Detección del virus del oeste del Nilo en dos localidades con antecedentes de enfermedad neurológica en equinos: determinación molecular en aves y mosquitos y serología en humanos, aves y equinos

El virus de Oeste del Nilo (WNV por sus siglas en inglés) es un miembro de la familia Flaviviridae. Su ciclo natural involucra la transmisión entre aves y mosquitos. Las aves son los hospederos y diseminadores del patógeno (reservorios). Éstas presentan viremias altas lo que permite que sea transmitido a los mosquitos, especialmente a los del género Culex. Ocasionalmente, se presentan brotes en seres humanos y equinos (hospederos accidentales) causando desde cuadros leves (dolor de cabeza y fiebre) hasta cuadros más graves, los cuales presentan sintomatología nerviosa y pueden ser fatales. En este estudio se realizó un análisis exhaustivo de los posibles involucrados tanto en el ciclo enzoótico como epizoótico, detectando molecularmente (RT-PCR) la presencia del virus en mosquitos y aves; y serológicamente (PRNT) la presencia de anticuerpos neutralizantes en aves, seres humanos y equinos en dos zonas con antecedentes de enfermedad neurológica equina en Costa Rica. Las muestras se tomaron en época seca y lluviosa para evidenciar eventos de seroconversión. La primera zona fue Cuajiniquil, en esta localidad se analizaron un total de 86 sueros de equino y 16 sueros de seres humanos en la época lluviosa. En la época seca, se obtuvo una muestra pareada respecto al primer muestreo de 57 sueros de equinos y 12 humanos. Asimismo, se obtuvo un total de 49 sueros de aves silvestres y 32 sueros de gallinas domésticas. Además, se analizaron 52 muestras de tejidos de aves y 554 mosquitos agrupados en 163 pooles y 12 hembras grávidas. Las muestras fueron colectadas entre julio 2017-abril 2018. Los resultados muestran que 21 (24.42%) de los equinos, 1 (5.2%) de los humanos, 1 (2.04%) ave silvestre y 1 (3.13%) gallina doméstica presentaron anticuerpos neutralizantes contra WNV. Además, un equino que resultó negativo en la primera muestra presentó altos títulos en el segundo muestreo, evidenciando un evento de seroconversión. En esta zona no se detectó molecularmente el virus en ninguna de las muestras colectadas. Este resultado contrasta con la zona de Talamanca donde no se logró obtener evidencia ni serológica ni molecular de la circulación de WNV, pero sí se evidenció la presencia del virus de SLEV (Saint Louis Encephalitis virus), otro miembro de la familia de los Flavivirus que presenta un ciclo de trasmisión similar al de WNV. Las muestras para esta zona fueron colectadas entre julio – noviembre 2018. Un total de 20 sueros equinos, 17 de seres humanos (16 equinos y 15 seres humanos con muestra pareada), 79 sueros de aves silvestres y 7 sueros de gallinas domésticas fueron colectados. Además, molecularmente se analizaron 88 aves silvestres, 819 mosquitos agrupados en 199 pooles y 22 hembras grávidas. Tanto en seres humanos (n=2, 11.76%), equinos (n=1, 5%) y aves silvestres (n=2, 2.5%) se encontró evidencia serológica de una infección previa con SLEV. Los hallazgos de este trabajo evidencian la circulación de WNV en el área de Cuajiniquil y de SLEV en el área de Talamanca. Este es el primer estudio exhaustivo que reporta la presencia de anticuerpos neutralizantes contra SLEV y WNV en seres humanos, equinos y aves en Costa Rica, lo que indica que existe circulación de estos virus en las zonas de estudio. Esta información reafirma la dificultad del diagnóstico de enfermedades febriles en humanos y animales cuando no se cuenta con información epidemiológica de los virus que circulan en el país, e insta a las autoridades de salud a tomar acciones provisorias y de control ante posibles brotes de estos dos virus. Además, reafirma la importancia de una asertiva comunicación entre los sectores veterinarios y de salud humana en el contexto de “Una Salud” de manera que permita tomar acciones conjuntas.UCR::Vicerrectoría de Investigación::Sistema de Estudios de Posgrado::Salud::Maestría Académica en Microbiología con énfasis en Virologí

