal. Results: emerge five categories of nursing therapies:.redimensioning of surveillance, managemenbt of therapy, self-care, implementation of communication strategies and implementation of strategies in the face of agitation/disorientation. Conclusions: nursing therapies for sedated, conscious and invasively ventilated people, valued by intensive care nurses, focus on increasing patient surveillance, in the management of analgesia/sedation, in promoting the potential for self-care, implementing strategies to facilitate communication and strategies for managing agitation/desorientation.Marco contextual: la sedatión de pacientes bajo ventilatión invasiva há sufrido un cambio de paradigma, traducido en el uso de protocolos de sedatión ligera, que les permite estar atentos, siempre que sea posible. Esta situatión es desafiante par las enfermeras, quienes, através de la implementatión de terapias de enfermería adecuadas, son relevantes en una transisión saludable salud-enfermedad. Objetivo: identificar las terapias de enfermería valoradas por los enfermeros de Cuidados Intensivos en el cuidado de pacientes com ventilación invasiva, sedada y consciente. Metodologia: estudio cualitativo, exploratorio, a partir de una reunión de grupo focal, utilizando análisis de contenido según Bardin. La muestra estuvo formada por seis enfermeras expertas, especialistas en enfermería médico-quirúrgica, desempeñando funciones en los Servicios de Cuidados Intensivos de cuatro hospitales del norte de Portugal.  Resultados: surgen cinco categorías de terapias de enfermería: redimensionamiento de la vigilancia, manejo de la terapia, autocuidado, implementación de estrategias de comunicación e implementación de estrategias ante la agitación/desorientación. Conclusiones: las terapias de enfermería para personas sedadas, conscientes y ventiladas de forma invasiva valorado por enfermeras de cuidados intensivos, se centran en aumentar la vigilancia del paciente, en el manejo de la analgesía/sedación, en la promoción del potencial del autocuidado, en la implementación de estrategias facilitadores de la comunicación y estrategias para manejar la agitación/desorientación.Enquadramento: a sedação dos doentes sob ventilação invasiva tem sofrido uma mudança de paradigma, traduzida na utilização de protocolos de sedação ligeira, que possibilite que os mesmos estejam conscientes, sempre que possível. Os enfermeiros, através da implementação de terapêuticas de enfermagem adequadas têm papel relevante nesta transição saúde-doença. Objetivo: identificar as terapêuticas de enfermagem valorizadas pelos enfermeiros de Cuidados Intensivos, no cuidado ao doente ventilado invasivamente, sedado e consciente. Metodologia: estudo qualitativo, exploratório, mediante um focus group, com recurso à análise de conteúdo segundo Bardin. Amostra constituída por seis enfermeiros peritos, especialistas em enfermagem médico-cirúrgica, a exercer, em Serviços de Cuidados Intensivos de quatro hospitais do norte de Portugal. Resultados: emergiram cinco categorias de terapêuticas de enfermagem: redimensionamento da vigilância, gestão da terapêutica, autocuidado (com cinco subcategorias), implementação de estratégias comunicacionais e implementação de estratégias face à agitação/desorientação (com três subcategorias). Conclusões: as terapêuticas de enfermagem à pessoa sedada, consciente e ventilada invasivamente, valorizadas pelos enfermeiros de cuidados intensivos, focam-se no incremento da vigilância dos doentes, na gestão da analgesia/sedação, na promoção do potencial de autocuidado, na implementação de estratégias facilitadoras da comunicação e de estratégias para gestão dos quadros de agitação/desorientação.                              

