Participación del sistema encefalinérgico en la adicción a cocaína

Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2014RESUMEN La adicción a las drogas puede ser vista como el resultado de una serie de eventos neuronales que llevan al individuo desde el uso voluntario y ocasional de una droga hasta a la pérdida del control sobre este comportamiento, llegando a la compulsión por su uso (Everitt y col., 2008). La hipótesis central en el campo de la adicción es que la exposición a una amplia variedad de estímulos ambientales, interactuando con la constitución genética de un individuo, determinan el desarrollo de la adicción. En relación a esto, se cree que las alteraciones en los patrones de expresión de genes inducidos por una droga a lo largo de los sistemas de recompensa del cerebro son un mecanismo potencial para mediar la adicción a las misma y son responsables de las alteraciones neuroquímicas y moleculares que caracterizan a la adicción (Nestler y col., 2001). En este sentido, el impacto de cocaína en el circuito de la motivación determina los cambios neuroplásticos relacionados con el consumo de la droga, dichos cambios subyacen el fenómeno de sensibilización inducido por cocaína y otras conductas asociadas a la adicción. En relación a esto, se sabe que tanto en los humanos como en animales de experimentación, la administración repetida e intermitente de drogas psicoestimulantes, como anfetamina y cocaína, produce respuestas conductuales progresivamente mayores a las observadas inicialmente, aún después de semanas o meses luego de la última administración. Este incremento en los efectos conductuales de los psicoestimulantes se conoce como sensibilización conductual. Este fenómeno es un reflejo de la sensibilización incentivo-motivacional propuesta para explicar la compulsión a la búsqueda y administración de la droga que caracteriza al proceso adictivo. Determinados sistemas neuroquímicos, el sistema dopaminérgico, glutamatérgico, así como también el sistema opioide endógeno (SOE) y determinados factores tróficos, ocupan una posición central dentro del circuito de la motivación y han sido asociados también con el desarrollo y/o la expresión de la sensibilización (Kalivas y Stewart, 1991; Pierce y Kalivas, 1997). En este sentido, si bien hay evidencia farmacológica que involucra la participación de los receptores opioides en el desarrollo y la expresión de la sensibilización conductual a cocaína, los estudios que utilizan herramientas genéticas (ratones knockout para los receptores μ-opioides) no han sido concluyentes para establecer la influencia de estos receptores en el fenómeno de sensibilización (Yooy col., 2012). Además, no se ha descripto cuál de los péptidos opioides endógenos participaría en la sensibilización inducida por cocaína. En relación a esto, determinados estudios han demostrado que el sistema de encefalina y péptidos derivados modula positivamente la neurotransmisión dopaminérgica y glutamatérgica dentro del circuito de la motivación, y sus niveles se encuentran incrementados luego de un tratamiento crónico con cocaína en áreas cerebrales relevantes para la expresión del fenómeno dsensibilización a cocaína,existiendo una posible influencia ejercida por encefalina sobre dicho proceso. Es por esto que utilizando ratones KO para el gen de la proencefalina se estudió la participación del sistema encefalinérgico en el sistema nervioso central (SNC), evaluando su rol en la sensibilización a los efectos estimulantes sobre aspectos conductuales y las neuroadaptaciones bioquímicas y moleculares en áreas del circuito mesocorticolímbico asociadas al fenómeno. Ratones de genotipo salvaje (WT) y knockout (KO) para proencefalina fueron sometidos a un tratamiento crónico con cocaína (9x15mg/kg i.p.) para inducir sensibilización. En otro set de experimentos, se administró naloxone (NX) (1 mg/kg s.c.) en ratones de la cepa C57BL/6 antes de cada inyección de cocaína durante la fase de tratamiento. Todos los animales recibieron un desafío con cocaína (7,5mg/kg i.p.) transcurridos 15 y 21 días desde el inicio del tratamiento crónico con la droga para evaluar la expresión de la sensibilización al efecto estimulante motor inducido por cocaína. El día 21, se realizaron estudios de microdiálisis in vivo para determinar los niveles extracelulares de dopamina, ensayos de inmunotransferencia de proteínas para determinar los niveles de expresión de la subunidad GluR1 del receptor AMPA, fosforilación de ERK2 (pERK2), CREB (pCREB), TrkB (pTrkB) y experimentos de inmunofluorescencia o inmonohistoquímica para medir niveles del factor trófico derivado de cerebro (BDNF) y metionina-encefalina (met-encefalina), respectivamente, en áreas del cerebro relevantes para la sensibilización provenientes de los animales KO y WT y/o pre tratados con NX o vehículo. Los resultados obtenidos en este trabajo de tesis demostraron que la exposición crónica a cocaína produce importantes incrementos en los niveles de met-encefalina en áreas del circuito mesocorticolímbico relevantes para la expresión del fenómeno de sensibilización y que la ausencia del gen que codifica para dicho neuropéptido resulta en una falla en la expresión de la sensibilización a las propiedades estimulantes de cocaína sobre la actividad locomotora y en la liberación de dopamina en el núcleo accumbens (NAc). A nivel molecular, suprime las neuroadaptaciones clave asociadas al fenómeno tales como el aumento en la señalización BDNF/TrkB, la fosforilación de ERK2/CREB y la expresión del receptor AMPA. Consistentemente, se observó una completa supresión de la plasticidad conductual y neuronal inducida por la cocaína después de pre-tratamiento con NX. Los resultados presentados en este trabajo de tesis demuestran por primera vez que el sistema de proencefalina y péptidos derivados es esencial en el desarrollo de las neuroadaptaciones fundamentales subyacentes a la sensibilización conductual inducida por cocaína y enfatizan la noción de que los genes que son alterados tras el consumo de una droga dentro del circuito de la motivación estarían involucrados en el desarrollo de dichos cambios neuroquímicos y moleculares que confieren estabilidad a los trastornos conductuales que caracterizan al proceso adictivo. Además, estas observaciones proveen la primera evidencia sobre los mecanismos neurobiológicos que explican la efectividad de los antagonistas opiáceos en el tratamiento de la adicción a cocaína apoyando su utilidad como terapia para este trastorno (Schmitz y col., 2009; Comer y col., 2013; Mooney y col., 2013).Fil: Mongi Bragato, Bethania. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Cancela, Liliana Marina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; Argentina.Fil: Cancela, Liliana Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina.Fil: Arce, Carlos Ángel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica; Argentina.Fil: Arce, Carlos Ángel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina.Fil: Mascó, Daniel Hugo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas; Argentina.Fil: Virgolini, Miriam Beatriz. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; Argentina.Fil: Virgolini, Miriam Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina.Fil: Wikinski, Silvia Inés. Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Farmacología; Argentina