Caracterización de la diversidad genética de Brucella ceti aisladas en la costa del Pacífico de Costa Rica, mediante secuenciación de nueve genes seleccionados

Trece aislamientos bacterianos provenientes de delfines Stenella coeruleoalba encallados en la costa Pacífica de Costa Rica, fueron sometidos a caracterización bioquímica e identificados como Brucella ceti. Los mismos fueron genotipificados mediante tres diferentes procedimientos: MLST, un PCR multiplex (Bruce-ladder) para identificación de especies de Brucella y un PCR convencional para identificar diferentes cepas marinas de Brucella. Por medio del MLST se comprobó que los aislamientos pertenecen al ST26, al igual que aislamientos previamente reportados del Atlántico. Adicionalmente, los aislamientos costarricenses presentaron SNP´s no reportados antes. Por su parte, el Bruce-ladder dio como resultado un patrón de bandas similar al presentado por las cepas del Atlántico. Por último el PCR convencional mostró que ninguno de los aislamientos costarricenses presenta el patrón esperado siendo el aislamiento 5 el que presentó la mayor diferencia. Por lo tanto los aislamientos del Pacifico aunque similares, no presentan las mismas características genotípicas que los del Atlántico, lo que genera la hipótesis de la existencia de variabilidad específica restringida geográficamente en B. ceti. Debido a su poder de resolución, las técnicas moleculares de genotipeo bacteriano son un buen complemento de las técnicas tradicionales de identificación, capaces de distinguir diferencias sutiles entre poblaciones bacterianas. Son por lo tanto una excelente herramienta para la vigilancia epidemiológica.Thirteen bacterial isolates from striped dolphins (Stenella coeruleoalba) stranded on the Pacific coast of Costa Rica were subjected to biochemical characterization, and identified as Brucella ceti. They were genotyped by three different procedures: MLST, a multiplex PCR (Bruce-ladder) to identify the Brucella species, and a common PCR to identify different marine strains of Brucella. The MLST analysis indicated that the isolates belong to ST26, the same as isolates from the Atlantic Ocean. In addition, Costa Rican isolates from the Pacific Ocean show SNPs that have not been previously reported. In the Bruce-ladder analysis the Costa Rican isolates showed the same band pattern as the Atlantic ones. Finally, the conventional PCR showed that the Costa Rican strains from the Pacific Ocean had a completely different pattern, with isolate 5 being the most distinct. Therefore the Pacific isolates belong to the same MLST group as Atlantic isolates, but present unique genotype characteristics, leading to the hypothesis of the existence of geographically specific variability in B. ceti. Due to their power of resolution, molecular techniques for genotyping bacteria are a good complement to traditional identification techniques, and are able to distinguish subtle differences between bacterial populations. They are therefore an excellent tool for epidemiological surveillance.Escuela de Medicina Veterinari

Seroprevalence and molecular characterization of ferlavirus in captive vipers of Costa Rica

