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    Estudio de la fecundación "in vitro" en porcino : reducción de la poliespermia y optimización de la producción "in vitro" de embriones

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    En los últimos años se han logrado progresos considerables en el desarrollo de los procedimientos de MIV, FIV y cultivo embrionario. Aunque los sistemas de producción in vitro disponibles son aptos para la generación de embriones porcinos, sigue sin resolverse el problema de la elevada poliespermia y de la baja capacidad de desarrollo de los embriones porcinos. El presente trabajo se llevó a cabo con el objetivo de reducir la poliespermia e incrementar el desarrollo embrionario preimplantacional, mejorando de este modo el rendimiento de la técnica de producción in vitro establecida en nuestro laboratorio. Para alcanzar este objetivo, se incoroporaron una serie de modificaciones a nuestro sistema de producción de embriones, abarcando todas las fases que constituyen la técnica: MIV, FIV y cultivo embrionario. El medio de MIV fue modificado, complementándolo con EGF o FPF. La adición de EGF permitió mejorar la maduración citoplasmática de los ovocitos, la monospermia y el desarrollo embrionario. Posteriormente, se valoró la modificación de tres de los principales componentes del sistema de FIV: el medio de fecundación, la concentración espermática y el método de cocultivo de los ovocitos con los espermatozoides. La combinación de medio de fecundación TBMm y de concentración espermática de 1x10(6) espermatozoides. La combinación de medio de fecundación TBMm y de concentración espermática de 1x10(6) espermatozoides/mL fue con la que se logró un mejor equilibrio entre el porcentaje de penetración y el de poliespermia. Además, la incorporación del método de cocultivo en dos pasos dio lugar a una notable reducción en la tasa de poliespermia. Finalmente, se evaluó la complementación del medio de cultivo de embriones con aminoácidos esenciales y no esenciales y la reducción del volumen de cultivo, lográndose con estas dos modificaciones incrementar en el desarrollo embrionario. Gracias al conjunto de las modificaciones incorporadas a nuestro sistema inicial de producción in vitro de embriones se consiguió mejorar de manera global el rendimiento de la técnica. De este modo, la maduración citoplasmática, valorada como el porcentaje de formación de pronúcleo masculino, se vió incrementada de un 73,6% a un 93,6%; el porcentaje inicial de penetración aumentó de un 53,2% a un 66,6%; la poliespermia se redujo de un 47,4% a un 36,2%; y el desarrollo embrionario hasta el estadio de blastocisto mejoró desde un porcentaje del 1% hasta el 28,9%. Los resultados obtenidos confirman que el limitado desarrollo hasta blastocisto de los embriones porcinos producidos in vitro no se debe a un fallo puntual en la técnica, sino a la combinación de una maduración citoplasmática inadecuada o incompleta, una elevada poliespermia, una formulación inadecuada de los medios de cultivos y unas condiciones de cultivo embrionario subóptimas. El incremento en el rendimiento final de la técnica que hemos alcanzado nos permitirá disponer de un mayor número de embriones así como de ovocitos maduros, para ser empleados en futuros estudio

    Impacto de la implicación familiar y de otros accionistas de referencia en la creación de valor

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    Este trabajo explora el efecto de diferentes combinaciones de propiedad e implicación familiar sobre la creación de valor en la empresa familiar. El estudio emplea una amplia muestra de empresas cotizadas, de quince países pertenecientes a la Unión Europea, para el periodo 2004-05. Los resultados muestran que cuando la familia participa en la propiedad y en el consejo de administración se crea valor. Igualmente, se comprueba que las empresas gestionadas por descendientes del fundador destruyen valor, mientras que el que el fundador dirija la empresa no tiene un efecto significativo sobre la creación de valor. Por último, la presencia como accionistas de referencia de inversores institucionales potencia la creación de valor, mientras que la de otras empresas lo destruye. ABSTRACT This study explores the effects of different levels of family ownership and involvement on family firms' value. The sample used was built from an international database (Bureau Van Dijk) with listed firms from 15 European Union countries for the period 2004-05. Results show that family who sits in the board creates value. On the other hand, those family firms managed by a founder-descendant destroy firm value, while no significant effect was found for founder managed firms. Finally, the existence of other blockholders jointly with the family ownership moderates the relationship between family firm and performance: mutual and pension funds contribute to create value, whereas other companies as the second blockholders destroy value

    DNA integrity and viability of testicular cells from diverse wild species after slow freezing or vitrification

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    Introduction and objectiveCryopreservation of testicular tissues offers new possibilities to protect endangered species, genetically valuable individuals or even the fertility potential of prepubertal individuals who have died unexpectedly. However, the use of this technique still remains a challenge. In this study, slow freezing and vitrification of testicular tissue was investigated to find out which cryopreservation method could better preserve the viability and DNA integrity of testicular germ cells in diverse wild species.MethodsTestes were obtained post-mortem from 18 artiodactyls (wild boar, roe deer, dwarf goat, mhor gazelle, European mouflon, African forest buffalo, Malayan tapir, dorcas gazelle, Iberian ibex, gnu, red river hog), 5 primates (colobus monkey, capuchin monkey, mandrill), 8 carnivores (gray wolf, Persian leopard, binturong, European mink, American black bear, suricata), and 2 rodents (Patagonian mara). The testicles belonged to adult individuals and were cut into small pieces and cryopreserved by needle immersed vitrification or uncontrolled slow freezing using a passive cooling device. After warming or thawing, testicular tissues were enzymatically digested and two germ cell types were differentiated based on their morphology: rounded cells (spermatogonia, spermatocytes, and early spermatids) and elongated cells (elongated spermatids and spermatozoa). Cell viability was assessed by SYBR-14/propidium iodide while DNA fragmentation by TUNEL assay with fluorescence microscope.Results and discussionOur preliminary results revealed that our uncontrolled slow freezing method better preserved the viability and DNA integrity of elongated cells than vitrification. Such trend was observed in all species, being significant in artiodactyls, carnivores, and primates. Similarly, the viability and DNA integrity of rounded cells was also better maintained in primates by uncontrolled slow freezing, while in carnivores, vitrification by needle immersion showed better results in this type of cells. In artiodactyls and rodents both techniques preserved the viability of rounded cells in a similar manner, although the DNA integrity of these cells was greater after needle immersed vitrification in artiodactyls.ConclusionsIn conclusion, the effectiveness of each cryopreservation method is affected by the phylogenetic diversity between species and cell type

