Avaliação da bioatividade de quatro lenhinas técnicas: Alcell, Indulin-AT, Sarkanda e Curan 27-11P

Mestrado em cooperação com a Universidade de SalamancaAo longo dos últimos anos tem-se observado um interesse crescente pelo estudo de compostos naturais devido ao seu elevado potencial do ponto de vista medicinal. A seguir à celulose, a lenhina é o composto mais abundante na biosfera. É biosintetizada através do processo de lenhificação, iniciado pelos álcoois p-coumarílico, coniferílico e sinapílico, que originam unidades de fenilpropano (p-hidroxifenilo, guaiacilo e seringilo). Neste trabalho, avaliou-se o potencial antioxidante e antitumoral de quatro lenhinas técnicas de origens diferentes (Indulin-AT, Curan-27-11P, Sarkanda e Alcell). As propriedades antioxidantes foram determinadas por ensaios in vitro (atividade captadora de radicais livres, poder redutor e inibição da peroxidação lipídica). O potencial citotóxico foi avaliado em linhas celulares tumorais humanas nomeadamente, MCF-7 (carcinoma de mama), NCI-H460 (carcinoma pulmão), HCT-15 (carcinoma de cólon), HeLa (carcinoma cervical) e HepG2 (carcinoma hepatocelular); e em culturas primárias de células de fígado de porco (PLP2) pelo método da sulforrodamina B (SRB). Todas as amostras mostraram possuir propriedades bioativas, com maior destaque para a Alcell que demonstrou ter maior potencial antioxidante e antitumoral. Os resultados obtidos foram correlacionados com características estruturais e químicas das lenhinas estudadas. Com base nos dados obtidos pode concluir-se que as lenhinas ricas em unidades fenólicas de siringilo e pobres em p-hidroxifenilo demonstraram maior atividade antitumoral in vitro.Over the past few years there has been a great interest in studying natural compounds due to their potentially high medicinal properties. Lignin is, after cellulose, the most abundant biopolymer on earth. It is obtained through the lignification process, initiated by p-coumaryl, coniferyl and sinapyl alcohols, which originate phenylpropane units (p-hydroxyphenyl, guaiacyl and syringyl). In the present work, the antioxidant and antitumor potential of four technical lignins from different origins (Indulin-AT, Curan-27-11P, Sarkanda and Alcell) were evaluated. Antioxidant properties were determined by in vitro assays (free radicals scavenging activity, reducing power and lipid peroxidation inhibition). The cytotoxic potential was evaluated, by sulforhodamine B assay, in different human tumor cell lines (MCF-7- breast carcinoma, NCI-H460- lung carcinoma, HCT-15- colon carcinoma, HeLa- cervical carcinoma and HepG2- hepatocellular carcinoma) and in non-tumor primary culture of porcine liver cells (PLP2). All the samples displayed bioactive properties, showing Alcell the highest antioxidant and antitumor potential. The obtained results were correlated with the chemical and structural features of the studied lignins. Based on the achieved results, it can be concluded that lignins rich in syringyl phenol units and poor in p-hydroxyphenyl ones gave higher in vitro antitumor activity

Contributo para o perfil epidemiológico das principais doenças da criação de abelhas melíferas na região centro de Portugal

Existem várias doenças que afetam as crias de abelhas melíferas e é fundamental reconhecer as mais importantes devido aos prejuízos económicos que podem originar. -Na região de Leiria, a atividade apícola é predominantemente não profissional, porém é a maior do país relativamente ao número de apicultores (38% do total nacional) (Programa Apícola Nacional, 2010)

Insights in the antioxidant synergistic effects of combined edible mushrooms: phenolic and polysaccharidic extracts of Boletus edulis and Marasmius oreades

In a previous work, we reported the presence of Marasmius oreades in mixtures with antioxidant synergistic effects, and the mixture Boletus edulis and Marasmius oreades (50% of each) as having the highest antioxidant activity, but without synergism among the phenolic extracts. Herein, phenolic and polysaccharidic extracts from both species were combined in different proportions (12.5, 25, 50, 75 and 87.5%) and compared to controls (individual samples), in order to give insight in the contribution of each species to antioxidant synergistic effects. The antioxidant activity of the individual or combined extracts obtained from both edible mushrooms was evaluated through their 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical-scavenging activity, reducing power, -carotene bleaching inhibition and lipid peroxidation inhibition in brain homogenates using thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) assay. Synergism was the main observed effect among the combined extracts, either phenolic or polysaccharidic. However, the effect of each B. edulis and M. oreades proportion was not the same for all antioxidant activity assays. In fact, the same mixture exhibited sometimes opposite behaviours according with the performed antioxidant activity assay