Abstract: Ferlaviruses (FV, previously referred to as ophidian paramyxoviruses, OPMV), are enveloped viruses with a negative-strand RNA genome, affecting snakes in captivity worldwide. Infection is characterized by respiratory and nervous clinical signs and carries high mortality rates, but no specific treatment or vaccine is currently available. Costa Rica has 16 species of vipers, found in captivity in collections essential for antivenom production, reintroduction, and public education. FV circulation in these populations was previously unknown, and the risk of introducing the viruses into naïve collections or free-ranging populations exists if the virus's presence is confirmed. The objective of this study was to determine seroprevalence and FV shedding in 150 samples from captive vipers in nine collections across Costa Rica. A hemagglutination inhibition (HI) assay was performed to determine the antibody titer against two Ferlavirus strains, Bush viper virus (BV) and Neotropical virus (NT), and reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and sequencing to determine virus secretion in cloacal swabs. Ferlavirus strains were replicated in Vero cells, and chicken anti-FV polyclonal antibodies were produced and used as a positive control serum for the HI. Results demonstrate that seroprevalence of anti-FV antibodies in viper serum was 26.6% (n=40) for the BV strain and 30% (n=45) for the NT strain in the population tested. Furthermore, molecular characterization of FV group A was possible by sequencing the virus recovered from three cloacal swabs, demonstrating circulation of FV in one collection. This study demonstrates for the first time serological evidence of FV exposure and infection in vipers in captivity in Costa Rica, and suggests cross reactivity between antibodies against both strains. Appropriate biosafety measures could prevent the spread of FV between and within collections of reptiles in the country.Resumen: Los ferlavirus (FV, anteriormente denominados paramixovirus ofidio, OPMV), son virus con envoltura y genoma de ARN de cadena negativa, que afectan a las serpientes en cautividad en todo el mundo. La infección se caracteriza por signos clínicos respiratorios y nerviosos y conlleva altas tasas de mortalidad, pero en la actualidad no se dispone de ningún tratamiento ni vacuna específicos. Costa Rica cuenta con 16 especies de víboras, que se encuentran en cautividad en colecciones esenciales para la producción de antivenenos, la reintroducción y la educación pública. Hasta ahora se desconocía la circulación del VF en estas poblaciones, y existe el riesgo de introducir el virus en colecciones ingenuas o en poblaciones en libertad si se confirma su presencia. El objetivo de este estudio era determinar la seroprevalencia y la difusión del VF en 150 muestras de víboras cautivas de nueve colecciones de Costa Rica. Se realizó un ensayo de inhibición de la hemaglutinación (IH) para determinar el título de anticuerpos contra dos cepas de ferlavirus, el virus de la víbora de Bush (BV) y el virus neotropical (NT), y la reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa (RT-PCR) y la secuenciación para determinar la secreción del virus en hisopos cloacales. Las cepas de ferlavirus se replicaron en células Vero, y se produjeron anticuerpos policlonales anti-VF de pollo que se utilizaron como suero de control positivo para el IH. Los resultados demuestran que la seroprevalencia de los anticuerpos anti-FV en el suero de la víbora fue del 26,6% (n=40) para la cepa BV y del 30% (n=45) para la cepa NT en la población analizada. Además, fue posible la caracterización molecular del grupo A del VF mediante la secuenciación del virus recuperado de tres hisopos cloacales, lo que demostró la circulación del VF en una colección. Este estudio demuestra por primera vez la evidencia serológica de la exposición al VF y la infección en víboras en cautividad en Costa Rica, y sugiere la reactividad cruzada entre los anticuerpos contra ambas cepas. Unas medidas de bioseguridad adecuadas podrían evitar la propagación del VF entre y dentro de las colecciones de reptiles del país.Escuela de Medicina Veterinari

Caracterización molecular de dos brotes de distemper canino en animales de vida silvestre en Costa Rica

Suplemento XXII Congreso Nacional de Medicina Veterinaria, Costa Rica, 2017El virus del distemper canino (CDV), es el causante de una importante enfermedad infecciosa que afecta perros, cánidos de vida silvestre y otros carnívoros. Es altamente patógeno, pertenece al género Morbillivirus, familia Paramyxoviridae; posee un ARN de polaridad negativa que codifica para seis proteínas mayores. La hemaglutinina (H) y la proteína de fusión (F) son las responsables de la unión y fusión con la célula. El gen H tiene la mayor variabilidad en todo el genoma, este gen se utiliza para clasificar las diferentes cepas virales. El virus causa problemas respiratorios, gastrointestinales y neurológicos en caninos de diferentes edades. En los últimos años se ha reportado un aumento de los casos de CDV en animales tanto de vida silvestre, así como en animales domésticos con y sin esquema completo de vacunación.Canine distemper virus (CDV) is the cause of an important infectious disease affecting dogs, wild canids and other carnivores. It is highly pathogenic, belongs to the genus Morbillivirus, family Paramyxoviridae; it possesses a negative polarity RNA that codes for six major proteins. Hemagglutinin (H) and fusion protein (F) are responsible for binding and fusion with the cell. The H gene has the highest variability in the entire genome, this gene is used to classify the different viral strains. The virus causes respiratory, gastrointestinal and neurological problems in canines of different ages. In recent years, an increase in CDV cases has been reported in wildlife animals as well as in domestic animals with and without a complete vaccination schedule.Escuela de Medicina Veterinari