Endogenous enkephalin is necessary for cocaine-induced alteration in glutamate transmission within the nucleus accumbens

Altered glutamate transmission within the nucleus accumbens (NAc) has been proposed as a central mechanism underlying behavioural sensitisation associated with repeated cocaine exposure. In addition to glutamate, enkephalin, an endogenous opioid peptide derived from proenkephalin, is necessary for the neuroadaptations associated with chronic cocaine. However, the influence of enkephalin on long-term changes in glutamate transmission within the NAc associated with cocaine-induced sensitisation has not been described. This study used knockout proenkephalin mice (KO) to study the influence of endogenous enkephalin on the adaptations in glutamate neurotransmission associated with repeated cocaine treatment. Wild-type (WT) and KO mice were treated with daily cocaine injections for 9 days to induce sensitisation. On days 15 and 21, the animals received a cocaine challenge and locomotor sensitisation was evaluated, and microdialysis was performed to determine accumbens glutamate content on day 21. No expression of behavioural sensitisation to cocaine was evidenced in the KO mice. Consistently, these showed no changes in glutamate transmission in the NAc associated with repeated cocaine. This study reveals the central role of enkephalin in regulating the glutamate mechanisms associated with cocaine sensitisation.Fil: Mongi Bragato, Bethania del Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; ArgentinaFil: Avalos, Maria Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; ArgentinaFil: Guzman, Andrea Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; ArgentinaFil: Garcia Keller, Constanza. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; ArgentinaFil: Bollati, Flavia Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; ArgentinaFil: Cancela, Liliana Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; Argentin

CB1R activation in nucleus accumbens core promotes stress-induced reinstatement of cocaine seeking by elevating extracellular glutamate in a drug-paired context

