Quantitative trait locus analysis of parasite density reveals that HbS gene carriage protects severe malaria patients against Plasmodium falciparum hyperparasitaemia

This deposit is composed by the main article, and it hasn't any supplementary materials associated.Haemoglobin S (HbS) is the gene known to confer the strongest advantage against malaria morbidity and mortality. Multiple HbS effects have been described resulting in protection against parasitaemia and reduction of severe malaria risk. This study aimed to explore HbS protection against severe malaria and Plasmodium falciparum parasitaemia in Angolan children exhibiting different severe malaria syndromes.Instituto Gulbenkian de Ciência

Susceptibilidade genética à malária cerebral em crianças angolanas

Tese de doutoramento, Medicina (Genética), Universidade de Lisboa, Faculdade de Medicina, 2010As manifestações neurológicas da infecção pelo Plasmodium falciparum, que culminam com o coma não despertável, configuram a síndroma de malária cerebral. Esta é uma das síndromas mais graves de malária severa que contribui, em larga escala, para a elevada mortalidade da malária em crianças da África subsaariana. A identificação de variantes genéticas do hospedeiro que influenciam a evolução clínica da malária severa e que determinam a fisiopatologia da malária cerebral é um dos desafios que persistem na investigação de factores genéticos da malária. Esta tese teve como principal objectivo investigar variantes genéticas que, de um modo específico, permitissem diferenciar factores de risco de malária cerebral de factores de risco de malária severa não cerebral. Foi desenhado um estudo de associação de casos-controlos, tendo-se analisado dezassete genes previamente correlacionados com a malária severa em 749 crianças angolanas. O estudo compara 130 casos de malária cerebral com 158 controlos de malária severa não cerebral, para detectar factores de risco específicos de malária cerebral. Para confirmar a exclusividade de eventuais factores de risco específicos de malária cerebral, os casos foram igualmente comparados a outros dois grupos controlo: 1) malária não complicada (142 doentes) e 2) crianças assintomáticas não infectadas (319 crianças).No gene Transforming growth factor, beta 2 (TGFB2) foi identificado um haplótipo que, apenas no contexto da malária severa, aumenta o risco de progressão para a malária cerebral, permitindo distinguir os doentes com malária cerebral dos doentes com malária severa não cerebral. No gene Heme oxygenase 1 (HMOX1) foram identificados haplótipos que influenciam a evolução clínica da malária severa, quer conferindo susceptibilidade à malária cerebral, quer diminuindo o risco de malária cerebral e de outras formas de malária severa. Todavia, exclusivamente nos doentes com malária cerebral, a configuração genotípica do haplótipo protector do gene HMOX1 diminui os níveis plasmáticos do heme livre e concomitantemente promove o aumento da expressão do gene HMOX1. Os resultados deste estudo sugerem que o gene TGFB2 é um novo gene candidato para futuros estudos de associação à malária severa e especialmente à malária cerebral. O papel regulador evidenciado por variantes genéticas do HMOX1 no metabolismo do heme nos doentes com malária cerebral, associado ao aumento de expressão génica do HMOX1, poderá proporcionar elementos adicionais para a patogénese da malária cerebral. Esta tese realiza um escrutínio de genes que foram associados à malária severa para determinar o seu papel na evolução deste conjunto de síndromas, tendo concluído que apesar de parte dos genes associados à malária terem efeitos em múltiplos níveis na evolução clínica da doença, variantes dos genes TGFB2 e HMOX1 parecem afectar especificamente o risco de desenvolver malária cerebral.The neurological manifestations of Plasmodium falciparum infection, which culminate with an unarousable coma, constitute the cerebral malaria syndrome. This is one of the most life-threatening syndromes of severe malaria and largely contributes to the high mortality from malaria in sub-Saharan African children. In the investigation of severe malaria genetic risk factors, the challenge persists to identify specific genetic variants that could influence the clinical course of severe malaria and determine the physiopathology of cerebral malaria. The main objective of this thesis focused on the detection of genetic variants that specifically differentiate cerebral malaria risk factors from those related to severe non-cerebral malaria. A case-control study was performed in 749 angolan children to investigate seventeen candidate genes previously associated with severe malaria. The study compares 130 cerebral malaria cases to 158 severe non-cerebral malaria controls. To confirm the pathogenesis specificity of the cerebral malaria risk factors, cerebral malaria cases were also compared to other two control groups: 1) uncomplicated malaria (142 patients) and 2) asymptomatic uninfected children (319 individuals). One haplotype in the Transforming growth factor, beta 2 (TGFB2) gene showed to increase specifically the risk of progression to cerebral malaria and in the context of the severe disease was over-represented in cerebral malaria patients as compared to patients with severe non-cerebral malaria. This study also identified Heme oxygenase 1 (HMOX1) gene haplotypes conferring either increased risk of cerebral malaria or decreased risk of developing different forms of severe malaria. Strikingly, the genetic configuration of the HMOX1 gene protective haplotype decreased plasma levels of free heme, only in patients with cerebral malaria and concomitantly promoted the increase of HMOX1 gene expression. The results of this study suggest that the TGFB2 gene is a novel candidate gene for future severe malaria genetic association studies, particularly cerebral malaria. The regulatory role evidenced by genetic variants of the HMOX1 gene in the plasma free-heme metabolism, and in the gene expression of the HMOX1 gene of cerebral malaria patients, may provide additional clues for the cerebral malaria pathogenesis. This thesis scrutinized a set of genes that were associated with severe malaria to determine their role in the evolution of the severe disease. It was found out that, though some of the genes associated with malaria had effects at multiple levels in the clinical course of the disease, variations in the TGFB2 and HMOX1 genes seem to affect specifically the risk of progressing to cerebral malaria.Instituto Gulbemkian de Ciência; Instituto Português de Apoio ao Desenvolvimento; Ministério dos Petróleos de Angol