Ação antimicrobiana de extratos fenólicos de cogumelos silvestres contra Neisseria gonorrhoeae

Infeções pelo gonococo e por clamídia estão entre as doenças sexualmente transmissíveis mais comuns causadas por bactérias no mundo. Por outro lado, tem-se verificado um aumento de resistência da Neisseria gonorrhoeae aos diferentes antimicrobianos usados no mercado, sendo desta forma urgente a descoberta de novas soluções antimicrobianas no combate a esta infeção. Assim, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana de extratos e respetivos compostos fenólicos puros de nove espécies de cogumelos silvestres, provenientes do Nordeste de Portugal, contra Neisseria gonorrhoeae obtida de exsudados da uretra no CHTMAD – Centro Hospitalar de Trás-os-Montes e Alto Douro. Para a determinação das concentrações mínimas inibitórias (CMI) de crescimento recorreu-se ao método da microdiluição e ao ensaio colorimétrico com cloreto de p-iodonitrotetrazólio (INT). De um modo geral, todos os extratos apresentaram atividade antimicrobiana sobre a Neisseria gonorrhoeae, e alguns compostos parecem apresentar boa atividade antimicrobiana para esta bactéria, tornando-se pertinente estudar o mecanismo de ação destes compostos na inibição da bactéria bem como a sua toxicidade celular no sentido de avaliar possíveis aplicações clínicas na terapêutica e mesmo na prevenção da gonorreia

Efeitos sinergistas da atividade antioxidante de cogumelos comestíveis: mistura de extratos fenólicos e polissacarídicos de Boletus edulis e Marasmius oreades.

Neste trabalho, avaliou-se a atividade antioxidante de diferentes misturas de Marasmius oreades e Boletus edulis (12,5/87,5, 25/75, 50/50, 75/25, 87,5/12,5) e comparou-se com os controlos (amostras individuais), com o objetivo de verificar qual das misturas contribui para efeitos sinergistas. As propriedades antioxidantes foram avaliadas por quatro métodos químicos e bioquímicos, sendo ainda determinados os fenóis totais (extratos fenólicos) e o teor em polissacáridos (extratos polissacarídicos). Foram observadas três tipos de interações utilizando as diferentes misturas de cogumelos: efeitos aditivos, sinergistas e antagonistas. Os resultados obtidos mostraram diferentes comportamentos nos ensaios de atividade antioxidante de acordo com as proporções utilizadas, indicando que as misturas de cogumelos permitem a ocorrência de diferentes interações químicas entre os compostos obtidos em cada espécie. Todas as diferentes proporções utilizadas de cada cogumelo demonstraram ter atividade antioxidante e, independentemente das proporções utilizadas, os extratos polissacarídicos apresentaram maior atividade antioxidante que os extratos fenólicos. Verificou-se também que a mesma mistura pode induzir um efeito sinergista num método de atividade antioxidante e um efeito antagonista noutro método de atividade antioxidante

Avaliação da bioatividade de quatro lenhinas técnicas: Alcell, Sarkanda, Indulin-At e Curan 27-11P.

A lenhina é uma das substâncias mais abundantes do reino vegetal; contribuiu para a rigidez da parede celular e confere proteção química contra herbívoros, insetos e fungos. Possui uma estrutura tridimensional amorfa formada por unidades fenil-propano (p-hidroxifenilo, guaiacilo e seringilo). Os grupos funcionais de maior importância incluem grupos hidroxilo, metoxilo, carbonilo e carboxilo, presentes em proporções variadas dependendo da origem botânica e do processo de extração utilizado (1). O objetivo do presente trabalho consistiu na avaliação da bioatividade de quatro lenhinas técnicas: Alcell, Sarkanda, Indulin-AT e Curan 27-11P. A atividade antioxidante foi avaliada em condições in vitro, utilizando três ensaios diferentes: poder redutor (PR), atividade captadora de radicais 2,2-difenil-1-picril-hidrazilo (DPPH) e inibição da descoloração do β-caroteno (IDC). O potencial antitumoral foi testado em quatro linhas celulares tumorais humanas: MCF-7 (carcinoma de mama), HCT15 (carcinoma de cólon), HeLa (carcinoma cervical) e HepG2 (carcinoma hepatocelular), usando o ensaio da Sulforodamina B. Adicionalmente, a ausência de toxicidade para as células nãotumorais foi confirmada usando uma cultura primária de células de fígado de porco (PLP2). Todas as lenhinas testadas demonstraram ser bioativas no que respeita às propriedades estudadas. A Alcell destacou-se claramente das outras amostras quer pela sua atividade antioxidante (sobretudo nos ensaios de DPPH- EC50=63 mg/mL e IDC- EC50=26 mg/mL), quer pela capacidade de inibição da proliferação das linhas celulares tumorais HCT15 (GI50=56 μg/mL), HeLa (GI50=17 μg/mL) e HepG2 (GI50=46 μg/mL). A Indulin-AT revelou o maior PR (EC50=151 mg/mL), enquanto a Sarkanda revelou o maior potencial antitumoral para a linha MCF-7 (GI50=28 μg/mL). Os resultados observados podem estar correlacionados com o tipo e concentração dos grupos hidroxilo identificados nas lenhinas estudadas (1). Nomeadamente, a Indulin-AT revelou possuir o maior teor de grupos hidroxilo total; a Alcell o menor teor de hidroxilos alifáticos, enquanto a Sarkanda demonstrou ter o menor teor de hidroxilos fenólicos