Preclinical models of stress-induced relapse to drug use have shown that the dysregulation of glutamatergic transmission within the nucleus accumbens (NA) contributes notably to the reinstatement of cocaine-seeking behavior in rodents. In this sense, there has been increasing interest in the cannabinoid type-1 receptor (CB1R), due to its crucial role in modulating glutamatergic neurotransmission within brain areas involved in drug-related behaviors. This study explored the involvement of CB1R within the NA subregions in the restraint stress-induced reinstatement of cocaine-conditioned place preference (CPP), as well as in the regulation of glutamatergic transmission, by using a pharmacological approach and the in vivo microdialysis sampling technique in freely moving rats. CB1R blockade by the antagonist/inverse agonist AM251 (5 nmol/0.5 μl/side) or CB1R activation by the agonist ACEA (0.01 fmol/0.5 μl/side), prevented or potentiated restraint stress-induced reinstatement of cocaine-CPP, respectively, after local administration into NAcore, but not NAshell. In addition, microdialysis experiments demonstrated that restraint stress elicited a significant increase in extracellular glutamate in NAcore under reinstatement conditions, with the local administration of AM251 or ACEA inhibiting or potentiating this, respectively. Interestingly, this rise specifically corresponded to the cocaine-associated CPP compartment. We also showed that this context-dependent change in glutamate paralleled the expression of cocaine-CPP, and disappeared after the extinction of this response. Taken together, these findings demonstrated the key role played by CB1R in mediating reinstatement of cocaine-CPP after restraint stress, through modulation of the context-specific glutamate release within NAcore. Additionally, CB1R regulation of basal extracellular glutamate was demonstrated and proposed as the underlying mechanism.Fil: Guzman, Andrea Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; ArgentinaFil: Avalos, Maria Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; ArgentinaFil: de Giovanni, Laura Noemi. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Euliarte, Pía Valentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Sanchez, Marianela Adela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Mongi Bragato, Bethania del Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; ArgentinaFil: Rigoni, Daiana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Bollati, Flavia Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Virgolini, Miriam Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; ArgentinaFil: Cancela, Liliana Marina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentin

Oxidative stress and mitochondrial adaptive shift during pituitary tumoral growth

The cellular transformation of normal functional cells to neoplastic ones implies alterations in the cellular metabolism and mitochondrial function in order to provide the bioenergetics and growth requirements for tumour growth progression. Currently, the mitochondrial physiology and dynamic shift during pituitary tumour development are not well understood. Pituitary tumours present endocrine neoplastic benign growth which, in previous reports, we had shown that in addition to increased proliferation, these tumours were also characterized by cellular senescence signs with no indication of apoptosis. Here, we show clear evidence of oxidative stress in pituitary cells, accompanied by bigger and round mitochondria during tumour development, associated with augmented biogenesis and an increased fusion process. An activation of the Nrf2 stress response pathway together with the attenuation of the oxidative damage signs occurring during tumour development were also observed which will probably provide survival advantages to the pituitary cells. These neoplasms also presented a progressive increase in lactate production, suggesting a metabolic shift towards glycolysis metabolism. These findings might imply an oxidative stress state that could impact on the pathogenesis of pituitary tumours. These data may also reflect that pituitary cells can modulate their metabolism to adapt to different energy requirements and signalling events in a pathophysiological situation to obtain protection from damage and enhance their survival chances. Thus, we suggest that mitochondria function, oxidative stress or damage might play a critical role in pituitary tumour progression.Fil: Sabatino, María Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Grondona, Ezequiel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Sosa, Liliana del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Mongi Bragato, Bethania del Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Carreño, Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Juarez, Andrea Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: da Silva, Rodrigo A.. Universidad Federal de Santa Catarina, Brasil; BrasilFil: Remor, Aline. Universidad Federal de Santa Catarina, Brasil; BrasilFil: de Bortoli, Lucila. Universidad Federal de Santa Catarina, Brasil; BrasilFil: Paula Martins, Roberta de. Universidad Federal de Santa Catarina, Brasil; BrasilFil: Pérez, Pablo Aníbal. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Centro de Microscopía Electrónica; ArgentinaFil: Petiti, Juan Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Centro de Microscopía Electrónica; ArgentinaFil: Gutiérrez, Silvina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Centro de Microscopía Electrónica; ArgentinaFil: Torres, Alicia Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Centro de Microscopía Electrónica; ArgentinaFil: Latini, Alexandra. Universidad Federal de Santa Catarina, Brasil; BrasilFil: de Paul, Ana Lucia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Centro de Microscopía Electrónica; Argentin

