ESTUDIO DEL MECANISMO CARDIOPROTECTOR DEL TRATAMIENTO ORAL SUBCRÓNICO CON PRODUCTOS NATURALES QUE POSEEN ISOFLAVONAS, SOJA Y MACA (Lepidium meyenii), EN LA ISQUEMIA Y REPERFUSIÓN CARDÍACA”

Las enfermedades crónicas cardiovasculares son las más frecuentes entre las causas de muerte, cuando el flujo coronario disminuye o es suspendido provoca isquemia miocárdica (I), que reduce la oferta cardíaca de oxígeno, con una disfunción que se desarrolla en la reperfusión (R). Las plantas medicinales pueden aportar una estrategia cardioprotectora preventiva. En mi Tesis de Maestría en Plantas medicinales he demostrado que la administración oral de 1 g/kg/día de la raíz pulverizada de maca (Lepidium meyenii Walp.) durante 7 días fue cardioprotectora en un modelo de atontamiento moderado por I/R en corazones aislados de ratas, al igual que con isoflavonas de soja (IS). Tanto el efecto de la maca como de las IS no fue inhibido por bloqueo de las PKC, la NOS o los canales mKATP. El objetivo de mi plan de tesis doctoral es investigar el mecanismo de acción cardioprotector de la maca y de las IS en un modelo de I/R severo. Se hipotetiza que la cardioprotección frente a I/R podría asociarse a otro mecanismo que supera al bloqueo de dichas vías y podría estar relacionado a la activación de las vías antiapoptóticas de PI3K/Akt y/o GSK-3β; la inhibición de la generación de especies reactivas de oxígeno (ROS); o la reducción de la sobrecarga de calcio mitocondrial. Métodos Corazones se perfundirán arterialmente con solución Krebs según técnica de Langendorff, y estimulados a 5 Hz en el interior de un calorímetro de flujo. Se registrará continuamente la presión intraventricular isovolumétrica izquierda (P) mediante un globo conectado a un transductor de presión y se medirá el calor liberado por los corazones. Tratamientos: IS oral a una dosis de 100 mg/kg/día durante 1 semana y maca oral 1 g/kg/día durante 1 semana. Los corazones aislados perfundidos de ratas control y tratadas se expondrán a 30 minutos de I y 60 min de reperfusión (R) (atontamiento severo). Se evaluará la recuperación contráctil y calorimétrica, y el grado de infarto con cloruro de tetrazolio. Caracterización de los mecanismos de acción: se perfundirán intervenciones selectivas previo a la I/R con wortmanina (100 μM, inhibidor de la PI3K/Akt); ciclosporina-A (inhibidor del poro de permeabilidad mitocondrial, mPTP); emetina (para reducción del estrés del RS); reperfusión con cafeína 10 mM y 36 mM [Na]o para evaluar el contenido de Ca2+ del retículo sarcoplásmico (RS); 17-beta-estradiol (250 μg/kg i.p 24 hs antes) para evaluar si hay sinergismo con las isoflavonas como fitoestrógenos. Medición de la expresión de P-PI3K/Akt, P-GSK-3β y MnSOD por western blot en una porción del ventrículo izquierdo; evaluación del estrés oxidativo de un homogenato de ventrículo izquierdo utilizando ácido tiobarbitúrico (TBARS) y Glutatión reducido (GSH), y la determinación de la concentración de proteínas por el método de Bradford. Efectos de la maca en la homeostasis de calcio en cardiomiocitos por medición de señales de Ca2+ citosólica (Fluo-4) y mitocondrial (Rhod-2) en microscopio confocal

Sedative and antispasmodic effects of Stevia rebaudiana and noncompetitive inhibition of intestinal contractility by stevioside

Stevia rebaudiana (Asteraceae) is a shrub native from Paraguay whose leaves are used as sweetener due to the presence of stevioside and others. It has also hypoglycemic, hypotensor and diuretic effects. This work studied the effects of both, an aqueous crude extract of Stevia rebaudiana (A.c.e) and the stevioside (Stv) in isolated rat thin intestine, and the effects of A.c.e in mice on the open-field-test. The A.c.e of Stevia rebaudiana reduced the spontaneous locomotion and exploration of mice, at doses between 40 to 975 mg lyophilized/ Kg. In the isolated ileons and duodenums, the A.c.e induced a synergism of the acetylcholine doseresponse curve (ACh-DRC) at 0.1-0.3 mg lyophilized/mL and a non-competitive inhibition at higher concentrations (IC50: 1.22±0.16 mg lyoph/ml, n=6). Stv also non-competitively inhibited the ACh-DRC (IC50: 0.84 ± 0.22 mg/ml). Both, A.c.e and Stv inhibited the Ca2+-DRC in 40 mM K+-media in non-competitive way with IC50 of 1.01 ± 0.13 and 1.73 ± 0.47 mg/mL, respectively. Results suggest that Stevia extract exhibited sedative effect and important antispasmodic effect due to non-competitive antagonism of acetylcholine and Ca2+-influx to smooth muscle.Fil: Matera, Soledad Inés. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Farmacología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Piersante, María Victoria. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Farmacología; ArgentinaFil: Ragone, María Inés. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Farmacología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Consolini, Alicia Elvira. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Farmacología; Argentin