    Sur8, a determinant protein in colorectal cancer tumor progression

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    Resumen del trabajo presentado en el 43rd Annual Meeting of the SEBBM, celebrado en Barcelona (España) del 19 al 21 de julio de 2021.Colorectal cancer (CRC) has the highest incidence rate in the Spanish population. The most important challenge consists on the discovery of efficient disease treatments, due to high mortality rates in highly developed stages. Sur8 is a scaffold protein that positively modulates ERK signaling pathway, which has a major role in the progression and metastasis in colorectal cancer. The main goals of our research are to determine the role that Sur8 plays in the development and progression of CRC and to analyze its possible therapeutic potential. For this purpose, our group has developed an inducible conditional mouse model msur8f/fVillinCreERT2. In order to determine Sur8 action in the colonic tissue, we have developed organoids from the colon epithelium of healthy mice and have analyzed gene expression pattern by an RNAseq approach. Sur8 KO affects oncogenic CRC transcription factors expression, as well as the modulation of some Wnt pathway regulators. In regard to miRNA data, we have observed deregulation of miRNAs related to CRC in Sur8 KO organoids. To determine the role that Sur8 plays in the development and progression of CRC, we have subjected our inducible conditional mice to chemical carcinogenesis and we have observed that Sur8 KO males display less and smaller tumors and do not present any adenocarcinoma. In addition, we have carried out Sur8 silencing in human CRC cell lines by infection with constitutive shRNA lentiviruses. We have observed that Sur8 silencing produces decreases of cell tumor proliferation, and reduction of p-ERK levels. Finally, we are evaluating the effects of putative therapeutic agents against Sur8 in human CRC cell lines. Concretely, we are testing Celastrol, which has been described that binds and blocks the action of Sur8 in vitro. We have observed that Celastrol treatment diminishes the cell tumor proliferation in this model. Altogether, our results indicate that Sur8 may have a determinant role in CRC progression and that Sur8 could be a potential molecular target for the design of novel strategies against CRC

    I.amAble: aprendizaje e inclusión educativa mediante talleres científicos

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    I.amAble ha ofrecido a estudiantes universitarios de física, química, veterinaria, biología y educación la oportunidad de complementar su formación mediante el diseño, la realización y la evaluación de talleres científicos que faciliten la inclusión de personas con diversidad cognitiva. Los talleres han sido diseñados por el alumnado universitario de ciencias y perfilados por estudiantes de educación para ser llevados a cabo por alumnado preuniversitario en parejas, de forma que un miembro pertenezca a un centro de secundaria ordinario y el otro miembro a un centro de educación especial. Aquellos talleres que se han considerado más adecuados por su adaptabilidad se han llevado a la práctica guiados por estudiantes de ciencias y de educación. Los miembros del proyecto, que incluyen representantes de todos los estamentos universitarios, han supervisado todas las tareas descritas anteriormente. Además de los miembros de la Universidad Complutense, también figuran personas voluntarias de otras instituciones científicas y educativas. El alumnado universitario ha tenido la posibilidad, no sólo de asentar y profundizar algunos contenidos científicos o poner en práctica algunas de las enseñanzas adquiridas, sino también de desarrollar su empatía, su capacidad de comunicar e improvisar y de adaptarse a un público heterogéneo. Ello ha mejorado sus perspectivas laborales, especialmente dentro de la educación formal e informal (animación sociocultural, museos científicos...). Además, han contribuido a facilitar la inclusión educativa de las personas con diversidad funcional y a mejorar la cultura científica de la sociedad. Con este proyecto, inspirado en la metodología Aprendizaje-Servicio (ApS), se ha pretendido también mejorar la accesibilidad a las experiencias y contenidos científicos y facilitar la inclusión educativa de las personas con diversidad funcional, especialmente diversidad cognitiva o intelectual. En la primera edición de I.amAble (2016-17) se hizo hincapié en el diseño y selección de fichas para hacer talleres (aunque también se realizaron talleres). En la segunda edición (2017-18) se puso un mayor énfasis en llevar los talleres a un mayor número de centros educativos. En la pasada edición (2018-19) se puso el acento en los procesos de evaluación. En esta cuarta edición (2019-20), se han seguido trabajando y puliendo todos esos aspectos, pero se ha priorizado la transformación de I.amAble en un proyecto de tipo aprendizaje-servicio, integrándolo en asignaturas formales, concretamente en Complementos de Física y Complementos de Química, del Máster en Formación de Profesorado, en la especialidad de Física y Química
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