The Impact of Deforestation, Urbanization, and Changing Land Use Patterns on the Ecology of Mosquito and Tick-Borne Diseases in Central America

Central America is a unique geographical region that connects North and South America, enclosed by the Caribbean Sea to the East, and the Pacific Ocean to the West. This region, encom- passing Belize, Costa Rica, Guatemala, El Salvador, Honduras, Panama, and Nicaragua, is highly vulnerable to the emergence or resurgence of mosquito-borne and tick-borne diseases due to a com- bination of key ecological and socioeconomic determinants acting together, often in a synergistic fashion. Of particular interest are the effects of land use changes, such as deforestation-driven ur- banization and forest degradation, on the incidence and prevalence of these diseases, which are not well understood. In recent years, parts of Central America have experienced social and economic improvements; however, the region still faces major challenges in developing effective strategies and significant investments in public health infrastructure to prevent and control these diseases. In this article, we review the current knowledge and potential impacts of deforestation, urbanization, and other land use changes on mosquito-borne and tick-borne disease transmission in Central America and how these anthropogenic drivers could affect the risk for disease emergence and resurgence in the region. These issues are addressed in the context of other interconnected environmental and social challenges.Centroamérica es una región geográfica única que conecta Norteamérica y Sudamérica, delimitada por el mar Caribe al este y el océano Pacífico al oeste. Esta región, que abarca Belice, Costa Rica, Guatemala, El Salvador, Honduras, Panamá y Nicaragua, es muy vulnerable a la aparición o resurgimiento de enfermedades transmitidas por mosquitos y garrapatas debido a una combinación de determinantes ecológicos y socioeconómicos clave que actúan conjuntamente, a menudo de forma sinérgica. De particular interés son los efectos de los cambios en el uso de la tierra, como la deforestación y la degradación de los bosques, sobre la incidencia y prevalencia de estas enfermedades, que no se conocen bien. En los últimos años, algunas partes de Centroamérica han experimentado mejoras sociales y económicas; sin embargo, la región aún se enfrenta a grandes retos para desarrollar estrategias eficaces e inversiones significativas en infraestructuras de salud pública para prevenir y controlar estas enfermedades. En este artículo, revisamos el conocimiento actual y los impactos potenciales de la deforestación, la urbanización y otros cambios en el uso de la tierra sobre la transmisión de enfermedades transmitidas por mosquitos y garrapatas en América Central y cómo estos factores antropogénicos podrían afectar el riesgo de aparición y resurgimiento de enfermedades en la región. Estas cuestiones se abordan en el contexto de otros retos medioambientales y sociales interconectados.Universidad Nacional, Costa Rica.Escuela de Medicina Veterinari

Reporte de influenza canina en Costa Rica

Suplemento XXII Congreso Nacional de Medicina Veterinaria, Costa Rica 2017Influenza canina causada por H3N8 fue descrita en 2004 en los Estados Unidos en Greyhounds. El agente etiológico es un mutante del virus de la influenza equina, H3N8. Posteriormente se describieron casos de influenza canina en Corea del Sur y China causados por un virus H3N2 de origen aviar; este virus causó brotes severos en Miami en el 2015. Las infecciones con influenza virus H3 en perros pueden ser subclínicas, con cuadros clínicos moderados o bien pueden evolucionar con cuadros severos de neumonía hemorrágica. El objetivo del presente reporte es describir la presentación de casos de influenza canina en Costa Rica en el período comprendido entre el 2012 y el 2016.Canine influenza caused by H3N8 was described in 2004 in the United States in Greyhounds. The etiologic agent is a mutant of the equine influenza virus, H3N8. Cases of canine influenza were subsequently described in South Korea and China caused by an H3N2 virus of avian origin; this virus caused severe outbreaks in Miami in 2015. Infections with H3 influenza virus in dogs can be subclinical, with mild clinical signs or can progress to severe hemorrhagic pneumonia. The objective of this report is to describe the presentation of canine influenza cases in Costa Rica from 2012 to 2016.Escuela de Medicina Veterinari