A step-by-step synthesis of triazole-benzimidazole-chalcone hybrids: Anticancer activity in human cells+

Novel series of triazole-benzimidazole-chalcone hybrid compounds have been synthesized via click chemistry, between different azide derivatives and substituted benzimidazole terminal alkynes bearing a chalcone moiety. The starting alkynes are prepared via base-catalysed nitrogen alkylation of pre-synthetized benzimidazole-chalcone substrates. All the intermediates as well as the final products are fully characterized by 1D and 2D NMR and mass spectrometry techniques. HMBC correlations permits the identification of a unique 1,4-disubstitued triazole-benzimidazole-chalcone isomer. Evaluation of the anti-proliferative potential in breast and prostate cancer cell lines showed that the presence of chloro substituents at the chalcone ring of the triazole-benzimidazole-chalcone skeleton enhanced the cytotoxic effects. The benzyl group linked to the 1,2,3-triazole moiety provides more antiproliferative potential.publishe

Composição e abundância de macrófitas num troço do rio Ovelha

As macrófitas fluviais são um grupo relevante para a avaliação ecológica dos rios. Numa amostragem realizada num troço de 100 m do rio Ovelha, localizado a 217 m de altitude, na freguesia de Fornos, Marco de Canaveses, estudou-se a abundância, composição e distribuição das macrófitas. Verificou-se que o troço estudado é pobre em macrófitas, apresentando uma riqueza específica baixa, o que poderá estar relacionado, sobretudo, com o substrato rochoso. Considerando os resultados obtidos é fundamental que, futuramente, sejam estudadas as macrófitas conjuntamente com outros elementos biológicos, no sentido de se proceder a uma correta monitorização do estado ecológico do rio Ovelha.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Estudo de diagnósticos e oportunidades terapêuticas para o cancro da mama

