A hyper-immunglobulin E szindróma molekuláris pathológiája = Molecular pathomechanism of hyper-immunoglobulin E syndrome

A hyper-IgE (HIGE) szindrómában az immunrendszer válasza a bakteriális és gombás fertőzésekkel szemben károsodik, amely klinikailag visszatérő, ritkán fatális fertőzéseket okoz. HIGE szindrómás betegekben vizsgáltuk a STAT3 gén szekvenciát és ELISA-val a különböző stimulusok (LPS, CLO75, IL-6) hatására bekövetkező TNF-? és MCP-1 termelés alapján a mononukleáris sejtek aktiválódását. Tanulmányoztuk a humán beta defensinek (HBD) termelésében szerepet játszó IL-17- és IL-22-dependens testfelszíni immunitást, ill. a Candida felismerésben szerepet játszó dectin-1 gén szekvenciát és receptor expressziót. A vizsgálatok azt mutatták, hogy a betegekben a Th17 sejtek mennyisége és a mononukleáris sejtjek IL-6 válaszkészsége csökkent. Eredményeinket a Mol. Immunol. folyóiratban közöltük (2008; 46:202). A defensinek antimikróbás hatású molekulák, hatásukat a baktériumok membránjának károsítása révén fejtik ki. HIGE szindrómában a csökkent antibakteriális védelemben a bőr- és mucosalis defensin expresszió csökkenése is szerepet játszik. A betegek szérum és nyálmintáiban RT-PCR-ral ill. intracellularis immunfluorescens jelölést követően bőrbiopsziás mintákban vizsgáltuk a HBD expressziós mintázatot. A szérumban a vizsgált defensinek koncentrációja a kontrollokéval megegyező volt. A secretumban a HBD1 koncentráció szignifikánsan csökkent volt, amely a mucosalis defensin expresszió defektusára utal. Az eredmények közlemény formájában való összefoglalása folyamatban van. | The hyper-IgE syndrome is a multisystem primary immunodeficiency disorder characterized by pyogenic and fungal skin and lung infections. We performed genetic studies of STAT3 in patients with AD or sporadic forms of the disease, and studied LPS-, CLO-75-, and IL-6-induced release of TNF-? and MCP-1, to characterize the activation of the mononuclear cells. Our research also involved investigation of IL-17- és IL-22-dependent mucosal immunity and Candida recognizing dectin-1 gene sequence and receptor expression. STAT3 deficient patients showed decreased Th17 cell population, and negligible production upon IL-6 stimulation of MCP-1 by the patient's blood mononuclear cells. We published our data in Mol. Immunol. (2008; 46:202). Defensins are antimicrobial molecules; function as binding to bacterial cell walls. Decreased antibacterial immunity in HIGE patients partly caused by decreased skin, and mucosal expression of defensins. We investigated human betha defensin (HBD) expression by RT-PCR in serum and saliva samples of HIGE patients. We also analyze the expression pattern by intracellular immunofluorescent staining of skin biopsy specimens. Expression of different HBDs in the patients’ sera was comparable to healthy controls; however in HIGE saliva the HBD1 concentration was significantly decreased. Our new results are under publishing

A hyper-IgM szindróma molekuláris pathológiája = Molecular pathology of hyper-IgM syndrome

Az összesen 122 XLA-ban szenvedő betegben (109 család, tíz ország) 98 különböző mutációt találtunk, amelyek közül 46 korábban nem ismert új mutáció. Az XLA előfordulási gyakoriságát az érintett országok populációját (145.530.870) tekintve 1:1.399.000 gyakoriságúnak találtuk. Eredményeinket a Mol. Immunol. című folyóiratba közöltük. Részletes molekuláris genetikai és immunológiai vizsgálatokat végzetünk a Magyarországon diagnosztizált 7 Apeced (APS I.) szindrómás beteganyagon. Megállapítottuk, hogy a betegség egyik immunológiai markere az interferon-omega antitestek magas szintje, amely mindegyik beteg esetében kimutatható volt. Eredményeinket a Clin. Endocrinology című folyóiratban közöltük. | We have described the association of the X-linked form of hyper-IgM syndrome (CD40 ligand deficiency) with neuroendocrine carcinoma and published this observation in Clin. Immunology. As a result of multicenter collaboration we found novel PID designated as MyD88 deficiency and published this finding in Science. Hyper-IgE syndrome patients from Poland, Russia, Sweden, Lebanon, and Hungary were analyzed for mutation in the STAT3 gene. The novel H332Y missense mutation was found and described in this cohort in Mol. Immunol. We have analyzed mutational spectrum of 122 patients with X-linked agammaglobulinemia in ten Eastern and Central European countries. We published this cohort study in Mol. Immunol. Finally, we analyzed in detail immunological and genetic characteristic of seven Hungarian patients in APECED (APS1) and published in Clin Endocrinol