The Impact of Deforestation, Urbanization, and Changing Land Use Patterns on the Ecology of Mosquito and Tick-Borne Diseases in Central America

Central America is a unique geographical region that connects North and South America, enclosed by the Caribbean Sea to the East, and the Pacific Ocean to the West. This region, encompassing Belize, Costa Rica, Guatemala, El Salvador, Honduras, Panama, and Nicaragua, is highly vulnerable to the emergence or resurgence of mosquito-borne and tick-borne diseases due to a combination of key ecological and socioeconomic determinants acting together, often in a synergistic fashion. Of particular interest are the effects of land use changes, such as deforestation-driven urbanization and forest degradation, on the incidence and prevalence of these diseases, which are not well understood. In recent years, parts of Central America have experienced social and economic improvements; however, the region still faces major challenges in developing effective strategies and significant investments in public health infrastructure to prevent and control these diseases. In this article, we review the current knowledge and potential impacts of deforestation, urbanization, and other land use changes on mosquito-borne and tick-borne disease transmission in Central America and how these anthropogenic drivers could affect the risk for disease emergence and resurgence in the region. These issues are addressed in the context of other interconnected environmental and social challenges.Universidad de Costa Rica/[803-B9-779]/UCR/Costa RicaUniversidad de Costa Rica/[437-B9-778]/UCR/Costa RicaUCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias de la Salud::Centro de Investigación en Enfermedades Tropicales (CIET)UCR::Vicerrectoría de Docencia::Salud::Facultad de Microbiologí

Baylisascaris procyonis, a nematode in urban raccoons and emerging zoonotic agent to be considered as a differential diagnosis of larva migrans in Costa Rica. Review.

Resumen: El ascaridio Baylisascaris procyonis es un agente parasitario de importancia para la salud pública, siendo su huésped definitivo el mapache común (Procyon lotor). Un nuevo informe alerta sobre la presencia de estas lombrices en poblaciones de mapaches en la zona urbana de Costa Rica, y hace énfasis en la necesidad de conocer más sobre este parásito, su ciclo de vida y cómo prevenir su transmisión en humanos y animales domésticos. Esta comunicación es una breve revisión sobre los aspectos más importantes de este nematodo y sus efectos negativos en la salud animal y pública. Además, se hace hincapié en los mejores métodos de diagnóstico etiológico y los más apropiados para animales domésticos, así como el tratamiento y la prevención en perros. El presente artículo pretende formar conciencia en los trabajadores de la salud pública y animal sobre la necesidad de tomar el Bayliascaris procyonis dentro de su diagnóstico diferencial de larvas migrantes en Costa Rica.Abstract: The zoonotic helminth Baylisacaris procyonis is a parasite in urban raccoons (Procyon lotor) of increasing public health concern. A new report alerts about the presence of these roundworms in urban raccoon populations in Costa Rica stressing the need to understand the parasite, its life cycle and preventive measures to avoid transmission to humans and pets. This is a brief review of the most remarkable features of this parasite and its negative effects on animal and public health. Additionally, emphasis is given on the best and most appropriate etiologic diagnostic methods in domestic animals, as well as treatment and prevention in dogs. This article is meant to raise awareness in public and animal health caretakers to consider Bayliascaris procyonis as differential diagnosis for larva migrans in Costa Rica.Fondo Institucional de Desarrollo Académico-2013-Universidad Nacional- Universidad de Costa Rica, Fondo del SistemaConsejo Nacional de Rectores (ACUERDO-VI-167-2013).Escuela de Medicina Veterinari

Serosurvey of nonhuman primates in Costa Rica at the human–wildlife interface reveals high exposure to flaviviruses