Sedative and antispasmodic effects of Stevia rebaudiana and noncompetitive inhibition of intestinal contractility by stevioside

Stevia rebaudiana (Asteraceae) is a shrub native from Paraguay whose leaves are used as sweetener due to the presence of stevioside and others. It has also hypoglycemic, hypotensor and diuretic effects. This work studied the effects of both, an aqueous crude extract of Stevia rebaudiana (A.c.e) and the stevioside (Stv) in isolated rat thin intestine, and the effects of A.c.e in mice on the open-field-test. The A.c.e of Stevia rebaudiana reduced the spontaneous locomotion and exploration of mice, at doses between 40 to 975 mg lyophilized/ Kg. In the isolated ileons and duodenums, the A.c.e induced a synergism of the acetylcholine doseresponse curve (ACh-DRC) at 0.1-0.3 mg lyophilized/mL and a non-competitive inhibition at higher concentrations (IC50: 1.22±0.16 mg lyoph/ml, n=6). Stv also non-competitively inhibited the ACh-DRC (IC50: 0.84 ± 0.22 mg/ml). Both, A.c.e and Stv inhibited the Ca2+-DRC in 40 mM K+-media in non-competitive way with IC50 of 1.01 ± 0.13 and 1.73 ± 0.47 mg/mL, respectively. Results suggest that Stevia extract exhibited sedative effect and important antispasmodic effect due to non-competitive antagonism of acetylcholine and Ca2+-influx to smooth muscle.Fil: Matera, Soledad Inés. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Farmacología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Piersante, María Victoria. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Farmacología; ArgentinaFil: Ragone, María Inés. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Farmacología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Consolini, Alicia Elvira. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Farmacología; Argentin

Farmacología experimental de plantas medicinales y fitoterapia: enseñanza del método científico a estudiantes de farmacia

Este trabajo tiene como objetivo transmitir las experiencias dentro del ámbito de una materia optativa de la carrera de Farmacia. “Farmacología de plantas medicinales y fitoterapia” tiene como primer objetivo promover la enseñanza del método científico y el razonamiento del alumno para la investigación de los efectos y mecanismos de plantas medicinales que son tradicionalmente empleadas por alguna comunidad o población, pero cuya actividad no ha sido científicamente comprobada. Como segundo objetivo promueve la investigación bibliográfica para formar al farmacéutico en el conocimiento fitoterápico existente, de modo que pueda aconsejar al paciente en el uso racional de la fitoterapia. Así, el alumno se capacita en la determinación experimental de actividad biológica, y en la búsqueda bibliográfica sistemática, dos pilares fundamentales de la investigación, tanto a nivel académico como de la industria farmacéutica. La cursada se completa con un trabajo final individual a elección entre un trabajo experimental original o una revisión bibliográfica. En los últimos 10 años, se han realizado trabajos que culminaron en 7 comunicaciones a congresos y 4 trabajos publicados en revistas científicas con referato. Los resultados muestran el interés de los alumnos por el método empleado en la asignatura.Facultad de Humanidades y Ciencias de la Educació

Farmacología experimental de plantas medicinales y fitoterapia: enseñanza del método científico a estudiantes de farmacia