Az Interferon-gamma által indukált jelátvitel mechanizmusa humán újszülöttek mononukleáris fagocitasejtjeiben = Interferon-gamma induced signaling in mononuclear phagocytes from human neonates

Humán újszülöttek és felnőttek mononukleáris (MN) fagocitasejtjeiben a foszforilált STAT-1 kimutatásához olyan monoclonalis antitesteket használtunk, amelyek specifikusan kötődnek a foszforilált STAT-1 molekulákhoz, de nem kötődnek a natív STAT-1 fehérjéhez. Az eredmények megerősítik, hogy humán újszülöttekben a Th1 immunválasz csökkent működése korhoz kötött, immunbiológiai sajátosság. Ennek oka valószínűleg az interauterin mikrokörnyezet Th2 dominanciája. Új vizsgáló módszereket állítottunk be a SOCS (Suppressors of Cytokine Signaling) fehérjék γ-interferonnal aktivált sejtekben való kimutatására. Folyamatban lévő, real-time PCR technikával végzett vizsgálatainkkal választ keresünk arra, hogy újszülöttek, különböző korú gyermekek és felnőttek izolált MN fagocitasejtjeiben milyen a SOCS fehérjékre specifikus mRNA kifejeződése. Az alapvizsgálatok befejezését követően az mRNA expressiót különböző citokinekkel (elsősorban IFN-γ-val és GM-CSF-el) stimulált sejtekben vizsgáljuk. A veleszületett immundefektusok új típusát írtuk le. A hyper-IgM syndroma 4-es típusában a szomatikus hypermutáció normális, az izotypus váltás kóros. Új SH2D1A gén mutációt (p.G16D) írtunk le X-kromoszómához kötött lymphoproliferatív betegségben. Kimutattuk, hogy a mutáns G16D protein elveszíti kötődési képessét. | We have found a marked deficiency in phosphorylation of the IFN-R-associated STAT-1 in human newborn macrophages compared to adult cells. These findings suggest that there are important differences in the way newborns and adults use STAT-1 to modify immune response to pathogens. Based on our research we propose that a decreased STAT-1 phosphorylation and activation may represent developmental immaturity and may contribute to the unique susceptibility of neonates to infections by intracellular pathogens. Research on the role of SOCS (suppressors of cytokine signaling) proteins in the neonatal signaling deficiency is in progress. We have described a new molecular form of hyper IgM syndrome (HIGM) which we designate as HIGM-4 and characterized normal somatic hypermutation (SHM) and deficient class switch recombination. We have described a new disease-causing, SH2D1A mutation in X-linked lymphoproliferative syndrome. We have reported that the p.G16D mutation resulted in a defect in protein folding as manifested by moderately reduced half-life compared to that of wild type SH2D1A. Furthermore, the G16D protein was defective in binding to its physiological ligands (SLAM and 2B4). We unveiled that assembly of the respiratory burst oxidase of mononuclear phagocytes may be a possible target of the pathologic actions of glucocerebrosid accumulating in macrophages of patients with Gaucher disease. macrophages of patients with Gaucher disease

Molekuláris genetikai vizsgálatok primer immundefektusokban = Molecular genetic studies in primary immunodeficiencies

Absztrakt: Az új generációs szekvenálási módszerek a molekuláris genetikai diagnosztika legújabb korszakát jelképezik. A szerző a primer immundeficientiákról írt általános bevezetőt követően összefoglalja a molekuláris genetikai vizsgálatok, különösen az új generációs szekvenálás jelentőségét a primer immundeficientiák diagnosztikájában. A közlemény célja továbbá, hogy rövid történeti áttekintésen keresztül megismertesse az új generációs szekvenálás módszertani alapjait. A szerző összehasonlítva elemzi a primer immundeficientia génpanel-szekvenálás, valamint a teljesexom- és a teljesgenom-szekvenálás előnyeit és hátrányait. Összefoglaló táblázatban kerülnek bemutatásra az új generációs szekvenálásnak köszönhetően eddig felismert primer immundeficientia gének és betegségek. A szerző végül részletesen ír arról, hogy primer immundefektusokban a génszintű diagnosztika miért nem nélkülözhető, és bemutatja a Magyarországon korábban elért eredményeket. Orv Hetil. 2018; 159(49): 2095–2112. | Abstract: Next generation sequencing methods represent the latest era of molecular genetic diagnostics. After a general introduction on primary immunodeficiencies, the author summarizes the importance of molecular genetic studies, especially next generation sequencing in the diagnosis of primary immunodeficiencies. Another purpose of the manuscript is to give a brief summary on the methodological basis of next generation sequencing. The author analyzes the advantages and disadvantages of primary immunodeficiency gene-panel sequencing and whole-exome and whole-genome sequencing. Primary immunodeficiency genes and diseases recognized by next generation sequencing is also summarized. Finally, the author emphasizes the indispensability of gene level diagnostics in primary immunodeficiencies and presents the results achieved in this field in Hungary. Orv Hetil. 2018; 159(49): 2095–2112