Acknowledgments: We are grateful to all contributors who assisted with sampling endeavors. We would also like to thank the National System of Conservation Areas (SINAC) and the Ministry of Environment and Energy (MINAE) of Costa Rica. We thank the Arbovirus Reference Collection (ARC) from the Centers for Disease Control and Prevention, National Center for Emerging and Zoonotic Infectious Diseases, Division of Vector-Borne Diseases, Arboviral Diseases Branch, Diagnostic and Reference Team, Reference and Reagent Laboratory, and Sanofi Pasteur for supplying the chimeric virusesArthropod-borne viruses belonging to the flavivirus genus possess an enormous relevance in public health. Neotropical non-human primates (NPs) have been proposed to be susceptible to flavivirus infections due to their arboreal and diurnal habits, their genetic similarity to humans, and their relative closeness to humans. However, the only known flavivirus in the American continent maintained by sylvatic cycles involving NPs is yellow fever virus (YFV), and NPs’ role as potential hosts of other flaviviruses is still unknown. Here, we examined flavivirus exposure in 86 serum samples including 83.7% samples from free-range and 16.3% from captive NPs living in flavivirus- endemic regions of Costa Rica. Serum samples were opportunistically collected throughout Costa Rica in 2000–2015. We used a highly specific micro-plaque reduction neutralization test (micro-PRNT) to determine the presence of antibodies against YFV, dengue virus 1–4 (DENV), Zika virus, West Nile virus (WNV), and Saint Louis encephalitis virus (SLEV). We found evidence of seropositive NPs with homotypic reactivity to SLEV 11.6% (10/86), DENV 10.5% (9/86), and WNV 2.3% (2/86). Heterotypic reactivity was determined in 3.5% (3/86) of individuals against DENV, 1.2% (1/86) against SLEV, and 1.2% (1/86) against WNV. We found that 13.9% (12/86) of NPs were positive for an undetermined flavivirus species. No antibodies against DENV-3, DENV-4, YFV, or ZIKV were found. This work provides compelling serological evidence of flavivirus exposure in Costa Rican NPs, in particular to DENV, SLEV, and WNV. The range of years of sampling and the region from where positives were detected coincide with those in which peaks of DENV in human populations were registered, suggesting bidirectional exposure due to human–wildlife contact or bridging vectors. Our work suggests the continuous exposure of wildlife populations to various flaviviruses of public health importance and underscores the necessity of further surveillance of flaviviruses at the human–wildlife interface in Central America.Los virus transmitidos por artrópodos pertenecientes al género flavivirus tienen una enorme relevancia en la salud pública. Se ha propuesto que los primates neotropicales no humanos (PN) sean susceptibles a flavivirus debido a sus hábitos arborícolas y diurnos, a su similitud genética con los seres humanos y a su relativa cercanía con ellos. su relativa cercanía a los humanos. Sin embargo, el único flavivirus conocido en el continente americano de la fiebre amarilla es el único flavivirus conocido en el continente americano que se mantiene mediante ciclos silvícolas en los que participan los PN, y el papel de los PN como posibles de otros flavivirus es aún desconocido. Aquí examinamos la exposición a flavivirus en 86 muestras de suero suero, incluyendo un 83,7% de muestras de PN en libertad y un 16,3% de PN en cautividad que viven en regiones endémicas de flavivirus en Costa Rica. de flavivirus en regiones endémicas de Costa Rica. Las muestras de suero se recogieron de forma oportunista en toda Costa Rica en 2000-2015. Se utilizó una prueba de neutralización por reducción de microplaca altamente específica (micro-PRNT) para determinar la presencia de anticuerpos contra el YFV, el virus del dengue 1-4 (DENV), el virus del Zika, el virus del Nilo Occidental (WNV) y el virus de la encefalitis de San Luis (SLEV). Encontramos pruebas de PN seropositivas con reactividad homotípica al SLEV 11,6% (10/86), al DENV 10,5% (9/86) y al WNV 2,3% (2/86). La reactividad heterotípica heterotípica se determinó en el 3,5% (3/86) de los individuos contra el DENV, el 1,2% (1/86) contra el SLEV y el 1,2% (1/86) contra el VN. El 13,9% (12/86) de los PN fueron positivos para una especie indeterminada de especie indeterminada de flavivirus. No se encontraron anticuerpos contra el DENV-3, el DENV-4, el YFV o el ZIKV. Este trabajo proporciona pruebas serológicas convincentes de la exposición a flavivirus en los PN de Costa Rica, en particular a DENV, SLEV y WNV. El rango de años de muestreo y la región de donde se detectaron los positivos fueron detectados coinciden con aquellos en los que se registraron picos de DENV en poblaciones humanas, lo que sugiere una exposición bidireccional debida al contacto entre humanos y animales salvajes o a vectores puente. Nuestro trabajo Nuestro trabajo sugiere la exposición continua de las poblaciones silvestres a diversos flavivirus de importancia para la salud pública y subraya la necesidad de de salud pública y subraya la necesidad de una mayor vigilancia de los flavivirus en la interfaz hombre-vida silvestre en Centroamérica. en la interfaz hombre-vida silvestre en Centroamérica.Escuela de Medicina Veterinari