Breast cancer (BC) is the most common cancer type in women worldwide and the estrogen receptor (ER)-positive subtype is the most prevalent. Although a general decline in mortality associated with BC has been observed over the past years, its incidence has been raising and the prediction is that it will continue to rise. Thus, discovery of novel biomarkers for early detection and new drug targets to help in the battle against resistance to therapy are needed. SETD7 is a lysine methyltransferase that catalyzes the methylation of histone and non-histone proteins. This allows SETD7 to regulate a broad range of cellular processes through direct methylation of target proteins or through regulation of transcription by methylation of histone H3. Many proteins regulated by SETD7 are involved in cancer-related processes like apoptosis, cell proliferation and DNA damage response. Although SETD7 targets many proteins with major roles in cancer, its effect on tumorigenesis, disease progression and patient-related outcomes is unclear. The aim of this work was to improve the current knowledge on how this protein regulates cancer-associated processes that would allow us to uncover the potential of SETD7 as a BC diagnostic tool and/or therapeutic target. In the first manuscript, we summarized and integrated current knowledge by performing a systematic review of the literature in all cancer types. It is noteworthy, that the role of SETD7 in BC and its prognostic value appeared contradictory between studies and seemingly depends on the cellular context and cohort/dataset studied. Therefore, in the second manuscript, a comprehensive bioinformatic analysis of human BC datasets was performed to better understand the clinical value of SETD7 in BC and the cellular pathways associated with its expression. The predictive potential of SETD7 expression was analyzed using public gene expression and proteomic data, taking into consideration clinicopathological features such as BC molecular subtype and tumor stage. Additionally, samples were stratified based on high or low SETD7 expression quartile and the biological processes related with the differential expression of SETD7 per BC molecular subtype were identified. High SETD7 correlated with worse prognosis in basal-like subtype where it was also associated with increased DNA damage response pathway and an increased immune signature. Contrarily, in luminal A subtype, high immune signature and immune related processes were correlated with low SETD7. In HER2-enriched subtype, high SETD7 correlated with worse response to anti-HER2 therapy and higher number of ERBB2 mutations. From the clinical perspective, these results served to propose several hypotheses that deserve validation in prospective studies. Since emerging knowledge of the normal mammary epithelium has given new insights into breast oncogenesis, the third manuscript investigated the effect of SETD7 in mammary epithelial and functional differentiation by inhibiting its catalytic activity using the highly selective inhibitor (R)-PFI-2. SETD7 was upregulated in epithelial differentiated cells and even more in lactogenesis Its catalytic inhibition impaired both processes, through the stimulation of cell proliferation and downregulation of E-cadherin and lactogenic markers. In addition, the phospholipid metabolism changed with impaired SETD7 function resulting in altered lipidic profile with physiologic impact in stem-like and lactogenic cells. These results lead us to propose a tumor suppressor role of SETD7 in the normal mammary epithelium. As SETD7 has been previously shown to modulate estrogen receptor alpha (ERα) activity, in the fourth manuscript, the objective was to analyze the role of SETD7 in luminal BC cell lines. The inhibition of SETD7 catalytic activity or expression resulted in increased cell proliferation, possibly through upregulation of ERa and ERα- regulated genes (MYC, CCND1 and PGR), and protection against oxidative stress. However, some differences were observed between the short and longer time points analyzed suggesting that upon SETD7 inhibition the cells experience transient oxidative stress and cell cycle retardation but recover and their proliferation rate is increased. These results suggest that compensatory mechanisms may be induced after 24h of SETD7 inhibition. The results also suggest that a possible feedback loop between SETD7 and ERa may exist. In conclusion, this work established that there is a diagnostic and possibly a therapeutic potential for SETD7 according to specific BC molecular subtypes and cellular contexts. It also contributed to improve the current understanding and knowledge of SETD7 function in the normal mammary epithelial cell differentiation and in BC, opening new avenues for research into SETD7 function in the normal and malignant breast tissue.O cancro da mama é o tipo de cancro mais comum em mulheres em todo mundo e o subtipo com recetor de estrogénio positivo é o mais prevalente. Embora tenha sido observado um declínio geral na mortalidade associada ao cancro da mama nos últimos anos, a sua incidência tem vindo a aumentar e a tendência é que continue a aumentar. Assim sendo, a descoberta de novos biomarcadores para a deteção precoce de cancro da mama e novos alvos terapêuticos para ajudar no combate à resistência à terapia são necessários. A SETD7 é uma metiltransferase que catalisa a metilação de proteínas histonas e não-histonas, o que a torna capaz de regular uma ampla série de processos celulares através da metilação direta de proteínas-alvo ou através da regulação da transcrição por metilação da histona H3. Muitas proteínas reguladas pela SETD7 estão envolvidas em processos relacionados com o cancro, como apoptose, proliferação celular e resposta a danos no DNA. Ainda que a SETD7 tenha como alvo muitas proteínas com um papel importante no cancro, a sua função na tumorigénese, progressão da doença e sobrevivência dos pacientes não é clara. Assim sendo, o presente trabalho teve como objetivo estudar o potencial da SETD7 como alvo de diagnóstico e/ou terapêutico para o cancro da mama. No primeiro manuscrito, resumimos e integramos o conhecimento atual, realizando uma revisão sistemática da literatura incluindo todos os tipos de cancro em que a SETD7 já foi estudada. Ressalta-se que o papel da SETD7 no cancro da mama parece contraditório entre estudos e aparentemente depende do contexto celular e da coorte analisada. Assim, no segundo manuscrito, foi realizada uma análise bioinformática abrangente para entender melhor o valor clínico da SETD7 no cancro da mama e dos processos biológicos associadas à sua expressão. Neste estudo, o potencial preditivo da expressão de SETD7 foi analisado usando bases de dados públicas contendo dados de transcriptómica e proteómica, e tendo em consideração características clínico-patológicas, como por exemplo o subtipo molecular de cancro da mama e o estadio tumoral. As amostras foram estratificadas com base no quartil de expressão de SETD7 alto ou baixo e os processos biológicos associados com a expressão diferencial de SETD7 por subtipo de cancro da mama foram identificados. A elevada expressão de SETD7 correlacionou-se com pior prognóstico no subtipo basal, onde também foi associado ao aumento da via de resposta ao dano do DNA e a um aumento da assinatura imunológica. Contrariamente, no subtipo luminal A, a assinatura imunológica e processos relacionados ao sistema imunológico foram correlacionados com baixa expressão de SETD7. No subtipo enriquecido com HER2, a alta expressão de SETD7 correlacionou-se com pior resposta à terapia anti-HER2 e maior número de mutações ERBB2. Estes resultados têm bastante valor do ponto de vista clínico, servindo para propor várias hipóteses que merecem validação em estudos futuros. Uma vez que o conhecimento proveniente do epitélio mamário normal tem dado novas perspetivas sobre a oncogénese mamária, o terceiro manuscrito investigou o efeito da SETD7 na diferenciação funcional e epitelial, inibindo a sua atividade catalítica com o inibidor altamente seletivo (R)-PFI-2. A expressão de SETD7 aumentou em células epiteliais diferenciadas e ainda mais na lactogénese. A inibição catalítica da SETD7 prejudicou ambos os processos, através da estimulação da proliferação celular e regulação negativa da E-caderina e marcadores lactogénicos. Além disso, o metabolismo dos fosfolipídios mudou com a inibição da SETD7, resultando num perfil lipídico alterado com impacto fisiológico nas células tipo estaminal e nas células lactogénicas. Estes resultados levam-nos a propor um papel supressor tumoral da SETD7 no epitélio mamário normal. Tendo em conta que a SETD7 já foi descrita como moduladora da atividade do recetor de estrogénio alfa (ERα), no quarto manuscrito analisámos o papel da SETD7 em linhas celulares luminais de cancro da mama. A inibição da atividade catalítica ou expressão de SETD7 resultou no aumento da proliferação celular, possivelmente através da regulação positiva de ERa e de genes regulados por ERa ( MYC, CCND1 e PGR ) e proteção contra o stress oxidativo. No entanto, algumas diferenças foram observadas entre os curtos e longos períodos de tempo analisados, sugerindo que, após a inibição da SETD7, as células entram em stress oxidativo transitório retardando o ciclo celular, mas depois recuperam e aumentam a sua taxa de proliferação. Estes resultados sugerem que existem mecanismos de compensação que podem ser ativados após 24h da inibição de SETD7. Estes resultados também sugerem a existência de um possível processo de feedback entre SETD7 e ERa. Em conclusão, este trabalho estabeleceu que existe um potencial de diagnóstico e possivelmente terapêutico para a SETD7 no cancro da mama de acordo com os subtipos moleculares específicos e contexto celular. Esta tese também contribuiu para melhorar a atual compreensão e conhecimento da função da SETD7 na diferenciação de células epiteliais mamárias normais e no cancro da mama, abrindo novos caminhos para a pesquisa da função SETD7 no tecido mamário normal e maligno.Programa Doutoral em Biomedicin

