RNA-binding protein immunoprecipitation as a tool to investigate plant miRNA processing interference by regulatory proteins of diverse origin

Background: Due to the nature of viral RNA genomes, RNA viruses depend on many RNA-binding proteins (RBP) of viral and host origin for replication, dissemination and evasion of host RNA degradation pathways. Some viruses interfere with the microRNA (miRNA) pathway to generate better fitness. The development of an adjusted, reliable and sensitive ribonucleoprotein immunoprecipitation (RIP) assay is needed to study the interaction between RBP of different origin (including viral origin) and miRNA precursors. The method could be further applied to transiently expressed heterologous proteins in different plant species. Results: Here we describe a modified RIP assay applied to nuclear epitope-tagged proteins of heterologous origin and transiently expressed in Nicotiana benthamiana. The assay includes a combination of optimized steps as well as the careful selection of control samples and rigorous data analysis. It has proven efficient to detect and quantify miRNA processing intermediates associated with regulatory proteins. Conclusions: The RIP method described here provides a reliable tool to study the interaction of RBPs, such as transiently expressed regulatory proteins with lowly represented host RNA, as is the case of miRNA precursors. This modified method was efficiently adjusted to recover nuclear proteins and reduce unspecific background. The purification scheme optimized here for GFP-tagged proteins can be applied to a wide array of RBPs. The subsequent application of next-generation sequencing technologies will permit to sequence and characterize all RNA species bound in vivo by a given RBP.Fil: Marmisollé, Facundo Ernesto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Garcia, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Reyes Martinez, Carina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; Argentin

El contrato de mediación digital en el marco de la economía colaborativa

Las plataformas intermediarias que actúan en el marco de la economía colaborativa despliegan una actividad esencial para la contratación de un servicio subyacente entre dos sujetos. Presentan interesantes aristas que hacen que se hayan surgido diversas posturas en cuanto a la naturaleza jurídica del servicio que prestan y al contrato que celebran con sus usuarios. En este trabajo presentamos estas corrientes de un modo sistemático y crítico, aportando nuestra punto de vista. A la vez, abordaremos algunas de las obligaciones típicas que asumen estos intermediarios, efectuando un tratamiento de ciertos asuntos que pueden presentarse como polémicos o conflictivos

Photothermal microscopy applied to the characterization of nuclear fuel pellets

The photothermal photodeflection technique is shown to provide information on the homogeneity of fuel pellets, pore distribution, clustering detection of pure urania and gadolinea and to provide a two-dimensional mapping of the thermal diffusivity correlated to the composition of the interdiffused Gadolinium and Uranium oxide. Histograms of the thermal diffusivity distribution become a reliable quantitative way of quantifying the degree of homogeneity and the width of the histogram can be used as a direct measure of the homogeneity. These quantitative measures of the homogeneity of the samples at microscopic levels provides a protocol that can be used as a reliable specification and quality control method for nuclear fuels, substituting with a single test a battery of expensive, time consuming and operator dependent techniques.Fil: Zaldivar Escola, Facundo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ingeniería. Departamento de Física. Laboratorio de Haces Dirigidos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Martinez, Oscar Eduardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Mingolo, Nelida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ingeniería. Departamento de Física. Laboratorio de Haces Dirigidos; ArgentinaFil: Kempf, R.. Comisión Nacional de Energía Atómica; Argentin

Photothermal Microscopy

AbstractAn accessory for a commercial optical microscope was implemented to map the thermal diffusivity of the sample with high spatial resolution. The system is based in the photothermal technique recently developed by the group. It consists in the measurement with a probe laser of the surface curvature induced by the heat delivered by a modulated pump laser. A lock-in detection technique provides the signal amplitude and phase as a function of the modulation frequency. The accessory was mounted on the camera port of a metallographic microscope Olympus BX51. Results obtained on different samples are presented

PAMAM dendrimers as a carbamazepine delivery system for neurodegenerative diseases: A biophysical and nanotoxicological characterization

Carbamazepine (CBZ) is an antiepileptic drug, which also could be used in the treatment of neurodegenerative diseases, such as the Alzheimer's disease. However, its use has been limited due to its low solubility, inefficient pharmacokinetic profiles, and multiple side effects. PAMAM dendrimers, ethylenediamine core, generation 4.0 (amine terminal groups) and 4.5 (carboxylate terminal groups) (DG4.0 and DG4.5 respectively) are polymers that can increase drug solubility through complexation. Thus, the aim of this work was to obtain and characterize complexes between CBZ and dendrimers. Both DG4.0 and DG4.5 allowed the incorporation of ∼20 molecules of CBZ per dendrimer, into their hydrophobic pockets. DG4.0-CBZ and DG4.5-CBZ complexes were found to be stable for 90 days at 37 °C and resistant to a lyophilization process, presenting controlled drug release. Also, the complexes nanotoxicity was tested ex vivo (human red blood cells), in vitro (N2a cell line), and in vivo (zebrafish). No hemolytic effect was observed in the ex vivo model. As regards in vitro toxicity, the DG4.5-CBZ complexes significantly reduced the toxicity caused by the free drug. Moreover, the DG4.5-CBZ did not cause neurotoxicity or cardiotoxicity in zebrafish larvae. In conclusion, a stable and biocompatible drug delivery system based on the DG4.5 capable of complex the CBZ has been developed. This achievement highlights the advantages of using negatively charged dendrimers for nanomedicine.Fil: Igartúa, Daniela. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Biomembranas; ArgentinaFil: Martinez, Carolina Soledad. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Biomembranas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Universidad Nacional de La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular; ArgentinaFil: Temprana, Carlos Facundo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Virologia; ArgentinaFil: Alonso, Silvia del Valle. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Biomembranas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Prieto, Maria Jimena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Biomembranas; Argentin