Serological positivity against selected Flaviviruses and Alphaviruses in free-ranging bats and birds from Costa Rica evidence exposure to Arboviruses Seldom reported locally in humans

Abstract: Arboviruses have two ecological transmission cycles: sylvatic and urban. For some, the sylvatic cycle has not been thoroughly described in America. To study the role of wildlife in a putative sylvatic cycle, we sampled free-ranging bats and birds in two arbovirus endemic locations and analyzed them using molecular, serological, and histological methods. No current infection was detected, and no significant arbovirus-associated histological changes were observed. Neutralizing antibodies were detected against selected arboviruses. In bats, positivity in 34.95% for DENV-1, 16.26% for DENV-2, 5.69% for DENV-3, 4.87% for DENV-4, 2.43% for WNV, 4.87% for SLEV, 0.81% for YFV, 7.31% for EEEV, and 0.81% for VEEV was found. Antibodies against ZIKV were not detected. In birds, PRNT results were positive against WNV in 0.80%, SLEV in 5.64%, EEEV in 8.4%, and VEEV in 5.63%. An additional retrospective PRNT analysis was performed using bat samples from three additional DENV endemic sites resulting in a 3.27% prevalence for WNV and 1.63% for SLEV. Interestingly, one sample resulted unequivocally WNV positive confirmed by serum titration. These results suggest that free-ranging bats and birds are exposed to not currently reported hyperendemic-human infecting Flavivirus and Alphavirus; however, their role as reservoirs or hosts is still undetermined.Los arbovirus tienen dos ciclos ecológicos de transmisión: el silvático y el urbano. Para algunos, el ciclo selvático no se ha descrito a fondo en América. Para estudiar el papel de la fauna Para estudiar el papel de la fauna silvestre en un supuesto ciclo silvático, tomamos muestras de murciélagos y aves en libertad en dos lugares donde el arbovirus es endémico y las analizamos mediante técnicas moleculares, serológicas y biológicas. y los analizamos mediante métodos moleculares, serológicos e histológicos. No se detectó y no se observaron cambios histológicos significativos asociados al arbovirus. Se detectaron anticuerpos neutralizantes Se detectaron anticuerpos neutralizantes contra determinados arbovirus. En los murciélagos, positividad en el 34,95% para el DENV-1, 16,26% para DENV-2, 5,69% para DENV-3, 4,87% para DENV-4, 2,43% para WNV, 4,87% para SLEV, 0,81% para YFV, 7,31% para EEEV y 0,81% para VEEV. No se detectaron anticuerpos contra el ZIKV. ZIKV. En las aves, los resultados de la PRNT fueron positivos contra el VNO en el 0,80%, el SLEV en el 5,64%, el EEEV en el 8,4% y el VEEV en el 7,31%. 8,4% y VEEV en el 5,63%. Se realizó otro análisis retrospectivo de PRNT con muestras de murciélagos de murciélagos de otros tres sitios endémicos de DENV, que dio como resultado una prevalencia del 3,27% de WNV y del 1,63% de SLEV. 1,63% para SLEV. Curiosamente, una muestra resultó inequívocamente positiva para el VNO, lo que se confirmó mediante titulación sérica. suero. Estos resultados sugieren que los murciélagos y las aves que viven en libertad están expuestos a FLEV infecciosos para el ser humano que no se han descrito en la actualidad. Flavivirus y Alphavirus que infectan a seres humanos y que no son hiperendémicos. aún indeterminadoUniversidad Nacional, Costa RicaEscuela de Medicina Veterinari