A súlyos kombinált immundefektusok újszülöttkori szűrővizsgálata = Neonatal screening of severe combined immunodeficiencies

Absztrakt: A súlyos kombinált immundeficientia az első immunhiányos betegség, amely 2010-ben a világon elsőként az Egyesült Államokban bekerült az újszülöttkori szűrőprogramba. Hazánkban az újszülöttkori szűrés bevezetése a kötelezően alkalmazott BCG-oltás miatt is döntő fontosságú, hiszen negatív családi anamnézisű beteg újszülött esetében az oltás halálos kimenetelű fertőzéshez vezethet. A közlemény a súlyos kombinált immundefektusok újszülöttkori szűrővizsgálatának bevezetési lehetőségeit elemzi, és összefoglalja az eddigi tapasztalatokat és eredményeket. Orv Hetil. 2018; 159(23): 948–956. | Abstract: Severe combined immunodeficiency is the first immune deficiency disorder which was included in the newborn screening program in the United States in 2010. In Hungary, newborn screening for severe combined immunodeficiencies is crucial because of the routine BCG vaccination, as in the case of an affected newborn with negative family history, the vaccine may lead to fatal BCG-itis. This paper analyzes the possibilities of introducing newborn screening for severe combined immunodeficiencies and summarizes current experiences and results. Orv Hetil. 2018; 159(23): 948–956

Szájüregi manifesztációk primer immundeficientiákban = Oral manifestations in patients with primary immunodeficiencies

Absztrakt: Primer immundeficientiákban a társuló szájüregi manifesztációk leggyakrabban fogágybetegség, fogszuvasodás és szájnyálkahártya-betegségek formájában jelentkeznek. A fogszuvasodás kialakulására való fokozott hajlam elsősorban az immunglobulintermelés zavarával járó immunhiány-betegségeket jellemzi, míg a plakk jelenlétéhez köthető fogágybetegség phagocytadefektusokban gyakori. A fogak szerkezeti rendellenessége az apoptózis zavarával járó immunhiányos betegségekben fordulhat elő. A DNS-repair-mechanizmusok defektusával járó immundeficientiákban rosszindulatú szájüregi daganatok is kialakulhatnak. Orv Hetil. 2018; 159(49): 2079–2086. | Abstract: Characteristic lesions of the oral cavity in primary immunodeficiencies are commonly found in the form of periodontal disease, tooth decay and disorders of the oral mucosa. Humoral immunodeficiencies may cause tooth decay, while severe forms of plaque-induced periodontal disease are common in phagocytic deficiencies. The structural abnormalities of the teeth can occur in immunodeficiencies associated with apoptosis defect. Oral squamous cell carcinoma is a possible complication of immunodeficiencies associated with DNA repair defects. Orv Hetil. 2018; 159(49): 2079–2086

Autoantibodies to IL-17A may be correlated with the severity of mucocutaneous candidiasis in APECED patients.

The relative roles of various autoantibodies against IL-17-type cytokines in susceptibility to chronic mucocutaneous candidiasis (CMC) in patients with autoimmune polyendocrinopathy-candidiasis-ectodermal dystrophy (APECED) remain poorly defined. The purpose of this longitudinal study was to analyze the relationship between the occurrence of mucocutaneous candidiasis and levels of anti-IL-17A, anti-IL-17F and anti-IL-22 autoantibodies. We studied six APECED patients from four families with various disease manifestations. Clinical data were collected during regular follow-up. Anti-endocrine organ antibody levels and clinical chemistry and immunology parameters were determined in routine laboratory assays on freshly isolated serum. Levels of autoantibodies against IL-17A, IL-17F, IL-22, IFN-α, IFN-ω and TNF-α, and cytokine release by Candida-exposed blood cells were determined by ELISA. Mutations were analyzed by sequencing genomic DNA. Four patients carried the germline c.769C > T homozygous nonsense mutation, which results in R257X truncation of the AIRE protein, and two patients from the same family were compound heterozygous for the c.769C > T/c.1344delC mutation. We found persistently high levels of antibodies against IL-17A in the serum samples of one patient presenting CMC since infancy and low or undetectable anti-IL-17A antibody levels in the sera of five patients with no candidiasis or without severe candidiasis. By contrast, levels of autoantibodies against IL-17F and IL-22 were higher in all patients than in healthy controls. Release of IL-17-type cytokines by Candida-exposed blood mononuclear cells was low or negligible in all patients tested. We suggest that anti-IL-17A antibodies may play an important role in the predisposition to candidiasis of APECED patients. However, the lack of severe CMC in APECED patients with high levels of IL-17F and anti-IL-22 autoantibodies clearly calls into question the role of these antibodies as the principal cause of cutaneous and mucosal candidiasis in at least some APECED patients. These data also suggest that the impaired release of IL-17-type cytokines by blood cells may be an element of the immunopathology of CMC in APECED patients