Differential Role of Threonine and Tyrosine Phosphorylation in the Activation and Activity of the Yeast MAPK Slt2

The Mitogen-Activated Protein Kinase (MAPK) Slt2 is central to signaling through the yeast Cell Wall Integrity (CWI) pathway. MAPKs are regulated by phosphorylation at both the threonine and tyrosine of the conserved TXY motif within the activation loop (T190/Y192 in Slt2). Since phosphorylation at both sites results in the full activation of MAPKs, signaling through MAPK pathways is monitored with antibodies that detect dually phosphorylated forms. However, most of these antibodies also recognize monophosphorylated species, whose relative abundance and functionality are diverse. By using different phosphospecific antibodies and phosphate-affinity (Phostag) analysis on distinct Slt2 mutants, we determined that Y192- and T190-monophosphorylated species coexist with biphosphorylated Slt2, although most of the Slt2 pool remains unphosphorylated following stress. Among the monophosphorylated forms, only T190 exhibited biological activity. Upon stimulation, Slt2 is first phosphorylated at Y192, mainly by the MAPKK Mkk1, and this phosphorylation is important for the subsequent T190 phosphorylation. Similarly, dephosphorylation of Slt2 by the Dual Specificity Phosphatase (DSP) Msg5 is ordered, with dephosphorylation of T190 depending on previous Y192 dephosphorylation. Whereas Y192 phosphorylation enhances the Slt2 catalytic activity, T190 is essential for this activity. The conserved T195 residue is also critical for Slt2 functionality. Mutations that abolish the activity of Slt2 result in a high increase in inactive Y192- monophosphorylated Slt2. The coexistence of different Slt2 phosphoforms with diverse biological significance highlights the importance of the precise detection of the Slt2 phosphorylation status

Elaboración de informes virtuales de prácticas de Microbiología general, odontológica e industrial basados en fotografías y su integración en un banco común de imágenes de Microbiología

Este proyecto, que se platea como continuación del número 161 del curso 2016-2017, propone la creación y realización de informes de prácticas virtuales en distintas asignaturas del área de la Microbiología. Con ello, se pretende incentivar el estudio y mejorar el aprovechamiento de las prácticas realizadas por alumnos de distintos cursos, Grados y Facultades, mediante el uso de las nuevas tecnologías y metodologías más visuales. Dichas asignaturas son: • Microbiología e Inmunología, 2º curso Grado de Odontología, Facultad de Odontología. • Microbiología, 3º curso Grado en Farmacia, Facultad de Farmacia. • Microbiología Industrial y biotecnología (MIBT), 2º curso Grado en Ciencia y Tecnología de los alimentos (CYTA), Facultad de Veterinaria. Se han construido 4 espacios virtuales con plantillas de los informes de prácticas, ya que el proyecto se realizó en 4 grupos distintos. De esta forma se tendrían guías virtuales de las distintas asignaturas con la inclusión de las fotografías y su interpretación. También se comprobaría la utilidad de esta metodología según la estructura de las prácticas de las asignaturas y/o la idiosincrasia de los distintos grupos de alumnos. El otro objetivo general del proyecto es el almacenamiento y clasificación de las fotografías realizadas para ampliar el banco de fotografías de microorganismos y pruebas microbiológicas. Esto, también justifica la elección de las 3 asignaturas mencionadas. El proyecto se ha desarrollado según lo previsto y se han alcanzado de manera satisfactoria los objetivos propuestos. Además, aunque de forma desigual según las asignaturas, la realización de este proyecto ha resultado de interés para los estudiantes, repercutiendo de forma positiva en algunas calificaciones y no representando una carga de trabajo adicional excesiva. Para los profesores y otros miembros del equipo del proyecto también ha supuesto una experiencia gratificante y el material generado puede ahora tener múltiples aplicaciones docentes. Por lo tanto, está metodología se podrá seguir utilizando si los profesores así lo desean en las prácticas de las asignaturas en las que haya presentado mayor utilidad.Depto. de Microbiología y ParasitologíaFac. de FarmaciaFALSEsubmitte