Estimación de carga muscular mediante imágenes

Un problema de gran interés en disciplinas como la ocupacional, ergonómica y deportiva, es la medición de variables biomecánicas involucradas en el movimiento humano (como las fuerzas musculares internas y torque de articulaciones). Actualmente este problema se resuelve en un proceso de dos pasos. Primero capturando datos con dispositivos poco prácticos, intrusivos y costosos. Luego estos datos son usados como entrada en modelos complejos para obtener las variables biomecánicas como salida. El presente trabajo representa una alternativa automatizada, no intrusiva y económica al primer paso, proponiendo la captura de estos datos a través de imágenes. En trabajos futuros la idea es automatizar todo el proceso de cálculo de esas variables.Sociedad Argentina de Informática e Investigación Operativa (SADIO

Estimación de carga muscular mediante imágenes

Un problema de gran interés en disciplinas como la ocupacional, ergonómica y deportiva, es la medición de variables biomecánicas involucradas en el movimiento humano (como las fuerzas musculares internas y torque de articulaciones). Actualmente este problema se resuelve en un proceso de dos pasos. Primero capturando datos con dispositivos poco prácticos, intrusivos y costosos. Luego estos datos son usados como entrada en modelos complejos para obtener las variables biomecánicas como salida. El presente trabajo representa una alternativa automatizada, no intrusiva y económica al primer paso, proponiendo la captura de estos datos a través de imágenes. En trabajos futuros la idea es automatizar todo el proceso de cálculo de esas variables.Sociedad Argentina de Informática e Investigación Operativa (SADIO

PAMAM dendrimers as a carbamazepine delivery system for neurodegenerative diseases : A biophysical and nanotoxicological characterization

Carbamazepine (CBZ) is an antiepileptic drug, which also could be used in the treatment of neurodegenerative diseases, such as the Alzheimer's disease. However, its use has been limited due to its low solubility, inefficient pharmacokinetic profiles, and multiple side effects. PAMAM dendrimers, ethylenediamine core, generation 4.0 (amine terminal groups) and 4.5 (carboxylate terminal groups) (DG4.0 and DG4.5 respectively) are polymers that can increase drug solubility through complexation. Thus, the aim of this work was to obtain and characterize complexes between CBZ and dendrimers. Both DG4.0 and DG4.5 allowed the incorporation of ∼20 molecules of CBZ per dendrimer, into their hydrophobic pockets. DG4.0-CBZ and DG4.5-CBZ complexes were found to be stable for 90 days at 37 °C and resistant to a lyophilization process, presenting controlled drug release. Also, the complexes nanotoxicity was tested ex vivo (human red blood cells), in vitro (N2a cell line), and in vivo (zebrafish). No hemolytic effect was observed in the ex vivo model. As regards in vitro toxicity, the DG4.5-CBZ complexes significantly reduced the toxicity caused by the free drug. Moreover, the DG4.5-CBZ did not cause neurotoxicity or cardiotoxicity in zebrafish larvae. In conclusion, a stable and biocompatible drug delivery system based on the DG4.5 capable of complex the CBZ has been developed. This achievement highlights the advantages of using negatively charged dendrimers for nanomedicine.Instituto Multidisciplinario de Biología Celula

Comunicación interna como fuente del desarrollo organizacional

El objetivo de la presente investigación es analizar la comunicación interna como herramienta estratégica de gestión en el desarrollo organizacional, generando ventajas y cambios competitivos que encaminan la obtención del éxito organizacional. El presente estudio aborda los conceptos que profundiza la comunicación interna y el desarrollo organizacional, para facilitar la estructura y la toma de decisiones empresariales. En la sociedad moderna en que vivimos, los cambios son constantes, por lo que representan un verdadero desafío para las organizaciones, que se ven forzadas a pugnar dentro de un entorno cambiante cuya dinámica está normalizada principalmente por el progreso aligerado de la ciencia y la tecnología. La clave de un acertado desarrollo organizacional está en las personas que participan en ella, es ahí donde juega un papel muy importante la comunicación. Por otro lado, la metodología aplicada en este estudio fueron las siguientes fases: Primero la definición del problema, segundo la búsqueda de la información en los repositorios de diversas universidades, google académico y páginas web, tercero la organización de la información para lo cual todos los documentos digitales como los libros, revistas, tesis, etc. se guardaron en Mendeley Desktop que es un Software de apoyo en la gestión documental, y por último el análisis de la información donde relacionamos las ideas más importantes y conceptos claves. (Gómez, Fernando, Aponte & Betancourt, 2014)TARAPOTOEscuela Profesional de AdministraciónTalento Human