Avaliação da boatividade de frações fenólicas de Eucalyptus globulus labill

No contexto industrial, Eucalyptus globulus Labill é uma das espécies mais importantes para a obtenção de pasta de papel. Deste processo resulta um resíduo, a casca, cuja valorização por extração dos polifenóis tem sido estudada no LSRE [1-3]. Neste âmbito, o extrato obtido utilizando condições otimizadas, foi fracionado por ultra- e/ ou nano-filtração e purificado por adsorção/dessorção. O extrato inicial (Fração I) foi diafiltrado (Fração II) e submetido a um processo de adsorção/desorção. Daqui resultaram 2 frações: a fração recolhida à saída da coluna (Fração III) e a fração purificada obtida por dessorção com etanol (Fração IV). As propriedades antioxidantes das quatro frações (Fração I-IV) foram avaliadas através de ensaios in vitro (atividade captadora de radicais livres, poder redutor e inibição da peroxidação lipídica). Na determinação das propriedades citotóxicas aplicou-se o método da sulforrodamina B a linhas celulares tumorais humanas designadamente, MCF-7 (carcinoma de mama), NCI-H460 (carcinoma pulmão), HCT-15 (carcinoma de cólon), HeLa (carcinoma cervical) e HepG2 (carcinoma hepatocelular). A citotoxicidade das frações foi também avaliada utilizando culturas primárias de células de fígado de porco (células não-tumorais, PLP2). A fração purificada (Fração IV) mostrou ter melhor atividade antioxidante (valores de EC50 inferiores a 841-lg/mL) e antitumoral, (valores de GI50 inferiores a 921-lg/mL) com exceção da linha celular MCF-7 em que a fração à saída da coluna (Fração III) originou melhores resultados (GI50=23 11g/mL). Nenhuma amostra apresentou toxicidade contra células não tumorais (Gl50>400 11g/mL). A maior bioatividade demonstrada pela fração purificada está certamente relacionada com o seu teor superior em compostos fenólicos totais (67%) e proantocianidinas (55 o/o)

Epidemiological profile of honey bee diseases in different regions at center of Portugal