A Systematic Review to Define the Multi-Faceted Role of Lysine Methyltransferase SETD7 in Cancer

Histone–lysine N-methyltransferase SETD7 regulates a variety of cancer-related processes, in a tissue-type and signalling context-dependent manner. To date, there is no consensus regarding SETD7´s biological functions, or potential for cancer diagnostics and therapeutics. In this work, we summarised the literature on SETD7 expression and function in cancer, to identify the contexts where SETD7 expression and targeting can lead to improvements in cancer diagnosis and therapy. The most studied cancers were found to be lung and osteosarcoma followed by colorectal and breast cancers. SETD7 mRNA and/or protein expression in human cancer tissue was evaluated using public databases and/or in-house cohorts, but its prognostic significance remains inconclusive. The most studied cancer-related processes regulated by SETD7 were cell proliferation, apoptosis, epithelial-mesenchymal transition, migration and invasion with special relevance to the pRb/E2F-1 pathway. SETD7 consistently prevented epithelial to mesenchymal transition in different cancer types, and inhibition of its function appears to be associated with improved response to DNA-damaging agents in most of the analysed studies. Stabilising mutations in SETD7 target proteins prevent their methylation or promote other competing post-translational modifications that can override the SETD7 effect. This indicates that a clear discrimination of these mutations and competing signalling pathways must be considered in future functional studies

SETD7 Expression Is Associated with Breast Cancer Survival Outcomes for Specific Molecular Subtypes: A Systematic Analysis of Publicly Available Datasets