Este trabajo tiene como objetivo transmitir las experiencias dentro del ámbito de una materia optativa de la carrera de Farmacia. “Farmacología de plantas medicinales y fitoterapia” tiene como primer objetivo promover la enseñanza del método científico y el razonamiento del alumno para la investigación de los efectos y mecanismos de plantas medicinales que son tradicionalmente empleadas por alguna comunidad o población, pero cuya actividad no ha sido científicamente comprobada. Como segundo objetivo promueve la investigación bibliográfica para formar al farmacéutico en el conocimiento fitoterápico existente, de modo que pueda aconsejar al paciente en el uso racional de la fitoterapia. Así, el alumno se capacita en la determinación experimental de actividad biológica, y en la búsqueda bibliográfica sistemática, dos pilares fundamentales de la investigación, tanto a nivel académico como de la industria farmacéutica. La cursada se completa con un trabajo final individual a elección entre un trabajo experimental original o una revisión bibliográfica. En los últimos 10 años, se han realizado trabajos que culminaron en 7 comunicaciones a congresos y 4 trabajos publicados en revistas científicas con referato. Los resultados muestran el interés de los alumnos por el método empleado en la asignatura.Facultad de Humanidades y Ciencias de la Educació

Farmacología experimental de plantas medicinales y fitoterapia: enseñanza del método científico a estudiantes de farmacia

Este trabajo tiene como objetivo transmitir las experiencias dentro del ámbito de una materia optativa de la carrera de Farmacia. “Farmacología de plantas medicinales y fitoterapia” tiene como primer objetivo promover la enseñanza del método científico y el razonamiento del alumno para la investigación de los efectos y mecanismos de plantas medicinales que son tradicionalmente empleadas por alguna comunidad o población, pero cuya actividad no ha sido científicamente comprobada. Como segundo objetivo promueve la investigación bibliográfica para formar al farmacéutico en el conocimiento fitoterápico existente, de modo que pueda aconsejar al paciente en el uso racional de la fitoterapia. Así, el alumno se capacita en la determinación experimental de actividad biológica, y en la búsqueda bibliográfica sistemática, dos pilares fundamentales de la investigación, tanto a nivel académico como de la industria farmacéutica. La cursada se completa con un trabajo final individual a elección entre un trabajo experimental original o una revisión bibliográfica. En los últimos 10 años, se han realizado trabajos que culminaron en 7 comunicaciones a congresos y 4 trabajos publicados en revistas científicas con referato. Los resultados muestran el interés de los alumnos por el método empleado en la asignatura.Facultad de Humanidades y Ciencias de la Educació

Enseñanza a estudiantes de farmacia de la asignatura electiva: farmacología experimental de plantas medicinales y fitoterapia

La asignatura Farmacología de Plantas Medicinales y Fitoterapia es una materia optativa para la carrera de Farmacia de la Facultad de Ciencias Exactas de la Universidad Nacional de La Plata. En ella se tratan dos aspectos de incumbencia profesional. Uno es el estudio experimental de la farmacología de una planta medicinal en diversos sistemas y sus mecanismos de acción. El segundo aspecto es la enseñanza de la Fitoterapia avalada internacionalmente (indicación, mecanismo de los principios activos, modo de preparación y posología, efectos adversos, precauciones y contraindicaciones, e interacciones de la planta con otros medicamentos). El objetivo de este trabajo es presentar la experiencia desarrollada a lo largo de más de 10 años en la asignatura Farmacología de Plantas Medicinales y Fitoterapia.Eje 5: Exploraciones diagnósticas sobre diversas problemáticas educativasFacultad de Ciencias Exacta

Estudio de los efectos cardioprotectores de plantas medicinales que contienen fitoestrógenos en la isquemia-reperfusión cardíaca de ratas jóvenes y seniles

Este plan estudiará la cardioprotección en modelos de isquemia y reperfusión (I/R) cardíaca de extractos de 3 plantas medicinales que contienen fitoestrógenos (harina de raíz de maca (Lepidium meyenii), hojas de alfalfa (Medicago sativa) y anís (Pimpinella anisum). El estudio evaluará efectos en la contractilidad, la energética y la homeostasis de calcio de corazones aislados de ratas jóvenes de ambos sexos y ratas hembra seniles durante el atontamiento miocárdico moderado y severo producido por I/R, así como efectos in vivo en la presión arterial de las ratas. Para los ensayos ex vivo los corazones aislados se introducirán en un calorímetro de flujo para medir simultáneamente la presión intraventricular y el flujo de calor liberado durante toda la I/R. Se compararán los estudios con un grupo control sin tratar. Con la planta medicinal más activa de las 3 ensayadas se evaluarán los mecanismos subyacentes a la cardioprotección, como la participación mitocondrial in situ y su interacción funcional con el retículo sarcoplásmico y el citosol mediante intervenciones farmacológicas selectivas para los diversos transportadores, y la medición mecánico-calorimétrica continua. La calorimetría permite la evaluación energética continua durante la isquemia y la reperfusión. Algunos mecanismos se estudiarán también mediante los cambios en las concentraciones de calcio en compartimentos citosólico y mitocondrial en cardiomiocitos aislados con fluoróforos y microscopía confocal. El conocimiento permitirá encontrar una fitoterapia preventiva de la disfunción miocárdica ante episodios de isquemia coronaria, y evaluar su utilidad según género y edad. Resultados parciales obtenidos: Medicago sativa no mostró efectos cardioprotectores y fue arritmogénico, tal vez debido a su compleja composición química. Lepidium meyenii tuvo un efecto cardioprotector en I/R servera comparable con Genisteína y que podría ser asociado al contenido de isoflavonas. Este efecto fue mayor en corazones de ratas machos (CRM) que en hembras jóvenes (CRH), ambos superando significativamente al grupo control en la recuperación contráctil post- isquémica (RCPI). Sin embargo el tratamiento generó un aumento en la contractura diastólica (LVEDP), sin modificar la economía muscular en CRM pero sí en CRH. No se encontró modificación del gasto energético en CRM ni en CRH.Universidad Nacional de La Plat