Existen varias enfermedades conocidas de las abejas melíferas y es fundamental en la actualidad que los apicultores aprendan a reconocer las más importantes debido a las graves pérdidas económicas que pueden representar, incluso llevando al abandono de la actividad apícola, tanto a nivel nacional como mundial. Estimar la prevalencia clínica de las principales enfermedades de las abejas es uno de los objetivos descritos en los programas de vigilancia que visan la detección precoz, no solo para prevenir la propagación como también para la toma de decisiones en el momento de realizar tratamientos. La Asociación de Apicultores de la Región de Leiria se encuentra en la zona de Leiria que a su vez pertenece a la Región Centro de Portugal. Tiene cerca de 550 asociados que obtienen una producción media anual de cerca de 100 toneladas de diferentes tipos de miel, principalmente de eucalipto, romero y miel multifloral. Maneja una de las dieciocho Zonas Controladas (áreas donde la ausencia de la enfermedad no se ha demostrado, pero hay un control sistemático de enfermedades, realizado por la entidad de gestión reconocida por la autoridad sanitaria nacional (DGAV) en el continente (Associação de Apicultores da Região de Leiria, 2010) En esta región la actividad apícola es predominantemente no profesional. Sin embargo, esta región es la mayor del país con respecto al número de apicultores (38% del total nacional). Las explotaciones apícolas tienen una dimensión media de 25,0 colmenas y cada apicultor tiene una media aproximada de 2 colmenares (Programa Apícola Nacional, 2010). La información sobre la prevalencia y distribución de las enfermedades de las abejas adultas en esta región a lo largo del tiempo es escasa. Así, este trabajo tuvo como objetivo general caracterizar epidemiológicamente las enfermedades de las abejas adultas en el área de influencia de una de las Asociaciones de Apicultores pertenecientes al Centro de Portugal.The aim of this study was to determine the prevalence of the adult honey bee's diseases at the Central Region of Portugal. Adult bees' samples were collected and analysed at the Laboratory of Honey Bee Pathology at Escola Superior Agraria de Bragança (LPAESAB). Samples were processed for epidemiological characterization of diseases of adult honey bees. In general, the prevalence of Varroa mites and Nosemosis increased over the years. Also, the results attained show that Varroatosis, Nosemosis and Myasis, occur along all the years and seasons. The diagnosis of Varroatosis and Nosemosis were higher (P<0,05) during Autumn than in the summer The Varroatosis and Nosemosis are both the major diseases of the adult honey bees presenting the higher concerns at regional and national level. Positive cases of Acarapisosis are indicative of a failure in acaricide treatment. We conclude that higher efforts are needed in order to define the strategies for the control of these diseases

Epidemiological profile of honey bee brood diseases in different regions at center of Portugal

The aim of this study was to determine the prevalence of the honey bee brood diseases at the Central Region of Portugal through the seven last years. Bee brood samples were collected and analysed at the Laboratory of Honey Bee Pathology at Escola Superior Agrária de Bragança (LPAESAB). Samples were processed for epidemiological characterization of diseases of honey bee brood. In general, only the prevalence of varroatosis increased over the years. Also, the results attained show that varroatosis, chalkbrood and American Foulbrood, occur through the years and seasons. The diagnosis of chalkbrood were higher (P<0, 05) during summer than in the autumn and winter. The varroatosis and chalkbrood are both the major diseases of the honey bee brood presenting the higher concerns at regional and national level. Positive cases of varroatosis are probably indicative of a failure in acaricide treatment and effectiveness. We conclude that higher efforts are needed in order to define the strategies for the control of honey bee brood diseases in Portugal

Efeitos sinergistas da atividade antioxidante de cogumelos comestíveis: mistura de extratos fenólicos e polissacarídicos de Boletus edulis e Marasmius oreades

Os cogumelos são uma excelente fonte de proteínas, glúcidos, fibras e vitaminas. Constituem um alimento muito apreciado devido essencialmente ao seu aroma e textura, sendo preparados/processados de diversas formas, ou utilizados como aromatizantes em sopas e molhos [1]. São ainda conhecidos pela sua bioatividade, quer antimicrobiana, antitumoral ou antioxidante. Neste trabalho, avaliou-se a atividade antioxidante de diferentes misturas de Marasmius oreades e Boletus edulis (12,5/87,5, 25/75, 50/50, 75/25, 87,5/12,5) e comparou-se com os controlos (amostras individuais), com o objetivo de verificar qual das misturas contribui para efeitos sinergistas. As propriedades antioxidantes foram avaliadas por quatro métodos químicos e bioquímicos, sendo ainda determinados os fenóis totais (extratos fenólicos) e o teor em polissacáridos (extratos polissacarídicos). Foram observadas três tipos de interações utilizando as diferentes misturas de cogumelos: efeitos aditivos, sinergistas e antagonistas. Os resultados obtidos mostraram diferentes comportamentos nos ensaios de atividade antioxidante de acordo com as proporções utilizadas, indicando que as misturas de cogumelos permitem a ocorrência de diferentes interações químicas entre os compostos obtidos em cada espécie. Todas as diferentes proporções utilizadas de cada cogumelo demonstraram ter atividade antioxidante e, independentemente das proporções utilizadas, os extratos polissacarídicos apresentaram maior atividade antioxidante que os extratos fenólicos. Verificou-se também que a mesma mistura pode induzir um efeito sinergista num método de atividade antioxidante e um efeito antagonista noutro método de atividade antioxidante. Estes resultados indicam que existem diferentes composições de compostos antioxidantes em cada espécie de cogumelo, demostrando também que a proporção de cada cogumelo deve ser definida considerando o efeito específico a que se destina: poder redutor, capacidade captadora de radicais livres ou inibição da peroxidação lipídica