Impact of a training course on the quality of malaria diagnosis by microscopy in Angola

Background: In Angola, malaria is an endemic disease having a major impact on the economy. The WHO recommends testing for all suspected malaria cases, to avoid the presumptive treatment of this disease. In malaria endemic regions laboratory technicians must be very comfortable with microscopy, the golden standard for malaria diagnosis, to avoid the incorrect diagnosis. The improper use of medication promotes drug resistance and undesirable side effects. The present study aims to assess the impact of a three-day refresher course on the knowledge of technicians, quality of blood smears preparation and accuracy of microscopy malaria diagnosis, using qPCR as reference method. Methods: This study was implemented in laboratories from three hospitals in different provinces of Angola: Bengo, Benguela and Luanda. In each laboratory samples were collected before and after the training course (slide with thin and thick blood smears, a dried blood spot and a form). The impact of the intervention was evaluated through a written test, the quality of slide preparation and the performance of microscopy. Results: It was found a significant increase on the written test median score, from 52.5% to 65.0%. A total of 973 slides were analysed to evaluate the quality of thick and thin blood smears. Considering all laboratories there was a significant increase in quality of thick and thin blood smears. To determine the performance of microscopy using qPCR as the reference method we used 1,028 samples. Benguela presented the highest values for specificity, 92.9% and 98.8% pre and post-course, respectively and for sensitivity the best pre-course was Benguela (75.9%) and post-course Luanda (75.0%). However, no significant increase in sensitivity and specificity after the training course was registered in any laboratory analysed. Discussion: The findings of this study support the need of continuous refresher training for microscopists and other laboratory staff. The laboratories should have a quality control programme to supervise the diagnosis and also to assess the periodicity of new training. However, other variables needed to be considered to have a correct malaria diagnosis, such as adequate equipment and reagents for staining and visualization, good working conditions, motivated and qualified personnel

Desafios da educação médica e da investigação em saúde no contexto de angola

Os apelos para reformas na educação médica são constantes e têm sido objeto de recomendações produzidas nos últimos cem anos, destacando-se as resultantes da avaliação crítica feita por Abraham Flexner, em 1910, nos Estados Unidos da América. No presente trabalho, abordam-se as tendências e os desafios atuais da educação médica e da investigação em saúde, com ênfase para os países em desenvolvimento, ressaltando-se a realidade africana. Com base na bibliografia consultada, apontam-se e discutem-se alguns desafios que se colocam ao binômio educação médica/investigação em saúde em Angola, muito em especial no contexto da II Região Acadêmica, que integra as províncias de Benguela e Kwanza Sul, destacando-se: (i) a necessidade de incorporar novas abordagens curriculares para o reforço da aprendizagem ao longo da vida; (ii) a aquisição e o desenvolvimento de competências de investigação científica orientadas para a caracterização e intervenção sobre a situação de saúde local; (iii) a inovação dos métodos de ensino e a incorporação de novas tecnologias na educação e prática médica; (iv) a contribuição para o reforço e melhoria da distribuição de médicos na região