Enseñanza a estudiantes de farmacia de la asignatura electiva: farmacología experimental de plantas medicinales y fitoterapia

La asignatura Farmacología de Plantas Medicinales y Fitoterapia es una materia optativa para la carrera de Farmacia de la Facultad de Ciencias Exactas de la Universidad Nacional de La Plata. En ella se tratan dos aspectos de incumbencia profesional. Uno es el estudio experimental de la farmacología de una planta medicinal en diversos sistemas y sus mecanismos de acción. El segundo aspecto es la enseñanza de la Fitoterapia avalada internacionalmente (indicación, mecanismo de los principios activos, modo de preparación y posología, efectos adversos, precauciones y contraindicaciones, e interacciones de la planta con otros medicamentos). El objetivo de este trabajo es presentar la experiencia desarrollada a lo largo de más de 10 años en la asignatura Farmacología de Plantas Medicinales y Fitoterapia.Eje 5: Exploraciones diagnósticas sobre diversas problemáticas educativasFacultad de Ciencias Exacta

Estudio de los efectos cardioprotectores de plantas medicinales que contienen fitoestrógenos en la isquemia-reperfusión cardíaca de ratas jóvenes y seniles

Este plan estudiará la cardioprotección en modelos de isquemia y reperfusión (I/R) cardíaca de extractos de 3 plantas medicinales que contienen fitoestrógenos (harina de raíz de maca (Lepidium meyenii), hojas de alfalfa (Medicago sativa) y anís (Pimpinella anisum). El estudio evaluará efectos en la contractilidad, la energética y la homeostasis de calcio de corazones aislados de ratas jóvenes de ambos sexos y ratas hembra seniles durante el atontamiento miocárdico moderado y severo producido por I/R, así como efectos in vivo en la presión arterial de las ratas. Para los ensayos ex vivo los corazones aislados se introducirán en un calorímetro de flujo para medir simultáneamente la presión intraventricular y el flujo de calor liberado durante toda la I/R. Se compararán los estudios con un grupo control sin tratar. Con la planta medicinal más activa de las 3 ensayadas se evaluarán los mecanismos subyacentes a la cardioprotección, como la participación mitocondrial in situ y su interacción funcional con el retículo sarcoplásmico y el citosol mediante intervenciones farmacológicas selectivas para los diversos transportadores, y la medición mecánico-calorimétrica continua. La calorimetría permite la evaluación energética continua durante la isquemia y la reperfusión. Algunos mecanismos se estudiarán también mediante los cambios en las concentraciones de calcio en compartimentos citosólico y mitocondrial en cardiomiocitos aislados con fluoróforos y microscopía confocal. El conocimiento permitirá encontrar una fitoterapia preventiva de la disfunción miocárdica ante episodios de isquemia coronaria, y evaluar su utilidad según género y edad. Resultados parciales obtenidos: Medicago sativa no mostró efectos cardioprotectores y fue arritmogénico, tal vez debido a su compleja composición química. Lepidium meyenii tuvo un efecto cardioprotector en I/R servera comparable con Genisteína y que podría ser asociado al contenido de isoflavonas. Este efecto fue mayor en corazones de ratas machos (CRM) que en hembras jóvenes (CRH), ambos superando significativamente al grupo control en la recuperación contráctil post- isquémica (RCPI). Sin embargo el tratamiento generó un aumento en la contractura diastólica (LVEDP), sin modificar la economía muscular en CRM pero sí en CRH. No se encontró modificación del gasto energético en CRM ni en CRH.Universidad Nacional de La Plat