Creación de un aula práctica de oficina de farmacia para la simulación de un entorno real de enseñanza para el futuro farmacéutico

El objetivo general de este proyecto es la puesta en marcha de un aula práctica de farmacia en la Facultad de Farmacia que simula una oficina de farmacia real con el fin de su utilización en la enseñanza y evaluación de las diferentes materias y prácticas que forman parte de las titulaciones impartidas. En esta aula se ha instalado el mobiliario que requiere una oficina de farmacia (Mostrador, estanterías, cajoneras, equipamiento informático, etc.). Además, se han instalado los programas informáticos (Software BOT Plus, Pharmatics, etc.) habitualmente utilizados en las oficinas de farmacia para su adecuada gestión. Esta instalación cuenta con todas las prestaciones de una farmacia absolutamente puntera. Desde el mobiliario y el acondicionamiento tanto del espacio como de los medicamentos y productos sanitarios que van a encontrar los estudiantes, hasta los sistemas de hardware y software informáticos para la optimización de la gestión farmacéutica. Además, se han instalado recursos docentes como son pupitres y sillas con ruedas, para facilitar la enseñanza práctica por grupos, y una pantalla táctil conectada mediante red WiFi para facilitar la docencia e interacción con los estudiantes. Con la puesta en marcha del aula práctica de oficina de farmacia se ha creado por primera vez en la Facultad de Farmacia un espacio eminentemente práctico asistencial, en el que el farmacéutico puede poner a prueba su destreza tal y como se hace en otras facultades de ciencias de la salud y respondiendo a la creciente demanda de la sociedad del papel del farmacéutico

Educating in antimicrobial resistance awareness: adaptation of the Small World Initiative program to service-learning.

The Small World Initiative (SWI) and Tiny Earth are a consolidated and successful education programs rooted in the USA that tackle the antibiotic crisis by a crowdsourcing strategy. Based on active learning, it challenges young students to discover novel bioactive-producing microorganisms from environmental soil samples. Besides its pedagogical efficiency to impart microbiology content in academic curricula, SWI promotes vocations in research and development in Experimental Sciences and, at the same time, disseminates the antibiotic awareness guidelines of the World Health Organization. We have adapted the SWI program to the Spanish academic environment by a pioneering hierarchic strategy based on service-learning that involves two education levels (higher education and high school) with different degrees of responsibility. Throughout the academic year, 23 SWI teams, each consisting of 3-7 undergraduate students led by one faculty member, coordinated off-campus programs in 22 local high schools, involving 597 high school students as researchers. Post-survey-based evaluation of the program reveals a satisfactory achievement of goals: acquiring scientific abilities and general or personal competences by university students, as well as promoting academic decisions to inspire vocations for science- and technology-oriented degrees in younger students, and successfully communicating scientific culture in antimicrobial resistance to a young stratum of society

Substrates of the MAPK Slt2: Shaping Yeast Cell Integrity

The cell wall integrity (CWI) MAPK pathway of budding yeast Saccharomyces cerevisiae is specialized in responding to cell wall damage, but ongoing research shows that it participates in many other stressful conditions, suggesting that it has functional diversity. The output of this pathway is mainly driven by the activity of the MAPK Slt2, which regulates important processes for yeast physiology such as fine-tuning of signaling through the CWI and other pathways, transcriptional activation in response to cell wall damage, cell cycle, or determination of the fate of some organelles. To this end, Slt2 precisely phosphorylates protein substrates, modulating their activity, stability, protein interaction, and subcellular localization. Here, after recapitulating the methods that have been employed in the discovery of proteins phosphorylated by Slt2, we review the bona fide substrates of this MAPK and the growing set of candidates still to be confirmed. In the context of the complexity of MAPK signaling regulation, we discuss how Slt2 determines yeast cell integrity through phosphorylation of these substrates. Increasing data from large-scale analyses and the available methodological approaches pave the road to early identification of new Slt2 substrates and functions