Enkephalin as a Pivotal Player in Neuroadaptations Related to Psychostimulant Addiction

Enkephalin expression is high in mesocorticolimbic areas associated with psychostimulant-induced behavioral and neurobiological effects, and may also modulate local neurotransmission in this circuit network. Psychostimulant drugs, like amphetamine and cocaine, significantly increase the content of enkephalin in these brain structures, but we do not yet understand the specific significance of this drug-induced adaptation. In this review, we summarize the neurochemical and molecular mechanism of psychostimulant-induced enkephalin activation in mesocorticolimbic brain areas, and the contribution of this opioid peptide in the pivotal neuroadaptations and long-term behavioral changes underlying psychostimulant addiction. There is evidence suggesting that adaptive changes in enkephalin content in the mesocorticolimbic circuit, induced by acute and chronic psychostimulant administration, may represent a key initial step in the long-term behavioral and neuronal plasticity induced by these drugs

Enkephalin is essential for the molecular and behavioral expression of cocaine sensitization

Behavioral sensitization to cocaine is associated to neuroadaptations that contribute to addiction. Enkephalin is highly expressed in mesocorticolimbic areas associated with cocaine-induced sensitization; however, their influence on cocaine-dependent behavioral and neuronal plasticity has not been explained. In this study, we employed a knockout (KO) model to investigate the contribution of enkephalin in cocaine-induced behavioral sensitization. Wild-type (WT) and proenkephalin KO mice were treated with cocaine once daily for 9 days to induce sensitization. Additionally, to clarify the observations in KO mice, the same procedure was applied in C57BL/6 mice, except that naloxone was administered before each cocaine injection. All animals received a cocaine challenge on days 15 and 21 of the treatment to evaluate the expression of locomotor sensitization. On day 21, microdialysis measures of accumbal extracellular dopamine, Western blotting for GluR1 AMPA receptor (AMPAR), phosphorylated ERK2 (pERK2), CREB (pCREB), TrKB (pTrkB) were performed in brain areas relevant for sensitization from KO and WT and/or naloxone- and vehicle pre-treated animals. We found that KO mice do not develop sensitization to the stimulating properties of cocaine on locomotor activity and on dopamine release in the nucleus accumbens (NAc). Furthermore, pivotal neuroadaptations such as the increase in pTrkB receptor, pERK/CREB and AMPAR related to sensitized responses were absent in the NAc from KO mice. Consistently, full abrogation of cocaine-induced behavioral and neuronal plasticity after naloxone pre-treatment was observed. We show for first time that the proenkephalin system is essential in regulating long-lasting pivotal neuroadaptations in the NAc underlying behavioral sensitization to cocaine.Fil: Mongi Bragato, Bethania del Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Zamponi, Emiliano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Garcia Keller, Constanza. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Assis, Maria Amparo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Virgolini, Miriam Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Masco, Daniel Hugo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Zimmer, Andreas. Universitaet Bonn; AlemaniaFil: Cancela, Liliana Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas; Argentin

Impairment of glutamate homeostasis in the nucleus accumbens core underpins cross-sensitization to cocaine following chronic restraint stress