SETD7 is a lysine N-methyltransferase that targets many proteins important in breast cancer (BC). However, its role and clinical significance remain unclear. Here, we used online tools and multiple public datasets to explore the predictive potential of SETD7 expression (high or low quartile) considering BC subtype, grade, stage, and therapy. We also investigated overrepresented biological processes associated with its expression using TCGA-BRCA data. SETD7 expression was highest in the Her2 (ERBB2)-enriched molecular subtype and lowest in the basal-like subtype. For the basal-like subtype specifically, higher SETD7 was consistently correlated with worse recurrence-free survival (p < 0.009). High SETD7-expressing tumours further exhibited a higher rate of ERBB2 mutation (20% vs. 5%) along with a poorer response to anti-Her2 therapy. Overall, high SETD7-expressing tumours showed higher stromal and lower immune scores. This was specifically related to higher counts of cancer-associated fibroblasts and endothelial cells, but lower B and T cell signatures, especially in the luminal A subtype. Genes significantly associated with SETD7 expression were accordingly overrepresented in immune response processes, with distinct subtype characteristics. We conclude that the prognostic value of SETD7 depends on the BC subtype and that SETD7 may be further explored as a potential treatment-predictive marker for immune checkpoint inhibitors

The Clinicopathological Significance of BiP/GRP-78 in Breast Cancer: A Meta-Analysis of Public Datasets and Immunohistochemical Detection

The endoplasmic reticulum chaperone BiP (also known as GRP-78 or HSPA5) maintains protein folding to allow cell proliferation and survival and has been implicated in carcinogenesis, tumor progression, and therapy resistance. BiP’s association with clinical factors and prognostic potential in breast cancer remains unclear. In this work, three types of analysis were conducted to improve the knowledge of BiP’s clinicopathological potential: (1) analysis of publicly available RNA-seq and proteomics datasets stratified as high and low quartiles; (2) a systematic review and meta-analysis of immunohistochemical detection of BIP; (3) confirmation of findings by BiP immunohistochemical detection in two luminal-like breast cancer small cohorts of paired samples (pre- vs. post-endocrine therapy, and primary pre- vs. metastasis post-endocrine therapy). The TCGA PanCancer dataset and CPTAC showed groups with high BiP mRNA and protein associated with HER2, basal-like subtypes, and higher immune scores. The meta-analysis of BiP immunohistochemistry disclosed an association between higher BiP positivity and reduced relapse-free survival. BiP immunohistochemistry confirmed increased BiP expression in metastasis, an association of BiP positivity with HER2 expression, and nuclear BiP localization with higher a tumor stage and poor outcome. Therefore, three independent approaches showed that BiP protein is associated with worse outcomes and holds prognostic potential for breast cancer

Valuing Bioactive Lipids from Green, Red and Brown Macroalgae from Aquaculture, to Foster Functionality and Biotechnological Applications

Marine edible macroalgae have functional proprieties that might improve human health and wellbeing. Lipids represent a minor fraction of macroalgae, yet with major interest as main carriers of omega 3 polyunsaturated fatty acids and intrinsic bioactive properties. In this study, we used lipid extracts from the green macroalgae Ulva rigida and Codium tomentosum; the red Gracilaria gracilis,Palmaria palmata and Porphyra dioica; and the brown Fucus vesiculosus, produced in a land-based integrated multitrophic aquaculture (IMTA) system. We determined the lipid quality indices based on their fatty acid profiles and their bioactivities as putative antioxidant, anti-inflammatory and antiproliferative agents. The results reveal to be species-specific, namely U. rigida displayed the lowest atherogenicity and thrombogenicity indices. Palmaria palmata and F. vesiculosus lipid extracts displayed the lowest inhibitory concentration in the free radical scavenging antioxidant assays. Ulva rigida, C. tomentosum, P. palmata and P. dioica inhibited COX-2 activity by up to 80%, while P. dioica and P. palmata extracts showed the highest cytotoxic potential in the MDA-MB-231 breast cancer cells. This work enhances the valorization of macroalgae as functional foods and promising ingredients for sustainable and healthy diets and fosters new applications of high-valued algal biomass, in a species-specific context