Fil: Avalos, María Paula. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Cancela, Liliana Marina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; Argentina.Fil: Cancela, Liliana Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina.Fil: Bollati, Flavia Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; Argentina.Fil: Bollati, Flavia Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina.Fil: Rigoni, Daiana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Garcia Keller, Constanza. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Guzmán, Andrea Susana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Calfa, Diego Gastón. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Calfa, Diego Gastón. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina.Fil: Sanchez, Marianela Adela. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Sanchez, Marianela Adela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina.Fil: Esparza, Maria Alejandra. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Esparza, Maria Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina.Fil: Mongi Bragato, Bethania del Carmen. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Mongi Bragato, Bethania del Carmen. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; Argentina.Though the facilitating influence of stress on drug abuse is well documented, the mechanisms underlying this interaction have yet to be fully elucidated. The present study explores the neurobiological mechanisms underpinning the sensitized response to the psychomotor-stimulating effects of cocaine following chronic restraint stress (CRS), emphasizing the differential contribution of both subcompartments of the nucleus accumbens (NA), the core (NAcore) and shell (NAshell), to this phenomenon. Adult male Wistar rats were restrained for 2 h/ day for 7 days and, 2 weeks after the last stress exposure (day 21), all animals were randomly assigned to behavioral, biochemical or neurochemical tests. Our results demonstrated that the enduring CRS-induced increase in psychostimulant response to cocaine was paralleled by an increase of extracellular dopamine levels in the NAcore, but not the NAshell, greater than that observed in the non-stress group. Furthermore, we found that CRS induced an impairment of glutamate homeostasis in the NAcore, but not the NAshell. Its hallmarks were increased basal extracellular glutamate concentrations driven by a CRS-induced downregulation of GLT-1, blunted glutamate levels in response to cocaine and postsynaptic structural remodeling in pre-stressed animals. In addition, ceftriaxone, a known GLT-1 enhancer, prevented the CRS-induced GLT-1 downregulation, increased basal extracellular glutamate concentrations and changes in structural plasticity in the NAcore as well as behavioral cross-sensitization to cocaine, emphasizing the biological importance of GLT-1 in the comorbidity between chronic stress exposure and drug abuse. A future perspective concerning the paramount relevance of the stress-induced disruption of glutamate homeostasis as a vulnerability factor to the development of stress and substance use disorders during early life or adulthood of descendants is providedFil: Avalos, María Paula. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Cancela, Liliana Marina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; Argentina.Fil: Cancela, Liliana Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina.Fil: Bollati, Flavia Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; Argentina.Fil: Bollati, Flavia Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina.Fil: Rigoni, Daiana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Garcia Keller, Constanza. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Guzmán, Andrea Susana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Calfa, Diego Gastón. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Calfa, Diego Gastón. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina.Fil: Sanchez, Marianela Adela. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Sanchez, Marianela Adela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina.Fil: Esparza, Maria Alejandra. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Esparza, Maria Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina.Fil: Mongi Bragato, Bethania del Carmen. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Mongi Bragato, Bethania del Carmen. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; Argentina

Impairment of glutamate homeostasis in the nucleus accumbens core underpins cross-sensitization to cocaine following chronic restraint stress

Though the facilitating influence of stress on drug abuse is well documented, the mechanisms underlying this interaction have yet to be fully elucidated. The present study explores the neurobiological mechanisms underpinning the sensitized response to the psychomotor-stimulating effects of cocaine following chronic restraint stress (CRS), emphasizing the differential contribution of both subcompartments of the nucleus accumbens (NA), the core (NAcore) and shell (NAshell), to this phenomenon. Adult male Wistar rats were restrained for 2 h/day for 7 days and, 2 weeks after the last stress exposure (day 21), all animals were randomly assigned to behavioral, biochemical or neurochemical tests. Our results demonstrated that the enduring CRS-induced increase in psychostimulant response to cocaine was paralleled by an increase of extracellular dopamine levels in the NAcore, but not the NAshell, greater than that observed in the non-stress group. Furthermore, we found that CRS induced an impairment of glutamate homeostasis in the NAcore, but not the NAshell. Its hallmarks were increased basal extracellular glutamate concentrations driven by a CRS-induced downregulation of GLT-1, blunted glutamate levels in response to cocaine and postsynaptic structural remodeling in pre-stressed animals. In addition, ceftriaxone, a known GLT-1 enhancer, prevented the CRS-induced GLT-1 downregulation, increased basal extracellular glutamate concentrations and changes in structural plasticity in the NAcore as well as behavioral cross-sensitization to cocaine, emphasizing the biological importance of GLT-1 in the comorbidity between chronic stress exposure and drug abuse. A future perspective concerning the paramount relevance of the stress-induced disruption of glutamate homeostasis as a vulnerability factor to the development of stress and substance use disorders during early life or adulthood of descendants is provided.Fil: Avalos, Maria Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Guzman, Andrea Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Garcia Keller, Constanza. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Mongi Bragato, Bethania del Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Esparza, Maria Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Rigoni, Daiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Sanchez, Marianela Adela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Calfa, Gaston Diego. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Bollati, Flavia Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Cancela, Liliana Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentin

Pivotal role of NF-κB in cellular senescence of experimental pituitary tumours

The molecular mechanisms underlying the capability of pituitary tumours to avoid unregulated cell proliferation are still not well understood. However, the NF-κB transcription factor, which is able to modulate not only cellular senescence but also tumour progression, has emerged as a targeted candidate. This work was focused on the NF-κB role in cellular senescence during the progression of experimental pituitary tumours. Also, the contribution of the signalling pathways in senescence-associated NF-κB activation and the senescence-associated secretory phenotype (SASP) and pro-survival-NF-κB target genes transcription were analysed. A robust NF-κB activation was seen at E20-E40 of tumour development accompanied by a marked SA-β-Gal co-reactivity in the tumour pituitary parenchyma. The induction of TNFα and IL1-β as specific SASP-related NF-κB target genes as well as Bcl-2 and Bcl-xl pro-survival genes was shown to be accompanied by increases in the p-p38 MAPK protein levels, starting at the E20 stage and strengthening from 40 to 60 days of tumour growth. It is noteworthy that p-JNK displayed a similar pattern of activation during pituitary tumour development, while p-AKT and p-ERK1/2 were downregulated. By employing a pharmacological strategy to abrogate NF-κB activity, we demonstrated a marked reduction in SA-β-Gal activity and a slight decrease in Ki67 immunopositive cells after NF-κB blockade. These results suggest a central role for NF-κB in the regulation of the cellular senescence programme, leading to the strikingly benign intrinsic nature of pituitary adenomas.Fil: Mongi Bragato, Bethania del Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Grondona, Ezequiel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Sosa, Liliana del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Zlocowski, Natacha. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Venier, Ana Clara. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Torres, Alicia Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Latini, Alexandra. Universidade Federal de Santa Catarina; BrasilFil: Bainy Leal, Rodrigo. Universidade Federal de Santa Catarina; BrasilFil: Gutiérrez, Silvina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: de Paul, Ana Lucia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentin

Impairment of glutamate homeostasis in the nucleus accumbens core underpins cross-sensitization to cocaine following chronic restraint stress

Though the facilitating influence of stress on drug abuse is well documented, the mechanisms underlying this interaction have yet to be fully elucidated. The present study explores the neurobiological mechanisms underpinning the sensitized response to the psychomotor-stimulating effects of cocaine following chronic restraint stress (CRS), emphasizing the differential contribution of both subcompartments of the nucleus accumbens (NA), the core (NAcore) and shell (NAshell), to this phenomenon. Adult male Wistar rats were restrained for 2 h/ day for 7 days and, 2 weeks after the last stress exposure (day 21), all animals were randomly assigned to behavioral, biochemical or neurochemical tests. Our results demonstrated that the enduring CRS-induced increase in psychostimulant response to cocaine was paralleled by an increase of extracellular dopamine levels in the NAcore, but not the NAshell, greater than that observed in the non-stress group. Furthermore, we found that CRS induced an impairment of glutamate homeostasis in the NAcore, but not the NAshell. Its hallmarks were increased basal extracellular glutamate concentrations driven by a CRS-induced downregulation of GLT-1, blunted glutamate levels in response to cocaine and postsynaptic structural remodeling in pre-stressed animals. In addition, ceftriaxone, a known GLT-1 enhancer, prevented the CRS-induced GLT-1 downregulation, increased basal extracellular glutamate concentrations and changes in structural plasticity in the NAcore as well as behavioral cross-sensitization to cocaine, emphasizing the biological importance of GLT-1 in the comorbidity between chronic stress exposure and drug abuse. A future perspective concerning the paramount relevance of the stress-induced disruption of glutamate homeostasis as a vulnerability factor to the development of stress and substance use disorders during early life or adulthood of descendants is provided.Fil: Avalos, Maria Paula. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Bollati, Flavia Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; ArgentinaFil: Calfa, Gaston Diego. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; ArgentinaFil: Sanchez, Marianela Adela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; ArgentinaFil: Rigoni, Daiana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Esparza, Maria Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; ArgentinaFil: Mongi Bragato, Bethania del Carmen. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Garcia Keller, Constanza. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; ArgentinaFil: Guzman, Andrea Susana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; ArgentinaFil: Cancela, Liliana Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentin